【国家标准】 食品安全国家标准 食品接触材料及制品 异噻唑啉酮类化合物迁移量的测定

中华人民共和国国家标准
GB31604.55—2023
食品安全国家标准
食品接触材料及制品
异噻唑啉酮类化合物迁移量的测定2023-09-06发布
中华人民共和国国家卫生健康委员会国家市场监督管理总局
2024-03-06实施
1范围
食品安全国家标准
食品接触材料及制品
异噻唑啉酮类化合物迁移量的测定GB31604.55—2023
本标准规定了食品接触材料及制品中1，2-苯并异噻唑基-3（2H)-酮、2-甲基-3（2H)-异噻唑琳酮和5-氯-2-甲基-2H-异噻唑-3-酮迁移量的测定方法。本标准适用于食品接触用塑料、涂料和涂层、橡胶、纸和纸板，以及使用油墨或黏合剂的食品接触材料及制品中1,2-苯并异噻唑基-3(2H)-酮、2-甲基-3(2H)-异噻唑啉酮和5-氯-2-甲基-2H-异噻唑-3-酮迁移量的测定。
高效液相色谱法
第一法
2原理
食品接触材料及制品根据GB31604.1及GB5009.156进行迁移试验后，采用高效液相色谱法进行检测。其中水、4%（体积分数）乙酸、10%（体积分数）乙醇、20%（体积分数）乙醇、50%（体积分数）乙醇食品模拟物及化学替代溶剂95%（体积分数）乙醇浸泡液过滤后直接进样；含油脂食品模拟物和化学替代溶剂异辛烷浸泡液通过甲醇-水溶液萃取后取下层过滤进样。采用紫外检测器或二极管阵列检测器检测，峰面积外标法定量。
试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为色谱纯，水为GB/T6682规定的一级水。3.1试剂
3.1.1酸性、含乙醇、含油脂食品模拟物及化学替代溶剂：所用试剂需满足GB5009.156的要求。甲醇(CH,O)。
四氢呋喃（C,HO)。
正己烷（CHu）。
试剂配制
酸性、含乙醇食品模拟物及化学替代溶剂：按GB5009.156的规定配制，甲醇溶液：分别量取50mL甲醇和50mL水，混匀。标准品
1，2-苯并异噻唑基-3（2H)-酮（C,H，NOS，CAS号：2634-33-5）：纯度≥95%，或经国家认证并授1
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予标准物质证书的标准品。
3.3.22-甲基-32H)-异噻唑啉酮（C,H;NOS.CAS号：2682-20-4）：纯度≥95%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准品，
3.3.35-氯-2-甲基-2H-异噻唑-3-酮（C,H,C1INOS，CAS号：26172-55-4）：纯度≥95%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准品。
3.4标准溶液配制
3.4.1异噻唑啉酮标准储备溶液（1000mg/L,溶剂为甲醇）：分别准确称取3种异噻唑啉酮标准品各25mg（精确到0.1mg），用甲醇溶解后转移至同一25mL棕色容量瓶中，并用甲醇定容至刻度后摇匀。将溶液转移至棕色玻璃瓶中，于4℃冰箱中避光密闭保存，保存期为6个月。3.4.2异噻唑啉酮标准中间溶液A(100mg/L.溶剂为甲醇)：分别准确移取异噻唑啉酮标准储备溶液1mL于10mL棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度后摇匀。将溶液转移至棕色玻璃容器中，于在4℃冰箱中避光密闭保存，保存期为3个月。3.4.3异噻唑啉酮标准中间溶液B(10mg/L,溶剂为甲醇）：准确移取1mL异噻唑啉酮标准中间溶液A于10mL棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度后摇匀。将溶液转移至棕色玻璃容器中，于4℃冰箱中避光密闭保存，保存期为3个月。3.4.4异噻唑啉酮标准中间溶液C(100mg/L，溶剂为四氢呋喃）：分别准确移取3种异噻唑啉酮标准储备溶液1mL于10mL棕色容量瓶中，用四氢峡定容至刻度后摇匀。将溶液转移至棕色玻璃容器中，于4℃冰箱中避光密闭保存，保存期为3个月。3.4.5异噻唑琳酮标准中间溶液D(10mg/L,溶剂为四氢呋哺）：准确移取1mL异噻唑嘛酮标准中间溶液C于10mL棕色容量瓶中，用四氢呋喃定容至刻度后摇匀。将溶液转移至棕色玻璃容器中，于4℃冰箱中避光密闭保存，保存期为3个月。3.4.6标准工作溶液配制如下：
水、酸性、含乙醇食品模拟物的标准工作溶液：分别准确移取30uL、50μL、100μL、300μL、a)
500L标准中间溶液A于5个10mL容量瓶中，用水定容，得到异噻唑啉酮质量浓度分别为0.30mg/L、0.50mg/L、1.0mg/L、3.0mg/L、5.0mg/L的标准工作溶液。采用同样方式，分别用4%（体积分数）乙酸、10%（体积分数）乙醇、20%（体积分数）乙醇、50%（体积分数）乙醇食品模拟物及化学替代溶剂95%（体积分数）乙醇配制同样浓度系列的异噻唑嘛酮标准工作溶液，用针式尼龙过滤器过滤，待上机测定。异辛烷标准工作溶液：分别准确移取30μL、50μL、100μL、300μL、500μL标准中间溶液Cb)
于5个10mL容量瓶中，用异辛烷定容，得到异噻唑啉酮质量浓度分别为0.30mg/L、0.50mg/L、1.0mg/L、3.0mg/L、5.0mg/L的标准工作溶液。分别移取2mL该系列标准工作溶液至5支具塞玻璃离心管中，各加人2mL甲醇溶液（3.2.2），振荡1min，静置分层后，取下层的甲醇溶液，用针式尼龙过滤器过滤，待上机测定、c）含油脂食品模拟物标准工作溶液：分别准确称取5.00g（精确至0.01g）含油脂食品模拟物橄榄油至5个具塞玻璃离心管中，再分别加人15μL、25L、50μL、150μL、250mL标准中间溶液C，涡旋振荡混匀，得到异噻唑啉酮质量浓度分别为0.30mg/kg、0.50mg/kg、1.0mg/kg、3.0mg/kg、5.0mg/kg的标准工作溶液。在每支玻璃离心管中各加入3mL正已烷，再各加人5mL甲醇溶液（3.2.2），涡旋振荡1min，静置分层后，取下层的甲醇溶液，用针式尼龙过滤器过滤，待上机测定。
4仪器和设备
4.1高效液相色谱仪：配紫外检测器或二极管阵列检测器。4.2分析天平：感量分别为0.0001g和0.01g。4.3微量移液器：10μL、100μL和1000μL。4.4
恒温干燥箱或恒温水浴装置
涡旋振荡器。
针式尼龙过滤器：滤膜孔径0.22um。分析步骤
迁移试验
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食品接触材料及制品按照GB31604.1和GB5009.156的规定进行迁移试验。迁移试验所得浸泡液若不能立即测试，应置于4℃下避光保存不超过72h。若进行下一步试验，应将浸泡液恢复至室温后再使用。
5.2试样溶液和空白试液的制备
5.2.1水性、酸性、含乙醇食品模拟物试样溶液取迁移试验所得浸泡液1mL～2mL，用针式尼龙过滤器过滤后，待上机测定。5.2.2化学替代溶剂异辛烷试样溶液移取2mL迁移试验后得到的异辛烧浸泡液于具塞玻璃离心管中.加入2mL甲醇溶液（3.2.2），涡旋振荡1min，静置分层后，取下层的甲醇溶液，用针式尼龙过滤器过滤后，待上机测定。5.2.3含油脂食品模拟物试样溶液称取5.00g（精确至0.01g)迁移试验后得到的橄榄油浸泡液至具塞玻璃离心管中，加人3mL正已烷，再加人5mL甲醇溶液（3.2.2），涡旋振荡1min，静置分层后，取下层的甲醇溶液，用针式尼龙过滤器过滤后，待上机测定。
5.2.4空白试液的制备
取未与食品接触材料及制品接触的食品模拟物和化学替代溶剂，分别按5.1及5.2.15.2.3所述步骤处理，制得空白试液待上机测定。5.3仪器参考条件
5.3.1色谱柱：可耐受高水相的Cl柱，柱长150mm×柱内径3.0mm×固定相粒径3.5um，或同等性能色谱柱。
5.3.2流动相：A为水，B为甲醇，A+B=8十2。5.3.3流速：1mL/min。
5.3.4柱温：40℃。
5.3.5进样量：5μL。
5.3.6检测波长：2-甲基-3(2H)-异噻唑啉酮和5-氯-2-甲基-2H-异噻唑-3-酮为275nm，1,2-苯并异噻3
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唑基-3(2H)-酮为224nm。
5.4标准工作曲线绘制
按照5.3所列仪器参考条件，将标准系列工作液按浓度从低到高的顺序分别注人高效液相色谱仪中，测定各待测目标物相应的峰面积，以异噻唑啉酮的浓度为横坐标、对应的峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线，得到线性回归方程。标准工作溶液的色谱图参见附录A。5.5试样溶液的测定
5.5.1定性测定
按照5.3所列仪器参考条件，分别测定试样溶液和标准工作溶液，如果试样溶液与标准溶液中相对应的色谱峰保留时间偏差在土2.5%范围以内，则可判断样品中存在相应的待测物。5.5.2定量测定
按照5.3所列仪器参考条件，分别将试样溶液和空白试液分别注入高效液相色谱仪中，得到各待测目标物的色谱峰峰面积，根据标准工作曲线计算得到试样溶液和空白试液中异噻唑啉酮的含量，6分析结果的表述
非密封制品类食品接触材料及制品中异噻唑啉酮特定迁移量的计算（以mg/kg表示）对于除了盖子、密封圈、连接件等密封制品（以下简称密封制品）以外的食品接触材料及制品，异噻唑嘛酮特定迁移量以mg/kg表示时，按式（1)进行计算。Xi=(c-c)×VS
式中：
异噻唑啉酮的特定迁移量，单位为毫克每千克（mg/kg）；C
试样溶液中异噻唑啉酮的含量，单位为毫克每升（mg/L）或毫克每千克（mg/kg）；空白试液中异噻唑啉酮的含量，单位为毫克每升（mg/L)或毫克每千克（mg/kg）；一一试样浸泡液的体积或质量，单位为升(L)或千克（kg)；V
—一迁移试验中试样与浸泡液接触的面积，单位为平方分米（dm2）；S。——样品实际使用中与食品接触的面积，单位为平方分米（dm)；（1)下载标准就来标准下载网
m1——样品实际接触固态食品的质量，或实际接触液态食品的体积所对应的食品质量，单位为千克（kg）；各种液态食品按密度为1kg/L将其体积换算为相应的质量。结果至少保留2位有效数字。
密封制品类食品接触材料及制品中异噻唑啉酮特定迁移量的计算（以mg/kg表示）当预期用途已知时，对于密封制品类食品接触材料及制品，异噻唑啉酮特定迁移量以mg/kg表示时，按式（2)进行计算。
(c-c)XVS。
式中：
X——异噻唑啉酮的特定迁移量，单位为毫克每千克（mg/kg）；试样溶液中异噻唑啉酮的含量，单位为毫克每升（mg/L)或毫克每千克（mg/kg）；C
..·（2）
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空白试液中异噻唑啉酮的含量，单位为毫克每升（mg/L)或毫克每千克（mg/kg)；Co
V一—试样浸泡液的体积或质量，单位为升(L)或千克（kg)；S一迁移试验中试样与浸泡液接触的面积，单位为平方分米（dm）；S。密封制品实际使用中与食品接触的面积，单位为平方分米（dm）；m2—一密封制品实际使用容器盛装固态食品的质量，或实际接触液态食品的体积所对应的食品质量，单位为千克（kg）；各种液态食品按密度为1kg/L将其体积换算为相应的质量结果至少保留2位有效数。
6.3密封制品类食品接触材料及制品中异噻唑啉酮特定迁移量的计算（以mg/件表示）当预期用途未知时，密封制品类食品接触材料及制品异噻唑啉酮特定迁移量以mg/件表示时，按式（3）进行计算，此时还需注明采用的迁移试验方法、迁移试验中单个密封制品与食品模拟物接触的面积。
式中：
X,=(c-c)x
X：——异噻唑啉酮特定迁移量，单位为毫克每件(mg/件)；c
试样溶液中异噻唑啉酮的含量，单位为毫克每升（mg/L)或毫克每干克（mg/kg）：V——试样浸泡液的体积或质量，单位为升(L)或千克(kg)；c。——空白试液中异噻唑啉酮的含量，单位为毫克每升（mg/L)或毫克每千克（mg/kg)；—一浸泡时所用密封制品的数量，单位为件。结果至少保留2位有效数字。
7精密度
在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。8其他
..（3)
当迁移试验中的S/V与样品在实际使用情形下的S/V相同时，本方法对食品模拟物、化学替代溶剂中单种异噻唑啉酮迁移量的检出限为0.10mg/kg，定量限为0.30mg/kg。当迁移试验中S/V与样品在实际使用倩形下的S/V不同时，本方法对食品模拟物、化学替代溶剂中单种异噻唑啉酮迁移量的检出限和定量限需按第6章中的计算公式进行换算。第二法液相色谱-串联质谱法
9原理
食品接触材料及制品根据GB31604.1及GB5009.156进行迁移试验后，采用液相色谱-串联质谱法进行检测。其中水、4%（体积分数）乙酸、10%（体积分数）乙醇、20%（体积分数）乙醇、50%（体积分数）乙醇食品模拟物及化学替代溶剂95%（体积分数）乙醇浸泡液过滤后直接进样；含油脂食品模拟物和化学替代溶剂异烧浸泡液通过甲醇-水溶液萃取后取下层过滤进样。选择反应监测模式进行检测，峰面积外标法定量。
GB31604.55—2023
试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为色谱纯，水为GB/T6682规定的一级水。10.1试剂
酸性、含乙醇、含油脂食品模拟物及化学替代溶剂：所用试剂需满足GB5009.156的要求。甲醇(CH,O)。
甲酸（CH,O,)。
四氢呋哺(C,HO)。
正已烷（C.Hu）。
试剂配制
酸性、含乙醇食品模拟物及化学替代溶剂：按GB5009.156的规定配制。同3.2.2。
0.1%甲酸水溶液：移取1mL甲酸于容量瓶中，加水定容至1L。10.3标准品
同3.3。
标准溶液配制
异噻唑啉酮标准储备溶液（1000mg/L溶剂为甲醇）：同3.4.1。异噻唑啉酮标准中间溶液A（100mg/L，溶剂为甲醇）：同3.4.2。异噻唑啉酮标准中间溶液B(10mg/L,溶剂为甲醇）：同3.4.3。异噻唑啉酮标准中间溶液C(100mg/L，溶剂为四氢呋哺）：同3.4.4。异噻唑嘛酮标准中间溶液D(10mg/L，溶剂为四氢味喃）：同3.4.5。标准工作溶液配制如下：
水、酸性、含乙醇食品模拟物的标准工作溶液：分别准确移取30μL、50μL、100μL、300μL、a)
500μL标准中间溶液B于5个10mL容量瓶中，用水定容，得到异噻唑啉酮质量浓度分别为0.030mg/L、0.050mg/L、0.10mg/L、0.30mg/L、0.50mg/L的标准工作溶液。采用同样方式，分别用4%（体积分数）乙酸、10%（体积分数）乙醇、20%（体积分数）乙醇、50%（体积分数）乙醇食品模拟物及化学替代溶剂95%（体积分数）乙醇配制同样浓度系列的异噻唑啉酮标准工作溶液，用针式尼龙过滤器过滤，待上机测定。b）
异辛烷标准工作溶液：分别准确移取30uL、50L、100L、300uL、500L标准中间溶液D于5个10mL容量瓶中，用异辛烷定容，得到异噻唑啉酮质量浓度分别为0.030mg/L、0.050mg/L、0.10mg/L、0.30mg/L、0.50mg/L的标准工作溶液。分别移取2mL该标准工作溶液于5支具塞玻璃离心管中，各加人2ml甲醇溶液（10.2.2），涡旋振荡1min，静置分层后，取下层的甲醇溶液，用针式尼龙过滤器过滤，待上机测定。c
含油脂食品模拟物标准工作溶液：分别准确称取5.00g（精确至0.01g）含油脂食品模拟物（橄榄油）至5个具塞玻璃离心管中，再分别加人15μL、25μL、50uL、150L、250uL标准中间溶液D，涡旋混匀，得到异噻唑啉酮质量浓度分别为0.030mg/kg、0.050mg/kg、0.10mg/kg、0.30mg/kg、0.50mg/kg的标准工作溶液。在每支玻璃离心管中加人3mL正已烷，再加人5mL甲醇溶液（10.2.2），涡旋振荡1min，静置分层后，取下层的甲醇溶液，用针式尼龙过滤器6
过滤，待上机测定。
仪器和设备
液相色谱串联质谱仪：配电喷雾离子源（ESI)。分析天平：感量分别为0.0001g和0.01g。微量移液器：10、100和1000μ。恒温干燥箱或恒温水浴装置。
涡旋振荡器。
针式尼龙过滤器：滤膜孔径0.22μm。分析步骤
试样溶液和空白试液的制备
同5.2。
仪器参考条件
液相色谱条件如下：
GB31604.55—2023
色谱柱：可耐受高水相的Cis柱，柱长100mmX柱内径3.0mm×固定相粒径3.5μm，或同等性能色谱柱；
流动相：A为0.1%甲酸水溶液，B为甲醇，洗脱梯度见表1；表1
洗脱梯度表
时间/min
流速：0.5mL/min；
柱温：30℃；
进样量：5μL。
质谱条件如下：
离子化模式：电喷雾电离正离子模式（ESI+）；质谱扫描方式：多反应监测（MRM)；其他质谱参考条件参见附录B。
标准工作曲线绘制
按照12.2所列仪器参考条件，将标准工作溶液按浓度从低到高的顺序分别注人液相色谱-串联质7
GB31604.55—2023
谱仪中，测定各待测目标物相应的峰面积，以异噻唑啉酮的浓度为横坐标、对应的定量离子峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线，得到线性回归方程。标准工作溶液的色谱图参见附录C中图C.1图～~图C.8。
12.4试样溶液的测定
定性测定
按照12.2所列仪器参考条件，分别测定试样溶液和标准工作溶液，如果试样溶液与标准溶液中相对应的色谱峰保留时间偏差在土2.5%范围以内，所有定性离子的信噪比均超过3：1，且定性离子对的相对丰度与浓度相当的标准溶液的相对丰度一致，相对丰度偏差不超过表2的规定，则可判断样品中存在相应的待测物。三种异噻唑啉酮标准工作溶液的MRM谱图参见附录C中图C.9～图C.11表2定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度，K/%
允许的相对偏差/%
定量测定
K≥50
2010K≤10
按照12.2所列仪器参考条件，分别将试样溶液和空白试液分别注入液相色谱-串联质谱仪中，得到各待测目标物的色谱峰峰面积，根据标准曲线计算得到试样溶液和空白试液中异噻唑啉酮的含量。13
分析结果的表述
同第6章。
14精密度
在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。15其他
当迁移试验中的S/V与样品在实际使用情形下的S/V相同时，本方法对食品模拟物、化学替代溶剂中单种异噻唑啉酮迁移量的检出限为0.01mg/kg，定量限为0.03mg/kg。当迁移试验中S/V与样品在实际使用情形下的S/V不同时，本方法对食品模拟物、化学替代溶剂中单种异噻唑啉酮迁移量的检出限和定量限需按第13章中的计算公式进行换算。8
附录A
三种异噻唑啉酮高效液相色谱图第一法中三种异噻唑啉酮的高效液相色谱图见图A.1～图A.2。GB31604.55—2023
19331883989
60515253354575.5665
T7.588.399.51010.51111.31212.51313.51414.51315.51616.51717.518标引序号说明：
—2-甲基-3(2H)-异噻唑啉酮；
2——5-氯-2-甲基-4-异噻唑-3-酮；3——1,2-苯并异噻唑啉-3(2H)-酮。图A.1
异噻唑啉酮（5mg/L）的高效液相色谱图（检测波长为275nm）605115225335445555665
标引序号说明：
1———2-甲基-3(2H)-异噻唑啉酮；2——5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮；3——1,2-苯并异噻唑咪-3(2H)-酮。图A.2
T7.58.59981010.51111.5121251313.5114.5131551616.51717.518异噻唑啉酮（5mg/L）的高效液相色谱图（检测波长为224nm）9
GB31604.55—2023
附录B
质谱参考条件
第二法中质谱参考条件如下（见表B.1)：a)
雾化气：45psi(1psi=6.89X103Pa)；喷雾电压：500V；
毛细管电压：4000V；
气流速度：7L/min；
气流温度：300℃；
辅助气流速：11L/min；
辅助气温度：380℃。
3种异噻唑啉酮的主要参考质谱参数化合物
1,2-苯并异噻唑啉-
3(2H)-酮
2-甲基-3(2H)-
异噻唑啉酮
5-氯-2-甲基-
4-异噻唑啉-3-酮
注1：*为定量离子。
母离子（m/=）
子离子(m/=）
驻留时间/ms
碎裂电压/V
注2：对于不同的质谱仪，仪器参数可能存在差异，测定前应将质谱参数优化至最佳。10
碰撞能量/eV
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