【农业行业标准(NY)】 澳洲坚果种质资源鉴定技术规范

1CS 65.020.20
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 1687—2009
澳洲坚果种质资源鉴定技术规范Technical code for evaluating germplasm of macadamia nut2009-03- 09 发布
2009-05-01实施
中华人民共和国农业部发布
本标准的附录A为规范性附录。
本标准出中华人民共和国农业部农垦局提出：本标准由农业部热带作物皮制品标准化技术委员会归。NY/T 1687—2009
木标准起草单位：国热带农业科学院南亚热亞作物研究所，国家重要热带作物工程技术研究中心、中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所。木标准主安起草人：邹明宏、陆超忠、藥李宏、杜丽清，曾辉、黄伟坚、罗炼疗、张汉周http://w
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1范围
澳洲坚果种质资源鉴定技术规范NY/T 1687—2009
本标准规定了澳洲坚巢（Macadamia integrifotiaMaiden&Betche和M.tetruphytla L.A.S.Johon)种质资源的植物学特征、生物学特性和巢实性状的整定方泌。本标准适用于澳洲坚果种质资源的鉴定。2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的孕用面成为术标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内穿）或修订版均不证用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标雄。GB/T5009.5食品中蛋白质的测定GB/T5512粮食、油料检验粗脂肪的测定方法GB/\F6195水果、蔬莱继生素C含量测定汰(2,6二氯靛份滴定泌)3鉴定方法
3.1植物学特征
3.1.1树姿
选取有代表性正常成年植株3株~-株，测量三个基部主枝中心轴线与主十火角，依据夹角的平均值确定树姿：分为：1.直立（30\）；2.半张（30°，60）：3.开张（250）3.1.2树形
采用3.1.1的样本，参照图1,观察植株的白然树冠形状：分为：1.圆形；2.半形；3.圆锥形；4.阔圆形；5.不规则形。
3.1.3生于光滑度
图1树形
3.圆雄形
4随圆形
采用3.1.1的样木，观察并触摸主十，确定主下光滑度。分为：1．光滑（无明扇裂隙、突起和叫陷，无粗糙感）；2.粗糙（有明显裂隙、突起和叫陷，有粗糙感）。3.1.4嫩枝颜色
在新梢生长期，在树冠外围中上部随机选取尚未本质化的正常嫩枝10个：观察确定嫩枝颤色。分为：1.绿色，2.粉红色；3.紫红色：4.其他。3.1.5叶序
在树冠外用中上部随机选取10个生长止常的枝条，观察叶片在枝条上的若生情况。分为：1．对生；2。叶轮牛；3．四叶轮生；4．叶轮生，1
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3.1.6叶片形状
在树冠外围中上部随机选取止长正常的成激叶60片，参照图2，确定叫片形状，分为：1．倒卵形；2、卵圆形：3.椭圆形：4.长椭圆形；5.倒披创形；6.其他。1.制卵形
3.1.7叶尖形状
3.精州形
1.长福圆形
图2叶片形状
5.倒设形
采用3.1.6的样本，参照图3，确定叫尖形状。分为：1.截形；2.钝尖；3.急尖4.锐尖。1.战彤
3.1.8叶基形状
图3叶尖形状
来用3.1.6 的样本,参照图4.确定叶基形状，分为;1.渐尖;2.急尖;3.截形;4.儿他，1.潮尖
3.1.9叶缘形状
图 4 叶基形状
采用3.1.6的样本参照图5，确定叶缘形状，分为：1.平滑：2.被浪状；3，极明显波浪状。[.平湖
3.1.10叶缘刺
2.波液忧
图5叶缘形状
3.极明显减浓状
来用3.1.6的样本，数叫片每一侧缘叶缘刺的数量，结果用平值表示，精确到0.1，根据叶缘刺数量多少,分为：1.无(0. 5);2.少(20.5,7.2);3. 较多(27.225)4.(25)。3.1.11嫩叶颜色
在树冠外围中上部随机选取生长正常的末成熟嫩叶60片，观察确定嫩叶颜色。分为：1、浅绿；2、2
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绿；3.粉红；4.紫红：5、其他。3.1.12成熟叶颜色
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采用3.1.6的样本，观察确定成熟叶额色。分为：1.浅绿，2.绿；3.墨绿；4.黄绿；5.红褐；6.共他。
3.1.13叶面状态
采用3.1.6的样木，参照图6，确定叶面状态。分为：1.平展（叶面平展.横断面呈直綫状）；2．下弯（叶而弯或反登，横断面呈孤形下弯或下卷）；3.内弯（叶面内弯，横断呈弧巡或V形上弯）；4.扭曲（叶面拥曲，横断面呈螺旋状扭曲）：1.平履
3.1.14小花颜色
图6叶面状态
在植株盛花期，从树冠外围随机选取生长正常的花序20个，观察确定小花额色。分为：1，凹2乳白色，3.粉红色；1.其他。
3.1.15小花开放顺序
采用3.士.1的样木，观察花序中小花的开放顺序。分为：1。花轨基部的花先开，然后问项端顺序推进，依次开效：2、花轴中部的花先，然后向两端推，依次开放：3.花轴顶端的花先开，然后向基部顺序推进，依次开放;4，无规则。3.2生物学特性
3.2.1树势
在新循停止牛长期，根据植株的生长势，叶幕层和新梢生长倩说确定树势。分为：1．；2.中：3.强。
3.2.2新梢萌发期
定期观察全树新梢发情况，记录=D%以上已发幼芽生长至约2cm的月期。表示方法为\年月H”，记录格式为YYYYMMDD”睿销，夏梢秋梢、冬梢各次梢分别记录，没有该次档的记为0。3.2.3新梢老熟期
定期察全树新梢生长情况.记录95为新梢的新叶稳定转为绿色的日期。表示方法为“年月口”，记录格式为“YYYYMMDD”。春稍、度悄、秋稍、冬梢各次梢分别记录，没有该次精的记为0。3.2.4新梢长度
在新朽停止生长后，随机选择20个新枝，测量其伸展长度。结果以半均值表示，精确到0.1cI13.2.5成熟枝条节间长度
在树冠外用的不同方位，选取5个成熟的春稍，分别测定其节间长度。结果以平均值表示，精确到o. 1 cm.
3.2.6叶片长度
采用3.1.5的样本：分别测量叶片以基部至叫尖的长度，结果以平均值表示，精确到0.1.cm。3
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3.2.7叶片宽度
采用3.1.6的样本，分别测量叶片最大宽度.结果以平均值表示，精确到0.1cm.3.2.8时柄长度
采用3.1.6的样本，分别测量叶片的叶辆长度。结果以平均值表示，精确到1mm。3.2.9花序长度
采用3.1.14的样木，分别测最化序主辅的长度。结果以均值表示，精确到0.1rm3.2.10初花期
在花序哨发初期，从树冠中部外围随机选取生长正常的花序0个，定期观察：记录约有5%花荣开放的H期，表示方法为\年月口”，记录格式为“YYYYMMIDD”。3.2.11盛花期
采用3.2.10的样本，定期观察：记录有25%~73%花朵并放的月期。表示方法为“年月日年月口”，记录格式为YYYYMMDD～YYYYMMLDL”3.2.12末花期
深用3.2.10的样本.定期观察，记录约有75%花朵开放的口期。表示斤法为“年月H\，记录格式为“YYYYMMDD\。
3.2.13有无多次并花
在正常生长和裁培管理条件下，观察植株有记多次开花现象：分为无（一年-次）.有（-年多次）。3.2.14坐果率
采用3.2.10的样不，在收获期记录每个花序最终坐荣数量，计算坐果数占花序小花数黑的白分密（%）、结果以平均值表示，精硫到0.1%.3.2.15成熟果自然脱落状况
采用3.2.10的样本，在版熟期观察成熟果白然脱落状况。分为：1.少量脱落；2.脱落。3.2.16果实成热期
观察柏株果实成熟情况记录全树有50次80%果实成熟的时问。表示方法为年月口年月H”,记录格式为“YYYYMMDD~YYYYMMD”3.2.17单株产量
收获期测定单株带壳果鲜重：精确到0.1kg3.3果实性状
3.3.1带皮果
3.3.1.1果实重量
在果实成熟期，随机选取生长正常的成熟新鲜带皮果60个，分别称量各个果实的重最，结果以平均值裘示，精确到0.1g
3.3.1.2果实大小
采用3.3.1.1的详本，分别测量果实的纵径和横径，结果以平均值表示，精确到0.1rm、3.3.1.3果皮颜色
采用3.3.1.1的样本，观察每个果实的外果皮颜色。分为：1.绿色；2.亮绿色。3.3.1.4果实腹缝线
采川3.3.1.1的样本，察果实外果皮的腹缝线是否明显。分为：1.明显；2.不明显。3.3.1.5果皮光滑度
采用3.3.1.1的样本，观察果实外果皮的光滑程度，定果皮光滑度。分为：1，光滑；2粗糙。3.3.1.6果皮厚度
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采用3.3.1.1的样本，别开果皮，测定果皮中部的厚度。结果以平均值表示，精确到0.1mm。3.3.1.7果柄长度
采用3.3.1.1的样本，测量每个果实的果柄长度。结果以平均值表示，精确到1mm3.3.1.8果颈
采用3.3.1.1的样本，参照图7，观察果颈有无及长短，确定果颈类型。分为：1.无，2.短；3.长。1.元
3. 3. 1. 9 果实形状
图7果颈
采用3.3.1.1的样本，参照图8，观察确定果实形状。分为：1.球形；2.卵圆形；3.椭圆形；1.其他。
1球雅
3.3.1.10果顶形状
2.卵圆形
图8果实形状
3.精圆游
采用3.3.1.1的样本，观察成熟皮果的果顶形状，参照图9，确定果顶形状。分为：1．乳头状突起不明显；2.乳头状突起明显；3.乳头状突起极明显。1.乳头状突起不显
3.3.2带壳果
3.3.2.1壳果重量
2.乳头状究起明显
图9果顶形状
3.乳头状究起极明显
采用3.3.1.1的样本，去皮。将带壳果依次在38℃、45℃60℃下分别下燥48h，当果仁含水量降至（1.5土0.5)%时，把干燥的带壳果冷却降温，分别称景各个帮壳果的重量。结果以平均值表示，精确到o.1g。
3.3.2.2壳果大小
采用3.3.2. 1的样本，分别测氧壳果的纵径和横径，结果以平均值装示,精确到0.1mmm。3.3.2.3果壳厚度
采用3.3.2.1的样本.果壳，测量果壳中部的厚度。精确到0.1mm。3.3.2.4果壳光滑度
采用3.3.1.1的样本，去皮。观察果壳的光滑程度。分为粗糙、光滑。5
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3.3.2.5壳果形状
采用3.3.2.4的样本，鑫照图10.确定壳果形忧，分为：1.扁圆形；2.圆球形：3.卵圆形：4.圆形：5.半球形；6.其他。
1.扁阿形
3.3.2.6果壳斑纹多少
2.圖球形
图10壳果形状
采用 3.3.2. 1的样本,观察带克果表面果实斑纹的多少，分为：1.很少;2.少;3.多，3.3.2.7果壳斑纹分布
5.半球彩
采用3.3.2.4的样本，观察带壳果表而果实斑纹的分布情况。分为：1.集中在萌发孔附近：2.集在前发孔近及某部；3．集中在中部；4.集中在基部；5.分散。3.3.2.8壳果脑缝线
采用3.3.2.1的样小，观察带壳果表而腹缝线的明显程度。分为：1.不明最（旱不完整浅槽状或条纹状）：2.明显（完整条纹状)；3，极明品（呈完整樽状或沟状）。3.3.2.9萌发孔大小
采用3.3.2.的样小，观察带壳果表而萌发孔的大小。分为：1.小;2.大：3.3.3果仁
3.3.3.1果仁重量
采川3.3.2.1的样，去克。分别称量单个果仁重量，结果以平均值表示，精确到0.1g。3.3.3.2果仁大小
采3.3.3.1的样水，分别测量果仁纵径与横径，结果以平均值表示，精确到0.11mm。3.3.3.3果仁颜色
采用3.3.3.「的样本，观察每个果任的额色。分为：1.色，2.乳白色；3.乳黄色；4.其他。3.3.3.4出仁率
采用3.3.3.1的样本，分别称取果仁和带壳果重。计算果仁重量占带完果重量的凸分率（%），结果以均值表示，精确到0.1%。
3.3.3.5—级果仁率
采用3.3.3.1的样本，将处理所得果仁倒人清水中静置，把悬浮在水中和水而上的果仁与汇在水底的果仁捡出分升放曾用98%的2醇脱水并分别称重，计算悬浮在水中和水面上的果仁重量占果仁总重量的百分率（%）。重量精确到0.1离：一级果仁率精确到0.1%，3.3.3.6果仁含油率
采用3.3.3.1的样本，将处理所得果仁按GB/15512方法测定果仁含油率3.3.3.7果仁蛋白质含量
利用3.3.3.1的样本，将处理所得果仁按GB/T5009.5方法测定果仁蛋自质含量。3.3.3.8果仁可溶性糖含量
采用3.3.3.1的样本，将处理所得果代按附录A方法测定果仁可溶性糖含量，A.1范围
附景Ａ
【规范性附录】
可溶性糖测定法
本附录适用于澳洲坚果果仁可溶性糖的测定。A.2测定原理
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在沸热条件下，用还原糖溶液满定一定量的费林试剂时将费林试剂中的一价铜还原为一价铜，以亚用基蓝为指示剂，稍硝过量的还踪糖立即使蓝色的氧化型亚甲基监还原为无色的还原型亚甲基蓝。A.3仪器设备
高速组织捣碎机：
电热恒温水浴：
c）」000w调温电炉；
d）玻璃仪器：200ml..250mL容量瓶：250ml.链形瓶5mL碱式滴定管4.4试剂配制
A.4.1费林试剂甲
称取硫酸铜（CuSO·5Hz)，分析纯)31.6g溶于水中，稀释至500mL，过滤，忙于棕色瓶内。4.4.2费林试剂乙
称取氢氧化钠50多和酒石酸钟钠（KVaCOHh：4II0.分折纯>138g溶于水，稀释至500mL，用石棉漏斗抽滤。
A.4.3转化糖标准溶液
称取9.5g蔗糖（分析纯)用水溶解后转人100mL容量瓶中，加人6nol/L的HCl(分析纯）10mL，加水至100mL。在20C~25℃下放置3d或在25℃保温24h.然后用水定容（此为酸化的1%转化糖液，可保存3-~1个月）。测定时,取1%转化糖液25.00mL放人2h0mL容量瓶中，加人甲基红指示剂滴，用1ol/L的NaOII溶液中和后用水定容，即为mg/转化糖标准溶液。A.4.4亚甲基蓝溶液
称取0.5亚甲基蓝（分析纯）溶丁100mL水中。A.4.5乙酸锌溶液
称取21.9g乙酸锌Zn(OAC)z·2Hz（,分折纯溶干水中，加冰乙酸31nL，稀释至100mL。A.4.6亚铁氰化钾溶液
称取10.8g业钦氰化钾「KFc((N)；·3HzO.分析纯」溶于水，稀释至垒100nL-。A.5样品提取液制备
取待测样品适量·洗，用不锈钢月将可食部分切成适当小块充分混勾后，按四分法取样。称取100鲜样加入等重量的水，放入组织捣碎机中搞成1：1勾浆，澳洲坚果果仁勾浆比例可适当谢整。称bt
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勾浆25.0g或50.0g（相当于样品12.5g或23.0g)放入150mL烧杯中，含有机酸较多的材料加0.5g~2.0z粉状CaCO调至中性(范试纸检试）。用水将样液全部转人230mL容量瓶中，并调整体积约为200tmL，背（80士2)℃水浴保温30min，其间摇动数次，取出加入艺酸锌济液及亚铁氰化钾溶液各2ml~5ml，冷却至室温后：用水定容，过滤备用，A.6还原糖测定
A.6.1费林试剂的标定
取费林试剂币、乙各5.00mL或在测定前先等体积混个后取10.00mL混合液于250ml.锥形瓶中，放人玻璃珠1粒~5粒，先加人比预测（按A.6.2进行预测）仅少0.5m的1mg/m.转化糖标确液。将此混合液置1000W电炉上加热，使其在2tnin左右逃腾，滩确煮沸2mi1，批时不离开电炉，立即加入0.5%亚甲基蓝指小剂6滴，并继续以每1$~-58一滴的滴速滴加标准糖液，直至一价铜离了完全被还原生成砖红色氧化亚铜沉淀，游液蓝色褪尽为终点。用准硫滴定标准糖液的数V.乘以标准糖液浓度（mg/mL），即得10rmL费林试剂所相当的佛的意克数。注：无色的还原型业甲基盐极易被空气中的氧所氧化，应调节电炉温度使瓶内济始终保持排膨状舒，被面题盖水蒸气不与空气接触。整个滴定过程锥形瓶不能离开电炉随意摇动，A.6.2预测
取费林试剂甲、乙各5.00ml.成10.001mL混合液十250rml.链形瓶中：由滴定管加入待测糖液约15ml.代电炉上加热至沸，约沸15s后迟速滴加得测糖液，至呈现极轻微的蓝色为止，此时加人0.%亚币其监指示剂6滴，继续滴加待测糖液，直至游被蓝色尽为止，记下待测糖液的用量V（毫升数）。A.6.3准确测定
取费林试剂中乙各5.00ml.或10.00ml1.混液加人销形瓶中，出滴定管加比预测仅少0.5ml的待测液，并补V一V.毫升水（标定费林试剂所消耗的标准糖波毫升数Vi减去预测消耗的待测糖液刀数V，即为应补水的堂升数），使其与标定费称试剂时的反成体积一致以下按费杯试剂标定同样操作，继续滴至终点。前后沸热时间颈在3min左右：待测糖被消耗量应控制在15m~50mL范图内，不能大于标定资你试剂所用标准糖液体积V。否则应增减称样量重新制备待测液，A.7可溶性总糖测定
取比经制备的待测液100mL于200mL容量瓶中，加6m0i/L的IICl10mL：在（80二2)℃水浴加热10tmi,放人冷水槽中冷却后，加甲感红指尔剂2滴用6mal/I的及1tual/L的NaOH溶中和.用水定容。以下步骤同 A.6.2,A. 6. 3.A8结果计算
4.8. 1 计算式
a）还原糖X,投式(A.1)计管
VXWX1000
式中：
X1——还原糖(%，以转化糖汀);G
10tnl.费林试剂相当的转化糖，单位为毫克（mg）；准确滴定时所用待测液的体积,单位为毫（ml)；样品熏，单位为克(g)；
定容体积，单位为毫升mL)；
由瞻克（mg）换算为克（g）。
可游性总耕X按式(A.2)计算：
还原糖(%，以转化糖计)；
稀释倍数：
其余符号同武（A1)。
c）非还原x按式(A.3)算：bzxz.net
式中：
非还原糖（%，以蔗糖计）；
由转化糖换算成燕糖的因数。
A.8.2结果表示
(X -X) X 0. 95
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测定结果精确到小数点后二位，两次平行试验结果相对相差，含量在5%以下的不得超过3%；含量在5%-10%的不得超过2%，含最在10%以上的不得超过1%，鲜样以鲜基表示，风十样以风千表示.
注：还原及可济性总粘也可用葡梯表示，费林试剂需刃用荒泄标定，非还原糖用转化糖换算成蔗销形式表示。http:
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