【水产行业标准(SC)】 鱼类消化率测定方法

ICS65.150
中华人民共和国水产行业标准
SC/T1089-2006
鱼类消化率测定方法
Determination of digestibility in fish2006-07-10发布
2006-10-01实施
中华人民共和国农业部
本标准的附录A和附录B为规范性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会归口。本标准起草单位：中国科学院水生生物研究所。本标准主要起草人：朱晓鸣、解绶启、雷武，杨云霞、聂光汉。品伙伴网http://wwwfoodmate.
SC/T1089—2006
1范围
鱼类消化率测定方法
SC/T1089—2006
本标准规定了鱼类对饲料原料、配合饲料的表观消化率测定的原理、标记物的选用与试验饲料的配制、实验鱼的饲养与分析样品的采集、样品分析和结果的计算。本标推适用于鱼类表观消化率的测定2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6432饲料中粗蛋白测定方法GB/T6433饲料粗脂肪测定方法
GB/T18246饲料中氨基酸的测定
GB/T18115.1稀土氧化物化学分析方法电感鹅合等离子体发射光谱法测定氧化铜中氧化氧化错、氧化敏、氧化、氧化销、氧化、氧化敏、氧化销、氧化钦、氧化镇、氧化锈、氧化慧、氧化销和氧化量
3术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。3.1
消化率digestibility
动物所摄人的食物在体内被消化吸收的程度，以动物从食物中所消化吸收的部分占总摄人量的百分比表示。
表观消化率
apparent digestibility
动物对饲料或某一成分的总摄人量与粪便或某一成分的总排出量之差占饲料或某一成分的总摄人量的百分比。
标记物
marker
为饲料中已经存在（内源）或人工均匀加人（外源）的某种指示物质。4原理
通过测定饲料及粪便中标记物的含量变化，计算得到饲料或某营养成分的消化率。5标记物的选用与试验饲料的配制5.1标记物
5.1.1标记物的技术要求
标记物应符合如下条件：
SC/T10892006
一一不可消化吸收，不妨碍饲料的适口性，不影响鱼体消化代谢，也不改变消化道中微生物群落的组成；
一一可以与饲料中的各种成分均匀混合，即使在微量使用时，也能较容易而灵敏地完成定量分析：一可与间料中营养物质同步通过消化道；一对人和环境卫生，无毒、无污染。5.1.2标记物的选用
5.1.2.1酸不溶灰分的使用
酸不溶灰分为内源性标记物，适用于摄食天然饵料及实验鱼的群体和个体足够大，能够收集到大量的粪便样品（干重大于10g）的实验。5.1.2.2三氧化二铬（Crz0g）的使用三氧化二铬（CrO）为外源性标记物，适用于能够收集到较大量的粪便样品（干重大于1g）的实验，添加量为0.5%-1%。
5.1.2.3氧化钇（Y,0,）及其他稀土元素氧化物的使用氧化亿（Y2O）为外源性标记物，适用于难以收集到较大量的粪便样品（千重小于1g）的实验，添加量为0.1%。
5.2实验饲料的配制
5.2.1饲料消化率测定实验的实验饲料配制根据实验设计的需要及实验鱼的营养需求，添加0.5%～1%的Cr20或0.1%的Y20作为标记物采用逐级扩散法均匀地混合在各种饲料粉料混合物或饲料原料的粉料中，按鱼类配合饲料的有关标准配制成营养均衡的含有标记物的颗粒饲料。5.2.2原料消化率测定实验的实验饲料配制根据实验鱼的营养需求，添加0.5%～1%的CrzO作为标记物，采用逐级扩散法，均匀混合于饲料粉料中，配成营养均衡的基础饲料，另取70%未添加标记物的基础饲料和30%的待测原料，添加同样剂量的标记物，采用逐级扩散法，充分混合均匀，按照相同工艺制成颗粒饲料。6实验鱼的饲养与分析样品的采集6.1以消化率测定为惟一目的之实验6.1.1实验鱼的饲养
在所用实验鱼的适宜温度（20℃～28℃）下，选足量的规格整齐、健康的实验鱼，随机分养于若干个水族箱中，保持适宜的光照、溶解氧（大于6mg/L）、氨氮浓度（小于0.5mg/L）及养殖密度等条件。先以基础饲料暂养，视实验鱼种类的不同，每天饱食投喂1次一3次，至少预养1周后，改用实验饲料投喂，每种铜料至少3个平行组，每组实验鱼的数量至少达到25尾。每天定时饱食投喂，投喂1h～2h后，移去剩余饲料。
6.1.2粪便样品的收集—后肠挤压法在用实验饲料投喂7d后开始收集粪便样品。视实验鱼种类的不同，在摄食4h~8h后，采用后肠挤压法收集粪便样品，挤压时用纱布擦干体表水分，握住鱼背部，用手指沿腹侧向着肛门方向轻轻挤压腹部，将粪便先挤人解剖盘，再用镊子挑出，以避免黏液等混人类便。将收集的粪便样品在70℃烘干后冷藏待测。
重复上述操作，直至收集的粪便样品量足够分析测试所需。6.2兼有其他实验自的之实验
6.2.1实验鱼的饲养
根据实验设计的要求饲养实验鱼，每个处理至少3个平行缸，按照实验设计进行饲料投喂，投喂2
1h~2h后回收剩余饲料。
6.2.2粪便样品的收集—虹吸法
SC/T1089—2006
视实验角种类的不同在摄食4h一8h后，采用虹吸法收集举便，收集时吸取新鲜，成型，饱满的类便条。收集的粪便样品在70它烘干后冷藏待测。实验全程收集粪便。
6.3实验饲料的采样
在实验开始前对全部实验饲料按四分法进行取样，取样量以足够分析测试所需为准。所取饲料样品在70℃烘干后冷藏待测。
7样品分析
7.1饲料及粪便中标记物的测定
7.1.1酸不溶灰分的测定
测定方法见附录A，每个样品至少2个平行。7.1.2三氧化二铬（Cr.0）的测定采用酸消化法测定见附录B，每个样品至少2个平行。7.1.3氧化（Y,0）的测定
按照GB/T18115.1执行。
7.2粪便及饲料中营养成分的测定7.2.1粗蛋白含量的测定
按照GB/T6432执行。
7.2.2粗脂肪含量的测定
按照GB/T6433执行。
7.2.3总能量含量的测定
7.2.3.1实测法
采用氧弹式能量计测定，每个样品至少2个平行，取其算术平均值，允许误差在2%以内。7.2.3.2计算法
如果没有条件进行能值的实际测定，可以从蛋白质及脂肪含量计算，换算系数蛋白质为23.62J/mg，脂肪为39.50J/mg。
7.2.4饲料及粪便中氨基酸含量的测定按照GB/T18246执行。
8结果计算
鱼类对饲料的总表观消化率按式(1)计算。ADC=100X(1-Md/Mf)
式中：
总消化率，单位为百分率（%）：饲料中标记物百分含量（%）；
粪便中标记物百分含量（%）。
鱼类对饲料中营养成分（蛋白、脂肪、氨基酸和能量)的表观消化率按式(2)计算。ADCd=100X(1-Nf/NdXMd/Mf)
式中：
营养成分消化率，单位为百分率（%）；ADCd
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SC/T1089—2006
饲料中标记物的百分含量（%）；类便中标记物的百分含量（%）：饲料中营养成分的百分含量（%），或能量含量（J/mg）：粪便中营养成分的百分含量（%），或能量含量（J/mg）。鱼类对实验原料的表观消化率按式(3)计算。ADCi=[ADCt×(0.7×Nr+0.3XNi)-0.7×NrXADCr|/(0.3XNi)*式中：
实验原料消化率，单位为百分率（%）；实验饲料消化率，单位为百分率（%）：基础饲料消化率，单位为百分率（%）：基础饲料中营养成分的百分含量（%），或能量含量（I/mg）；实验原料中营养成分的百分含量（%），或能量含量（J/mg）。全品伙伴网httn：//www：foodmate：ne++（3)
A.1试剂
盐酸(HCI)：分析纯免费标准bzxz.net
HCl:4mol/L
A.2仪器与设备
天平：精确度0.0001g
三角瓶：500mL
定量滤纸
马福炉
A.3操作步骤
附录A
（规范性附录）
酸不溶灰分（AIA）的测定
SC/T1089—2006
称取10g一12g干燥、磨碎的样品于500mL三角瓶中，加人100mL4mol/LHCl（样品重：HCI为1:10），在通风柜内电炉上徐徐煮沸30min，三角瓶口安装回流冷却管，以防HCI损失。用定量滤纸过滤热溶液，再用热蒸馏水（85C～100℃）洗涤至滤液无酸性反应。然后，将滤纸及留在滤纸上不溶于酸的物质一起移人已知重量的中，于马福炉内（600℃）灼烧约6h。灰化后，移入干燥器内冷却至室温，再称重至恒重。A.4结果计算
按式（A.1)计算样品中酸不溶灰分含量AA=100x(Wf-We)/Ws
式中：
ALA——酸不溶灰分含量（%）：Wf
增重+灰分重，单位为克（g)：
We—空重，单位为克（g)；
样品干重，单位为克（g）。
A.5允许误差
每个样品至少测定两个平行样，取其算术平均值，允许误差在2%以内。(A.1)
SC/T1089—2006
B.1试剂
钼酸钠：分析纯
三氧化二铬：分析纯
浓硫酸：分析纯，比重1.84
高氯酸：分析纯，70%~72%
B.2仪器与设备
凯氏烧瓶：100mL
容量瓶：100mL
天平：精确度0.0001g
分光光度计
B.3操作步骤
附录B
（规范性附录）
三氧化二铬（Cr.O）的测定
氧化剂的配制：溶解10g钼酸钠于150mL蒸馅水中，慢慢加人150mL浓硫酸（比重1.84）。冷却后，加200mL高氯酸（70%~72%），混匀。标准曲线：准确称取绿色粉状的纯CO0.0500g于100mL干燥的凯氏烧瓶中，加氧化剂5mL，将凯氏烧瓶在电炉上用小火消化，直到瓶中溶液呈橙色透明为止。移此液入100mL容量瓶中，稀释至刻度（母液）。吸取不等量的母液，配制不同浓度的比色溶液，在440nm～480nm光波下测定溶液的光密度，根据溶液浓度及光密度读数，得出标准曲线方程，备测定何料或粪便中CrO含量时应用。饲料及类便中三氧化二铬Cr2O的测定：称取0.05g干燥、磨碎的样品于100mL干燥的凯氏烧瓶中，加氧化剂5mL，将凯氏烧瓶在电炉上用小火消化，直到瓶中溶液呈橙色透明为止。移此液人100mL容量瓶中，稀释至刻度，在440nm480nm光波下测定溶液的光密度。B.4结果计算
根据样品重量及光密度读数，按照标准曲线方程，算出饲料或粪便样品中CrO，的含量。B.5充许误差
每个样品至少测定两个平行样，取其算术平均值，允许误差在2%以内。6
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