【国家标准(GB)】 高效液相色谱法通则

1CS71.049.40:71.040.50
YYKAONrKAca
quE-ei-aC-eC-ae-Ciaac-CEC-Nca-nikAoNiKpa中华人民共和国国家标准
GB/T 16631—2008
代替GBT1663115
高效液相色谱法通则
Gencral rules for high performance liquid chromatography2008-06-18发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
数码防伪
2009-02-01实施
CB/T 16631—20D8
规范性引用文件
术诺和定义
高效液相色谱法述
水、试剂溶剂
取样及颠处现的操作
仪器配置
洗脱剂
色浩炖和村填料
仪器安装的环境要求和安全
测量利试料的制备
分析步骤
定分析
定员分析
分十量分在的测量
制备型液相包语法
数据质量的保证
专项标准中涉及药项目
附录A（资料性陆录）标催章条编号与KC12420草条端号对照品伴网
TYTKAONT KAca
quE-i-aC-eC-ae-Ciaac-CEC-Nca-riKAoNrKApae
TTKAON KAca-
qUE-ei-aC-eC-ae-Cenaac-CEC-Nca-niKAoNrKAaGB/T16631—7008
本标准修改采用H术丁业标准JISK0121一20a然高效液相色谱道则英文版）本标准根据JISK0121:-2002新起草，在附录A中列出广本标准竞条缔号与JISK01242932 章条编号的对照一施表。
考患到我国国情,本标准与J1S K 01242002 的主案差异如下;引用了我国同家标准GB/T0008--2007（本标准第2章）；谢除了GB/005--2007中已有的术语和定义（本标雅第3章）；刘试剂和率剂规格分别进行「规定(本标准的, 2 和 5, 3)。本标准代替GB/T1563168社液相色谱分析法通测。准标准与G3F61一1995村比主要变化如下：：删除了199年版准药资料性附录附录A、附求上、附录（、附录I)、附录E、谢附录F、附录K附录M.附录N.附录P;bzxz.net
增加了第3章\术语和定义”第5章\水，试剂和溶剂”第6章“瑕样及须处理的操作”、第16章“制备型液相色谱”、第17章“数据质量的保证\和第18章“专项标中涉及的项H”；修改了标准名称（见1996年版和本版标准的封而）；修改了标准范国（见1996年版和本版标准的等1竞)；修改了高效液相色谱法概还（1996年版第3章;本版第4章）；修改了有关仪器配置的规定（1996年版第1章：本版第7章）：修改了有关洗脱剂的规定（19年版第5章本版第8 章)；修改了在关色谱社柱填料的现家1596年版第6就、第9单；本版第章）修改『仪器安装的环境要求和安全要求（1995年版录（、附录H：本版第10章)：修收厂有关测量/制备前的难衔1.作的规定（1996年版第7章：本版第11登）；修改有关操作过程的规定（.分的年版第旨章、第10 竞、附录」;本版第12 章）修政了存关定性分析的规定（195年版第1.章；本版筹13章）：修改了有关定量分析的熟定（门906年版第12章，附录1:本版第11章）；-修晚了有关分了品分布的测载的现（1996年版第13宽；本版第1竞）本标弹的闭录A为资料性附录
本标滩由！中国和油和化学业协会出。标准全国化学标准化技术委员会(SAC/TC 63)归[本标雅国国油汕化工股份有限公司北京觀山分公司、中化化工棒雅化究所负贡起幸。本标滩主要起草人：黄铃、徐泽峰，杨建海，魏韵，本标准于1995 年 12 川首次发布。1

1范围
高效液相色谱法通则
YKAONKAca
quE-i-aC-eC-ae-Craac-CEC-Nca-iiKAoNrKApaCB/T 16631-2008
本标规起了使片高效液相色谱法进行的定性定量分析和提统精制的通用规则。本标准适」使用高效浓相谱法对无机，有机化含物的宽性最分析及提纯精制.以及对高处子化合物的分子量的测定的-般要求。2规范性引用文件
下列文件的条款适过本标雅的引用而成为本标链的条款，乱是注[随的引用文件，其随后所有的修改单（小包括勘误的内穿)惑接订版均不造用标谁，然而，感慰程帮本标谁达成协设的备研笔是否可债用这些文件的最新版本，凡是不注的引用文件，其最新版本适而本标准GB/T 9908液相色谱法术语杜色谱法和平色谱法3术语和定义
/9C8饰立的以及下列术语和定义谨用于标，3. 1
高效液相色谱仪highperformanceliguidehromatagraph进行高效液相他谱分析的仪器，3.2
分析物nalyte
样岛或样副溶液中存在的待分析的H标给分3.3
样品溶液
sample soluliun
样品榕解在其甲的裤液戒提瑕用」分析的案波，3.4
试样溶液test sample snlutinn用了测战的样品液本身或预处理过的样品溶液3.5
系pump
驱动流动相（洗脱剂)的设备。
automatic sample injector, auto sampler自动进样器
动将试样波接连地注射进到液相色谱议的柱子中的设备，3. 1
柱箱columm umpartiment
色谱拉置于其中的器。
色谱柱管 chromatographic lube杜填料被填充在其中的圆形性管，其两跳装配有过滤器等部件。1
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CB/T1663I—2008
symmetry factor
对称固子
表街色潜峰的对称程度的因子。由：下列方程得渐：S - W.--?21
对调子：
从峰基线测役的12峰高处的峰觉：YKAONKAca
qUE-ei-aC-eC-ae-Ceiaac-EC-Nca-iiKAoNiKAca从峰质点尚记录纸的水平辅划乖直线，与W,峰宽线相交，峰的前侧的距离定义为
Wo254和厂单位相向：
杜前衍生化prerolumn derivatization; preralunn labeling样品组分作进到色谱社之前，与衍生试剂反应避行衔型化的过程。3. 11
柱后衔生化pustcalumn derivatization，postcalnmn labeling样品组分在色潜柱分离之店，帅衔生试剂到选薇中进行衍生化的过型3.12
标准溶液referente olulinn
其特犯使如浓度或分于量是已知的并定足以用作液相色谱分析的标样的溶液3.13
分离模式scparatiun morle
主要所波相色分离抗兜进行分类的探作模式。3.14
稀释标准溶液diluted reference solation被税释成淀浓度的标滨熔液。
混合标准溶液mixed reference xblutinn通过混合一动以」标准溶液或稀释标准游激制备的含规定浓度拦品组分的溶液，3.16
内标物internal standard
内标法为用作标样的物质。
分子量分布 molccular weight distrihution与分子量行多存性的化物有关，表了各种分子作为分子量函数的量，3.18
分级fraclionation
通造色谱样分离和洗脱最得分析物的操作，3.19
流分fraction
顽过分然操作分离得到的济液，2
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方法确认methodvalidation
证明使用高效液相负谱的分析方法适合分析月的的各种测议，4高效液相色谱法概述
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quE-ei-aC-ec-a-Ceiaac-cEC-Nca-irikAoNrKApaGB/T 166312008
4.1波相负消法(I起一种其有下述特征的物理和化学分离分析方法。它使用液体作为流动，每种分析物在色谱杜的固定相和流动科例的相互作存在荒别，这种差别被利用来分离混合物。流动相微加正送以取得间内的高效分离的液伤行柯法被称为高效液相伤语法（HC用十高效极色谱法的设备被称为离效液相任谱仪。4.21可应用于测定非挥发性或者热不稳定诈化合物，这些化合物难于用气相色谱法测定。因为LC的扩敏速度比气相色谱法慢，所以其分离能力比气相也谱法差。虽然的分离能力没有气相色谱法离，也是它其有的定是能小的容影得到分离的化舍物的流分的特点，1不仪可应用于-般有机化舍物·而且坨可旋用丁离子化合物，大然产剃、案含物以及其他厂泛领域，4.3迁过综合分析高效液相色谱法所使用的同定相利流动相，可以认识其各种分离机理。表1列出了高效没相的谱法的分类及其分离机理的特点、典型杜填料及其用途表 1IPLC:分类和分离机理特点,典型柱填料及其用途分高机理
分配负谐:包度丸分配
色谱,括分配也谱以及反
加离子对色错）
吸包谱
尺寸排阻任谱（分于筛分
危谱,凝腔可滤也谱、凝晓
谬透色谐)
离了交换色（包括离」
扎片色诺私离十也请）
亲合色谱
。分岛是是」质定相和
流动指间分配衡。
英型枝填料
化学键金型胶（ODs，
，各种杜填料和各种济
NH等）孔聚物等
动利的结合原用法
，分出是其于降质在无
机组化物引定机上的吸险
* 非被性有抗裕剂患作
分离后基十聚合物填
群孔的分子简分。
烘衔系性温印
水聚介物境转利合
成的案合物赋料有不间！
硅段、氧化锯、二筑化、
葡果糖凝段,京脂研
胶，聚苯之烯凝校、案甲基
内烯酸酐凝依等
。分离是基平密了交换
剂和高了泽胜妞的静电稳！
离子交焕肉指
·应用
·分满止基卡行生自生
物组织的分于认别能力。
送样性极尚
、肽、糖等组合
范制以低分于其到
商分子量物质的分离。
。间系物的分离
极性化合物私异构
体的分离
蛋汀、酶等的分离
纯化发脱盐(衰水聚合物
琥料）
合成聚合物的分子
虽分级(合或要合物填
离子剂物质的分离
分析，脱益，盐交换
牛现活性物质的浓
缩、分离和精制
4.4IIP[:的其本配置如图1所示，HPI.C白下列部件组成：流动相提供单元（液体菜）、进样器、色谱柱和社、检测器、数据处理机利记录仪。流动相的流迷山尔设定，定体积的流动相被传送到进样器，再到色谱拉。泵输送流动相的流速范围常在 0. C1 ml,/min~-10 ml./min。常用往复式柱塞象(见图2)。污使用梯度洗脱法附,用1~-4个单元菜或者一个梯度器。3
htt
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输波泵
检测据
整圾处理机
图 1HPLC 的基本配置(示意围)
新力传修器
阻尼暴
单向阔
进群疑,色谱柱
YKAONKAca
qUE-i-aC-C-ae-Ceiaac-CEC-Nca-inikAoNiKApa废玻菇罐
整形轮
默产马遇
传感婴
图 2往复式柱塞泵的基本配量(示惠图)4.5追带用微鼠注射器氧取定体积的样品溶液，注人进样闽，扳动阅钮将样品辫液证人色诺注。有时使用白动进样器按序列自动逆多个样品。4. 61I'LC 使的托填料具有相对均匀的题粒尺寸,粒径一般在1 μt1~20 μm 之叫,填料被装填在内径「im-1?n的不锈钢或塑料的色谱作管，柱长一般「库米或者更短，填料的粒径和柱了的尺于根据其用途而有所不同。
4.7分析动被供谱柱分离·然底基于片动理,光学、电，化学及H他特性被检测器检测：HPLC的典型检谢翠是紫外可见光检测器，趣这控谢器的流滴范体积在42之，视量破分离后的分析物在一定波提下的骏光避(吸收强度）。基他检测器包括示差折光指数检划器、荧光检测器，电化学检测器、电导检测器、质仪等。HPLC使用的典型检测器的特点列于表2，当需窦选择性检测或/L级以下的高灵辙度检测时-依懒于分析钧持征使用不同的检测器表 2HPLC 使用的典型检测器及其特点格测器
吸北度检渐器(IVVS检谢器
荧光检测器(FLD)
示差沂光检键器(K[)
中化学热鸿器（)
中导检测器())
质谱（S）
最小琦测
灵敏度
选择性
有（吸光物航）
有荧光物）
有(氧化然原物质）
说度的影响
流速的影吗
操度洗,脱
本可用
4.8如果分析物不能直战检测或者商灵敏检测不可能实现，则可使用柱前衍生化或注后符生化。前者4
http：/
YTKAONKAca-
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是分析物作进到色谱柱之前进行的衔牛化，而后者是分析物被色谱柱分离之后衔牛试剂同洗脱液进行混合进行的衍生化，
4.9检测器得到每个分析物的响应并转化成电格号-然后送到数抵处理机，记录检测器得到的信号对时间作图得到如图3所小的色谱图。数据处卵机基于得到的色谱阁进行各种参数运算，对分析物进行定性定量分析，当使用保留值对分析物逊行定性时用其保留值（保留时剂等)同构同条作下的标准样品的保留值进行比较：当使用溃谱或二极管阵列检测器对分析物进行定性时.用分析物的语图同标样的谱图进行比较。当进行定量分析时，从色谱图得到峰积值或峰高值，将其代人出含分机物的标准溶秘制得的标准止绒进行宠最测定4.10另·方面，也有可能通过收集与色语图上色谱峰相对应的流出微对分离的分析物进行等分收集，进行提纯，即制备型激相色谱法，组分：误画体时回：
组分六假审体积时间，
红分上
品组分
这呼案
保保询
色谱图和每个参数的名称
5水,试剂和溶剂
本标准使用的水鹿是迫过蒸馅或离广变换等方法精制的水，或署通过反渗透、蒸瘤、离了交换等方法结合精制的水：水质不应十抗分析。5.2试剂
试剂应是分析纯试剂或质量史好的试剂。试剂不应干扰分析。5.3溶剂
游剂成是HPLC级的产品或旋量根当或更好的产品。它们不应十扰所使用的测器的性能。6取样及预处理的操作
高效液相色谐分析要求按样品的分析日的选择合适的取样方法，根据样品形式和分析日的，样品可占接进高效液相知谱仪，或者对分析物进行苯取、衍牛、浓缩等预处理。6.1取样
取样应板据分析H的,样品性质及测试项H使用最伴方法进行,考法具有样品代表性及能区分个样品特征的关异，如果专项标准，则按该标雅进行墩样携作，为了防止由子老化之类的外部因素引起的变化，预处理和进样的过程应尽可能快地迅行，好果样品需要贮行，要预先磅认样品不会因为存和转移运输发生变化，如果在初步试验和实际测定时样品量利分析物浓度存在较大差别，则设定的条件将无效，如果怀疑样品发牛了变化，则要采瑕相应对策”。用瑕样和群品贮存的容器利器其不应舍门例如，上物样品分新物可能皱新微生物分解，或者被代谢产物和增殖特架，征这杆的情洗下，应采取话如游力;防嘧剂、低温义存、调作\值、过滤、块处理、燥等对策。瘤剂能影的分核和色游降,应子,起注意。5
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qlE-ei-ac-eC-ae-Ceraac-CEc-Nca-TiKAoNrKAa有任何吸附样品或溶解］样品的物质，些存容器成贴上必要的暂示标签：如果为了保证数据的可靠性需要进行重复测定，则相间样品必须问时在两处或两处以上的取样点抽取，6.2预处理
样品在进高效液相色谱仪之前，应针对分析且的、样品性延利测试质日使用最合适的方法进行领处理。预处理一殿与善特性、精密接、录数度等、消除测民的干扰物质，保扩也谱柱利仪器免手损坏，简化测能操作过程，以度使分新剃保稳定。预处理包括下列过：称重，蛋白质脱除、萃政液液萃取，相萃政溶剂蒸馅、超滤分离、超临界流体举取等）净化（液液萃取,間相萃收等）脱水、脱盐、浓缩、定穿、衍牛、标雅物加人、溶剂调整(衍生化、落解在适于进样的落剂中)等等。如果有专顽标准，贮按该标难进行预处理。如果加人内标物,在色谱图上内标物应与样品基证很好地分离，其保留时血过与月标组分的保留时间差别不人，如渠使防预谱，与内标物的分离不定是必需的。样品应溶解在少最其淋洗能力等于或小于流动相的溶剂中。溶剂可能影响稳定性和月标红分的分离，内此底谨慎选择，必要时使用0.2m-0.5m的过滤膜对程品进行过滤以除去不溶物。预处理有刊能引起来自试剂、器、环境等的污染.引起尔质的说人以圾分析物的损失，应引起注意。
7仪器記置
7.1流动相供应单元
输送蒲动相（选聪剂到负获的供虚单几，要正下列带作组坡：7.1.1洗脱剂储液器
洗脱剂储液器应便用不影流动用洗脱剂）化学组波的死杆制成，洗脱剂储液然应防止在使用过程中环境因素对流动和的污染，如蒸发心质等。7.1.2脱气器
脱气器被用来连绒脱淤游解在活动（洗脱剂中的套气·以免山一仪内温度压力安化引态的气泡间题，从的保证稳定的流遗利信导背影。7.1.3供液泵
以精确流速将流动和(凯照剂)送剂色谱柱的速必实满足下列蔓求：\）流速范围究：
b）流速精度高：
流景脉动低
d）在较宽的压力范围内只有稳定的殴能小）与液体接触的材料其有优足的化学情性：J）易于更换流动相。
7.1.4梯度洗脱单元
梯度洗脱单元用控制器和混合器组成，控制器以连续改变混合流动相（洗脱剂）的纽成耐混合器将获得均勾的混合溶液。混合比的没定括困要宽，浓度费精碗，7.2进样器
逃样器的材料和构造应确保所逊的样品没有吸阴保留，进鲜互复性好，如桌用白动进样器启动进行许多试样的进群，那么它应其有以下基术功能：章复性.定氧进样确确性，保留小极小的样节凰等等如果有政期的用途需要，则应加冷却均能，以便增加判备好的样品数量和降低样品统分的分能和蒸发。
其有样品预处理功能或件前衍牛化功能的自动进样器也可能用组。7.3分离单元
7.3.1色谱柱
根据分析的·使用本标准第9旁叙述的色谱柱。从进样器到色谐住人口的流路和以色谐住出L15

致检测器的流路应使用死体积尽可能小的管路，以免样品谱带拟鼓。可使历保护耗来防止分析杜性能损坏，7.3.2色谱柱箱
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使用色谱杜箱可提高分离分析的稳定性从而确保分析精度：色谱箱应具有温度控制功能，控制福度可优化色谱柱州能、增逆分离选举性以及防止社温受坏境温度变化的影响，7.4检测器
洗脱剂从色增生进人检测器的微流池，检测器按照不同原理以流动和作为背景检测分析物的浓度收体积，常用价测器的特点究表2，7.4. 1吸光度检测器
吸光疫检测器检测样品组分在紫外可见光区的吸光度，按分析物的及收特性确定吸妆波长。常用的吸光度检测器美型是分光光束通过流动池中的样品组分，到二极管阵列检测器，产生光谱，测晟各波长下的圾光度变化，通过债用各波长下的色谐图和每个组分的保曾时间可以获待定性分析结果和峰组分纯度的确认：
7.4.2示差折光指数检测器
样品组分的流小引起流动相折光指数改变，这种改变被检测器以折光指数之差进行检测。7.4.3荧光检测器
茂光检测器检测样品中某个组分受到微发光激发在特定波长下的荧光强度。为「设定最佳波长和定性确认峰组分，不些荧光检测器具有进行激发、激发产生的光波长扫描以及炎光光谱采集等功能7.4.4电化学检测器
电化学检测器检测详品组分在加有特定电正的【作电圾进行氧化泾原皮应产生的电流。7.4.5电导检测器
北导检测器检测流动树溶液和样品组分之间电导的差别。7.4.6质谱捡测器
质谱检测器将从色谱出流出的样品组分逊行离子化，然后按照质荷比检测这些离了。7.4.7其他类型检测器
其他炎型检测器包括下列检测露：a）红外光详检测器(IR)；
b）旋光度检测器(OR):圆一色检测器(CD)：c
火焰离子化检测器（FIL)：
数射检谢器（RI>；
介电检测器；
化学发光检测器（包括生物发光）(CI.I))；g)
原了吸收分光光度检测器（AA）：也感耦台等离了体发射光谱检测器热检测器：
光散射检测器；
黏度检测器：
离子电极检测器：
超被检逊器；
核磁共振仪检测器：
7.5数据处理机
数据处理机显示色谱图和计算得到的定基结果。计算可遵过制备饺准出绒线·用浓度对保留时间，峰GB/T 16631--2008
离,峰面积等作图。有些数据处理机是有光谱分析功能，7.6附件
根分析日的，如果必要，应提供下列附件让算极（用丁站，用于数据处理和仪器控制);b）路切换阀（柱切换、循环、反冲等）：c）流分收集器;
）样后反应器，
8洗脱剂
8. 洗脱剂的选择
应按分离模式或检测模式选泽沉脱剂，以满足要求。8.1.1要求
洗脱剂应满足下列要求：
能合地分离分析物：
b）不会化学的或物理的被坏柱填料；）能溶解样品而设有破坏；
）新合检测器；
脱除固体物质\”：
按分离模式选择（见表3）
表 3按分离模式选择洗脱剂
分离模式
股附色谱
正相色谱
友据色沸
分配包谱
反相离了
对危谱
洗脱剂
已烷段晓二氢杆烷、7醛、！
内辞单醇，以其地其不
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quE-ei-aC-eC-ae-Ciaac-CEC-Nca-rikAoNrKApa挑服起圾性越在，流恶能方越、芬声齿择性随选脱剂的极性改变。腺吡之外,还随氧键,可受性同返料的有机济剂可混合使「和得极作用产改学1烷、皮娩、氧印烷之醚
选脱剂极性越高,既膦能力越强。分可既译性出「分析物在选起剂和弱定相中的将等性决定。 除此吴丙醇，非醇，以及其彼共有不同级能的有机剂，可混合偿川
甲醇，7胎、了HF和其独有
机辫剂同水或缓冲被混合
能问要分析的离子形成离下
对的缓冲溶没被制备，加人疏水试剂作为刘奥子，这样的缓冲
溶液同甲醇,乙肺,1HF 和其低
有机溶刻混合使用
之外、还随氢链、可受性和假极作消市改变洗脱剂圾机起假，洗说能力越，分离选择性山分所物在流脱列和固定和中的落解性决定。除此外，还随望键，可受作和倡吸作用而改变。如果分析物并离子型化合物,法脱剂的 pH 恒等严重影响促留/分离。在离子型它台物电离的H值下，保自很弱,而在非中离的I 估下,保留变逼有机萨剂的混合比恼大·洗脱能小越强。作为离于对也治的洗脱剂,调整离子对试剂浓度和 pH 值很重要
2]为脱除固体物质,铣脱剂通常应殖过孔径2. 5 μm或归小的膜进行过滤。如果使川数径为3 μm或受小的非填料.使川的过滤慎的孔径应是粒径龄,3
如某高效获相的谱仪其有脱气装置,则不必预先脱气。http:
分离模式
离干交换色谱
良于排阻色谱
亲和仁谐
非水尺寺
排色谱
尺寸排
酸尺叶
排随危谱
THF叫然味嘴：
n TCB三套浆；
\J>M二甲基甲酰胺。
表3（）
洗脱剂
缓冲俗液被依用,其缓冲能力
使得分析物的电衔差别在
的 pH伯下最大。道常防始洗
脱剂的浓度脂 20 m:ul/I. ~
50nrnel/L
左般酸或其征弱羽龄的情况
促用水或 1 nanr,l/.-- 1: tnmal/1.的酸的水游被（ll值为2~~3)。
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初始洗联剂分析物在该pH后下电离的缓冲陷设·分打钩被保南、然、氢化钠和其冶敲以梯度或毁性增邮添加浓度的方我加人到睾冲液！另外,缓冲弊被的rH值将改变,以便使分析物朝电离与自钱化。反之，选脱剂也可能是在该H蕉下分析物,不电高的缓冲济液,并H分行物可遵过只是移动娠分离，如果树胎孕商广交换剂被使用,际了离下交段外还可能在在流水作,氨键、尺寸排除等。因此,加人者机率问可调整分殿地，汇果尔析物被电离：就脱就快，如果不电离法脱就慢，须常，筑脱剂的H伴成诺控以使分在务或花化合物情配下，！要！新物尚的电离速度的差最大川水
使用的缓准落液的H值和点
广强度适于分析物利配体相而
作用，签白质等的亲礼色谱节
传门氧酸缓心游被、磷酸劵
沪没、醋殿缓沪济波等
便目对分析物和填抖都很
亲利月不易变吸附分配等这些
不成于非组也谱分密模试影响
的溶剂，在比，聚来七期献胶被用作填科则管用TI因为
其其有柜的游梁作旧多数，
如典分析物是极性的，可能使而1M初其他被性裕剂
法脱中加人破以便互出处
填料和分析题间的能电作用并
增加剂子强爱，在蛋而质和儿
他样品的情说下,2H 佰影瞻稳
性别空间均室,r[能使用H他
合适的缓率液
3按检测器选择（见表4）
在其中分态物有可能同配体体合的洗照剂应间色谱柱保持丫衡，样品进到仁谱格然后离强度和H循将改变，这是-儿特定泌脱，另外,游离的计垃配体战其板似物质解液应被使川，这店种特造法照
如买尺寸别但消需要在13℃芒成更高鼠度逆行则可能使用TCE3\，\落剂在室温下是国体时分析后等栏上保的溶剂用共化游题置换，剂比烫,流速不能超过色谱廷的下作片力。不必要的溶问皆类将缩短色谱扑的使用对命如某分析物问托填科行在验水作用的可能件,在也谱相可接受的范出内，可在徙脱剂加人甲静或其性被性有机溶剂
表 4 按检测器选择洗脱剂
检训器
暖光检测器
洗脱剂的选择
通常送择的选脱科在检测被长“丹诱光的或只有赏不足道的收，使用没有紫外吸收的高判溶剂、水和剂制备决脱剂。一般情识下，穿剂在短波被K有强的吸收，些缓冲游没在紫外区有懂吸收，应给于江态。在梯是泌脱的估说下，进脱剂组成的变化可引适吸妆强度的变化引起基线被动，在境测波长下，使川的新有落剂必须是足够透光的http:
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