【地方标准】 鳗鲡肌肉中阿苯达唑、阿苯达唑亚砜和阿苯达唑砜残留量的测定 高效液相色谱法

DB35 福建省地方标准 DB35/T884-2009 鳗鱼肌肉中阿苯达唑、阿苯达唑亚砜和阿苯达唑砜残留量的测定 高效液相色谱法 2009-03-11发布 2009-04-01实施 福建省质量技术监督局 发布 前言 本标准由福建省海洋与渔业局提出并归口，经福建省质量技术监督局批准。本标准起草单位：福建省淡水水产研究所、福建农林大学、福建省海洋资源与环境检测中心。本标准主要起草人：樊海平、余培建、廖碧钗、林丽聪、俞道进、杨琳。 1 范围 本标准规定了鳗鱼肌肉中阿苯达唑、阿苯达唑亚砜和阿苯达唑砜残留量的高效液相色谱测定方法。本标准适用于鳗鱼肌肉中上述三种残留物的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡注日期的引用文件，其随后修改单或修订版均不适用于本标准；凡不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 试样在碱性条件下用二氯甲烷提取，经乙腈水饱和正己烷脱脂净化后，采用反相色谱柱分离，以二极管阵列检测器或可变波长紫外检测器检测，外标法定量。 4 试剂和材料 4.1 乙腈：色谱纯。 4.2 甲醇：色谱纯。 4.3 二氯甲烷。 4.4 正己烷。 4.5 乙腈水饱和正己烷：取乙腈35 mL，加水至100 mL后加入适量正己烷，充分摇匀静置。 4.6 冰醋酸。 4.7 1%冰醋酸溶液：取冰醋酸1 mL，加水定容至100 mL。 4.8 无水碳酸钠。 4.9 2 mol/L碳酸钠溶液：称取无水碳酸钠21.2 g，加水溶解并定容至100 mL。 4.10 阿苯达唑及其代谢物标准品：纯度≥98.5%。 4.11 标准储备溶液：分别称取标准品10.0 mg，用冰醋酸100 μL溶解后以甲醇配制成100 mg/L储备液，2℃~8℃保存，有效期不超过3个月。 4.12 标准工作溶液：将标准储备液稀释至10 mg/L，现配现用。 5 仪器和设备 5.1 高效液相色谱仪（HPLC），配DAD或紫外检测器。 5.2 组织匀浆机。 5.3 涡旋混合器。 5.4 氮气吹干仪。 5.5 超声波清洗仪。 5.6 离心机（5000 r/min）。 5.7 天平（0.01 g及0.0001 g）。 5.8 0.45 μm微孔滤膜。 5.9 聚丙烯离心管（1.5 mL、15 mL、50 mL）。 6 色谱条件 6.1 色谱柱：SB-C18柱（5 μm，150 mm×4.6 mm）或等效柱。 6.2 流动相：乙腈-1%冰醋酸溶液梯度洗脱。 6.3 检测波长：294 nm。 6.4 柱温：25℃。 6.5 进样量：50 μL。 7 测定步骤 7.1 试样制备 7.1.1 制样：取鳗鱼肌肉样品，去皮后取背部肌肉，经组织匀浆机捣碎，-18℃冷冻保存备用。 7.1.2 提取：称取均质试样2.00 g于离心管中，加入2 mL 2 mol/L碳酸钠溶液及12 mL二氯甲烷，涡旋混合15 min，5000 r/min离心10 min，取二氯甲烷层备用。 7.1.3 净化：将提取液在40℃水浴中氮气吹干，用45%乙腈水溶液溶解残渣，超声处理后加入乙腈水饱和正己烷进行净化，涡旋混合、离心后弃去正己烷层，下层液经0.45 μm滤膜过滤后备用。