【地方标准】 马铃薯中龙葵素（α-茄碱及α-卡茄碱）的测定 高效液相色谱法

ICS 67.050 B23 DB64 宁夏回族自治区地方标准 DB64/T 1718—2020 马铃薯中龙葵素（α-茄碱及α-卡茄碱）的测定 高效液相色谱法 Determination of Solanine (α-Solanine and α-Chaconine) in potato High performance liquid chromatography 2020-05-18 发布 宁夏回族自治区市场监督管理厅 发布 2020-08-18 实施 前言 本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。 本标准由宁夏农林科学院提出。 本标准由宁夏回族自治区农业农村厅归口并实施。 本标准起草单位：宁夏农产品质量标准与检测技术研究所。 本标准主要起草人：赵丹丹、张锋锋、王晓丹、姜瑞、牛艳、路洁、石欣、井建荣、夏文莉、吴燕、陈翔、杨静、张艳、苟春林。 1 范围 本标准规定了采用高效液相色谱法测定鲜食马铃薯样品中龙葵素（α-茄碱及α-卡茄碱）的测定方法，包括原理、试剂和材料、仪器与设备、分析步骤、结果计算及精密度等内容。 本标准适用于马铃薯中龙葵素（α-茄碱及α-卡茄碱）的测定。 本方法检出限为2.0 mg/100g。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡注日期的引用文件，仅注日期版本适用；凡不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用。 GB 5009.3—2016 食品中水分的测定 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 马铃薯样品中的龙葵素（α-茄碱及α-卡茄碱）用亚硫酸氢钠与乙酸混合水溶液提取，经 C18 固相萃取柱净化后，采用高效液相色谱紫外检测器进行测定，外标法定量。 4 试剂和材料 除另有规定外，均使用分析纯试剂，水为 GB/T 6682 规定的一级水。 4.1 试剂 乙腈（C₂H₃N），色谱纯；乙酸（CH₃COOH）；亚硫酸氢钠（NaHSO₃）；磷酸氢二钾（K₂HPO₄）；磷酸二氢钾（KH₂PO₄）。 4.2 试剂配制 4.2.1 提取液：称取0.5g亚硫酸氢钠（精确至0.01g）溶于100mL水中，再加入5.00mL乙酸，混匀。 4.2.2 磷酸氢二钾溶液（0.1 mol/L）：称取8.7g磷酸氢二钾溶于水并定容至500mL。 4.2.3 磷酸二氢钾溶液（0.1 mol/L）：称取6.8g磷酸二氢钾溶于水并定容至500mL。 4.2.4 磷酸缓冲液：取100mL磷酸氢二钾溶液，用磷酸二氢钾溶液调节pH至7.6，过滤（0.45μm水相滤膜）。 4.2.5 液相色谱流动相：600mL乙腈加入100mL磷酸缓冲液及300mL水，混匀后过滤（0.45μm滤膜）。 4.2.6 15%乙腈溶液（15:85，V/V）：15mL乙腈与85mL水混合均匀。 4.3 标准品 α-茄碱（α-Solanine），纯度≥98%；α-卡茄碱（α-Chaconine），纯度≥98%。 4.4 标准溶液配制 4.4.1 标准储备液：分别称取5mg标准品，用磷酸二氢钾溶液溶解并定容至5mL，浓度为1000mg/L，于-18℃保存，有效期6个月。 4.4.2 标准工作液：将储备液混合后逐级稀释，配制5.0～40.0mg/L系列标准溶液，在4℃保存，有效期1个月。 5 仪器与设备 高效液相色谱仪（配紫外检测器）、食物料理机、超纯水机、离心机、分析天平（0.01g及0.1mg）、超声波清洗机（50kHz、120W）、pH计、C18固相萃取柱（500mg，6mL）。 6 分析步骤 6.1 试样制备 将马铃薯样品切碎并充分混匀，用食物料理机粉碎至均匀匀浆。