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- DB34/T 2515-2015猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法
标准号:
DB34/T 2515-2015
标准名称:
猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法
标准类别:
安徽省地方标准(DB34)
标准状态:
现行-
发布日期:
2015-11-10 -
实施日期:
2015-12-10 出版语种:
简体中文下载格式:
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标准简介:
本标准规定了猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)RT-PCR 检测方法及其技术要求。 本标准适用于猪肠内容物、粪便以及细胞培养物中 PEDV 核酸的检测。本标准规定了猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrheavirus, PEDV)RT-PCR检测方法及其技术要求,适用于猪肠内容物、粪便以及细胞培养物中PEDV核酸的检测。
部分标准内容:
DB34/T 2515-2015
猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法
RT-PCR assay for porcine epidemic diarrhea virus
发布日期:2015-11-10
实施日期:2015-12-10
发布单位:安徽省质量技术监督局
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则编写。本标准由安徽省农业标准化委员会归口。本标准由安徽省农业科学院畜牧兽医研究所提出。本标准起草单位:安徽省农业科学院畜牧兽医研究所。
本标准起草人:潘孝成、张丹俊、赵瑞宏、沈学怀、周学利、胡晓苗、戴银、侯宏艳、李贺侠、张宁、何国荣、周德权、王庆。
1 范围
本标准规定了猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrheavirus, PEDV)RT-PCR检测方法及其技术要求。
本标准适用于猪肠内容物、粪便以及细胞培养物中PEDV核酸的检测。
2 缩略语
下列缩略语适用于本文件。
PEDV:猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrheavirus)
PCR:聚合酶链式反应(polymerase chain reaction)
RT-PCR:反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction)
RNA:核糖核酸(ribonucleic acid)
DEPC:焦炭酸二乙酯(diethyl pyrocarbonate)
Taq酶:Taq DNA聚合酶(Taq DNA polymerase)
dNTP:脱氧核糖核苷三磷酸(deoxyribonucleoside triphosphate)
M-MLV:莫洛尼氏鼠白血病病毒(moloney murine leukemia virus)
PBS:磷酸缓冲液(phosphate buffer solution)
TAE:Tris-乙酸电泳缓冲液(Tris-Acetate-EDTA buffer)
EB:溴化乙锭(ethidium bromide)
3 原理
PEDV是一种RNA病毒。
根据PEDV保守基因序列设计特异性引物,通过反转录反应产生cDNA,cDNA作为PCR模板,在DNA聚合酶的作用下,通过变性、退火、延伸等循环过程实现目标片段的扩增。
4 仪器
4.1 PCR仪(扩增仪)
4.2 台式低温高速离心机
4.3 电泳仪
4.4 凝胶成像系统
4.5 冰箱
4.6 微波炉
4.7 分析天平
猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法
RT-PCR assay for porcine epidemic diarrhea virus
发布日期:2015-11-10
实施日期:2015-12-10
发布单位:安徽省质量技术监督局
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则编写。本标准由安徽省农业标准化委员会归口。本标准由安徽省农业科学院畜牧兽医研究所提出。本标准起草单位:安徽省农业科学院畜牧兽医研究所。
本标准起草人:潘孝成、张丹俊、赵瑞宏、沈学怀、周学利、胡晓苗、戴银、侯宏艳、李贺侠、张宁、何国荣、周德权、王庆。
1 范围
本标准规定了猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrheavirus, PEDV)RT-PCR检测方法及其技术要求。
本标准适用于猪肠内容物、粪便以及细胞培养物中PEDV核酸的检测。
2 缩略语
下列缩略语适用于本文件。
PEDV:猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrheavirus)
PCR:聚合酶链式反应(polymerase chain reaction)
RT-PCR:反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction)
RNA:核糖核酸(ribonucleic acid)
DEPC:焦炭酸二乙酯(diethyl pyrocarbonate)
Taq酶:Taq DNA聚合酶(Taq DNA polymerase)
dNTP:脱氧核糖核苷三磷酸(deoxyribonucleoside triphosphate)
M-MLV:莫洛尼氏鼠白血病病毒(moloney murine leukemia virus)
PBS:磷酸缓冲液(phosphate buffer solution)
TAE:Tris-乙酸电泳缓冲液(Tris-Acetate-EDTA buffer)
EB:溴化乙锭(ethidium bromide)
3 原理
PEDV是一种RNA病毒。
根据PEDV保守基因序列设计特异性引物,通过反转录反应产生cDNA,cDNA作为PCR模板,在DNA聚合酶的作用下,通过变性、退火、延伸等循环过程实现目标片段的扩增。
4 仪器
4.1 PCR仪(扩增仪)
4.2 台式低温高速离心机
4.3 电泳仪
4.4 凝胶成像系统
4.5 冰箱
4.6 微波炉
4.7 分析天平
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