【卫生行业标准(WS)】 尿中马尿酸的分光光度测定方法

中华人民共和国卫生行业标准
WS/T52-1996
尿中马尿酸的分光光度测定方法Urine-Determination of hippuric acid-Spectrophotometricmethod
1996-10-14发布
中华人民共和国卫生部
1997-05-01实施Www.bzxZ.net
中华人民共和国卫生行业标准
尿中马尿酸的分光光度测定方法UrineDetermination of hippuric acid-Spectrophotometric method
1主题内容与适用范围
WS/T52-1996
本标准规定了尿中马尿酸的分光光度测定方法。本法最低检测浓度为0.006g/L。本标准适用于正常人和接触甲苯工人尿中马尿酸的测定。2原理
尿中马尿酸在喹啉存在下与苯磺酰氯反应生成黄色化合物，在乙醇溶液中于470nm下比色定量。3仪器
3.1分光光度计，10mm比色杯。
3.2旋涡混合器。
3.3具塞比色管，10mL。
3.4容量瓶，100mL，50mL。
3.5聚乙烯塑料瓶或玻璃瓶，100mL。3.6尿比重计。
4试剂
本标准所用试剂除另有说明外，均为分析纯试剂。4.1实验用水，蒸馏水或同等纯度的去离子水。4.2马尿酸，优级纯。
4.3苯磺酰氮。
4.4喹啉。
4.5无水乙醇。
4.6三氮甲烷
4.7马尿酸标准溶液。
4.7.1贮备液：称取0.1000g马尿酸，用水溶解，定量转入100mL容量瓶内，加水至刻度。此溶液1mL=1.0mg马尿酸。置4℃冰箱保存备用。4.7.2应用液：取20.0mL贮备液（4.7.1）于50mL容量瓶中，用水稀释至刻度。此溶液1mL=0.4mg马尿酸。在4℃冰箱内可保存一周。4.8质控样加标的模拟尿、接触者混合尿或加标的正常人混合尿。中华人民共和国卫生部1996-10-14批准1997-05-01实施
5采样、运输和保存
WS/T52-1996
用塑料瓶或玻璃瓶收集接触两天后的班末尿约100mL，尽快测定比重后按100十1的体积比加入三氮甲烷，充分振摇混合，密闭瓶口，运至实验室，于4℃冰箱内可保存两周。6分析步骤
6.1样品处理
取尿样5.0mL，用水稀释1~5倍，视马尿酸的浓度而定。6.2标准曲线的绘制
取8支比色管按下表配制标准管。6.2.1
马尿酸标准管的配制
马尿酸标准应用液，mL
水，mL
马尿酸含盘，mg
6.2.2向各管加人0.6mL喹啉，混勾后再加入0.2mL苯磺酰氣，立刻盖紧管塞，在旋涡混合器上混合20s（或用手强烈振拐25～30次），在30士2℃条件下避光放置30min。6.2.3向各管加入3.7mL乙醇，混匀，继续避光放置30min。6.2.4用10mm比色杯在波长470nm下，以试剂空白（0号管）为参比，测量吸光度。6.2.5以吸光度为纵坐标，马尿酸含量为横坐标，绘制标准曲线。6.3样品测定
6.3.1取0.5mL稀释尿液（6.1)两份，分别加入两支比色管内，其中一支比色管按标准曲线的绘制（6.2.2～6.2.3）步骤操作，另支比色管只加4.5mL乙醇，作尿样底色测定。若加乙醇后溶液发生混浊，转入离心管，以4000r/min的转速离心10min。6.3.2用10mm比色杯在波长470nm下，以试剂空白管为参比，测定尿样吸光度，以乙醇为参比测定尿样底色吸光度，在测定前后以及每测定10个样品后，测定一次质控样。6.3.3以样品管吸光度值减去尿样底色的吸光度值，由标准曲线上查得马尿酸的含量。7计算
7.1按式（1)计算尿样换算成标准比重(1.020）下的浓度校正系数（）。1.020-1.000
卖测比重=1.000
7.2按式（2)计算尿中马尿酸的浓度。X=
式中，X尿中马尿酸的浓度，g/L;m·v
一样品吸光度减去尿底色吸光度后由标准曲线上查得的马尿酸含量，mg；m
V.取尿样体积，mL，
V.尿样稀释后的总体积，mL。
（2）
8说明
WS/T52-1996
8.1本法的检测限为0.006g/L，线性范围为0.04~1.6g/L（尿样稀释1~4倍），精密度：CV=2.7%~5.9%（马尿酸含量为0.062，0.180，0.283g/L，n=6），准确度，尿样加标回收率为91%~97%（加标浓度为0.04，0.12,0.20g/L，n=6）。8.2分析步骤中的试剂加入顺序不能颠倒，当苯磺酰氮加完后应立刻进行振摇，各支管的振摇强度和时间应控制一致。
8.3显色开始后各项操作应尽量在避光条件下进行。8.4根据尿样感官颜色确定是否需要配尿样底色管，如颜色正常又经多倍稀释，可免去此步骤。8.5测得浓度超过本法线性范围时，应将尿样适当稀释后重新测定。8.6质控样如使用加标的模拟尿时可考察准确度和精密度。用接触者尿和加标正常尿时可考察精密度。但人尿不易久存。模拟尿只含人尿中的大量成分。附加说明：
本标准由卫生部卫生监督司提出。本标准由潮北省卫生防疫站负责起草。本标准主要起草人：汪家兴、姚永祥。本标准由卫生部委托技术归口单位中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所负责解释。中华人民共和国卫生
行业标准
尿中马尿酸的分光光度测定方法WS/T52-1996
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中国标准出版社案皇岛印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经售版权专有不得翻印
开本880×12301/16
印张1/2
字数6千字
1997年4月第一版
1997年4月第一次印刷
印数1-1500
书号：155066·2-11334
标目307--50
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