【地方标准】 萱草种苗组培快繁技术规程

DB14/T1637—2018 萱草种苗组培快繁技术规程 2018-01-10 发布 2018-03-10 实施 山西省质量技术监督局发布 前言 本标准按照 GB/T1.1-2009 的规则起草，由山西省农业科学院提出并归口，起草单位为山西省农业科学院园艺研究所、山西梅芝园艺有限公司。主要起草人包括曹冬梅、付宝春、秦国杰、梁、贾民隆、段九菊、李永平、郑梅梅、张超、宋卓琴、康红梅。 1 范围 本标准规定萱草种苗组培快繁的术语和定义、组织培养、炼苗和移栽、移栽后管理、病虫害防治、出苗质量、包装和运输。本标准适用于萱草组培苗生产。 2 规范性引用文件 - GB/T8321 农药合理使用准则（所有部分） - NY/T2306 花卉种苗组培快繁技术规程 - DB14/T1381 萱草栽培技术规程 3 术语和定义 3.1 萱草：具有观赏价值的萱草属植物的统称。 3.2 外植体：从自然生长的活体植物上获取，用于建立植物组培快繁体系的原始材料。 3.3 组培苗：利用植物组织、器官等外植体，通过植物组织培养技术获得的种苗。 3.4 玻璃化：植物组培过程中出现的生理病变，表现为组培苗生长异常，幼叶或愈伤组织呈半透明、水浸状，植株矮小失绿，叶片皱缩卷曲。 3.5 组培穴盘苗：组培生根苗移栽在穴盘中培育的苗子。 4 组织培养 4.1 培养基配制：以 MS 为基本培养基，成分见附录A。愈伤组织诱导培养基：MS + 6-BA 4 mg/L + KT 0.5 mg/L + NAA 0.4 mg/L + 蔗糖 20 g/L + 琼脂 6 g/L，pH 5.8。不定芽分化和继代培养基：MS + 6-BA 1 mg/L + KT 0.5 mg/L + NAA 0.05 mg/L + 蔗糖 20 g/L + 琼脂 6 g/L，pH 5.8。生根培养基：1/2 MS + NAA 0.5 mg/L + 蔗糖 20 g/L + 琼脂 6 g/L，pH 5.8。 4.2 外植体的采集 4.2.1 采集时间：连续晴天 2 天以上，上午 8 时～11 时。 4.2.2 采集部位：在无病害的萱草种植基地，选取生长健壮、无病害的萱草植株，花梗抽出、花苞未开放时，采集花梗基部向下 4～5 cm 部位作为外植体。 4.2.3 采集材料处理：采集后即用，超过 1 小时需用湿润毛巾或滤纸包裹，置于 0℃～4℃ 冰壶或冷藏室保存，保存时间不超过 24 小时。 4.3 外植体灭菌消毒 4.3.1 预处理：自来水冲洗外植体表面，将材料放入烧杯中，用 0.7 g/L 洗洁精溶液浸泡 5～10 分钟，自来水流动冲洗 30 分钟，蒸馏水清洗 3～4 次，吸干表面水分置于超净台。 4.3.2 灭菌消毒：在超净工作台上，用 75% 酒精表面消毒 30 秒，再在 0.1% 氯化汞溶液中灭菌 12 分钟，无菌水冲洗干净，吸干表面水分，用消毒刀片切去外部变褐部分。 4.4 接种和愈伤组织诱导：将花梗切成 1 cm 的切段接种于愈伤组织诱导培养基中，培养温度 25℃，暗培养 30 天生成愈伤组织。 4.5 不定芽分化和继代培养：将愈伤组织接种于分化培养基进行不定芽诱导，丛生芽在分化培养基上继代增殖两次，培养条件：温度 23℃～25℃，光照强度 3000 Lx，光照时间 16h/d，继代次数不超过 6 次。 4.6 生根培养：将继代丛生芽接种于生根培养基中，培养条件：温度 25℃，光照强度 3000 Lx，光照时间 16h/d。 5 炼苗和移栽 5.1 组培苗标准：组培苗粗壮挺直，叶片 3～5 片，色泽正常，具有原品种特性，无玻璃化；根系 1～3 条根，根长 2～3 cm 或 5～6 条短根，根长 1～2 cm，色白健壮；同一批次苗高度整齐，约 4 cm。