【地方标准】 水和沉积物中孔雀石绿及其代谢物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

DB12/T866-2019 《天津市地方标准 水和沉积物中孔雀石绿及其代谢物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》 前言 本标准依据GB/T1.1-2009规则起草，由天津市渔业发展服务中心提出并归口，农业农村部渔业环境及水产品质量监督检验测试中心（天津）负责起草。主要起草人：陈永平、李春青、时文博、高丽娜、李宝华。 1 范围 本标准规定了水质及沉积物中孔雀石绿和无色孔雀石绿残留量测定的试剂、仪器设备、测定步骤、计算方法、方法灵敏度、方法回收率、方法精密度等内容。本标准适用于水和沉积物中孔雀石绿和无色孔雀石绿的残留量检测。 2 规范性引用文件 下列文件对本文件的应用必不可少。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 - GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 沉积物中孔雀石绿（Malachite Green, MG）及其代谢物无色孔雀石绿（Leucomalachite Green, LMG）的残留提取利用N,N,N',N'-四甲基对苯二胺（TMPD）解吸附后，采用二氯甲烷萃取。水中孔雀石绿和无色孔雀石绿经二氯甲烷提取后，通过质谱检测器检测，使用内标法定量。 4 试剂 4.1 孔雀石绿及无色孔雀石绿标准品：孔雀石绿纯度>98%，无色孔雀石绿纯度>98%。 4.2 乙醇：色谱纯。 4.3 甲醇：色谱纯。 4.4 二氯甲烷。 4.5 实验用水：符合GB/T6682一级水标准。 4.6 乙酸铵缓冲溶液：称取0.077 g无水乙酸铵溶解于适量水中，加入0.5 mL甲酸后，再加水定容至500 mL。 4.7 TMPD溶液（1.0 mg/mL）：称取50 mgTMPD溶于50 mL甲醇中。 4.8 孔雀石绿（MG）、无色孔雀石绿（LMG）标准储备液（100 μg/mL）：分别准确称取适量的孔雀石绿、无色孔雀石绿标准品，用乙醇溶解并定容，-18℃避光保存，使用期为1年。 4.9 氘代孔雀石绿（MG-D5）和氘代无色孔雀石绿（LMG-D6）内标标准储备液（100 μg/mL）：分别准确称取适量的氘代孔雀石绿和氘代无色孔雀石绿标准品，用乙醇溶解并定容，-18℃避光保存，使用期为1年。 4.10 混合外标标准中间液（1.0 μg/mL）：准确吸取1.0 mL孔雀石绿和无色孔雀石绿的标准储备液（4.7），用乙醇稀释定容，-18℃避光保存，使用期为6个月。 4.11 混合内标标准中间液（1.0 μg/mL）：准确吸取1.0 mL氘代孔雀石绿和氘代无色孔雀石绿标准储备液（4.8），用乙醇稀释定容，-18℃避光保存，使用期为6个月。 4.12 混合外标标准使用液（0.10 μg/mL）：准确吸取1.00 mL混合外标标准中间液（4.9），用乙醇稀释定容，-18℃避光保存，使用期为1个月。 4.13 混合内标标准使用液（0.10 μg/mL）：准确吸取1.00 mL混合内标标准中间液（4.10），用乙醇稀释定容，-18℃避光保存，使用期为1个月。 4.14 混合标准工作液：临用时，准确吸取相应体积的混合外标标准使用液（4.11），再加入混合内标标准使用液（4.12）20 μL，用乙醇和2.0 mmol/L乙酸铵缓冲溶液（1:1，V/V）稀释定容至1 mL，标准曲线系列浓度分别为0.5、1.0、2.0、5.0、10、20 ng/mL，现用现配。注：除特殊注明外，所有试剂均为分析纯。 5 仪器和设备 5.1 液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾（ESI）离子源。 5.2 电子天平：感量1.0 mg和0.01 mg。 5.3 高速冷冻离心机：可制冷至4℃（最大转速高于10000 r/min）。 5.4 超声波震荡仪。 5.5 涡旋振荡器。 5.6 移液器：10 μL，20 μL，50 μL，100 μL，1000 μL。 5.7 旋转蒸发仪。 5.8 纯水器。 5.9 冰箱：具有4℃冷藏箱和达到-18℃以下冷冻箱。 6 测定步骤 6.1 样品制备 (后续内容可继续整理)