【卫生标准】 血清中氟化物的测定　离子选择电极法

前 言

血清氟水平是评价人群氟负荷的重要指标，它在表明机体受氟危害及氟中毒中具有较重要的意义。因此，在地方性氟中毒的防治研究及防龋的研究中经常进行该指标的检测。

本标准规定的血清中无机氟测定方法，是在参考了国内外多年来报道的各种血清氟测定方法的基础上并结合我国的国情制定的适于一般实验室可操作的方法。本标准规定的操作步骤及技术指标均经过实验室和现场验证。

本标准由卫生部疾病控制司提出。

本标准起草单位：中国地方病防治研究中心地氟病研究所。

本标准主要起草人：万桂敏、于光前、徐春蓓、王守智、张志瑜、张丽虹、叶平、边建朝、赵新华、宋丽、石玉霞、刘忠杰。

本标准由卫生部委托中国地方病防治研究中心负责解释。

中华人民共和国卫生行业标准

血清中氟化物的测定 离子选择电极法

Determination for fluoride in serum—Ion selective electrode method

1 范围

本标准规定了用离子选择电极法测定血清中无机氟化物的浓度。

本标准适用于各种人群及动物血清中无机氟化物浓度的测定。

2 引用标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。

GB/T 6682—1992 分析实验室用水规格和试验方法

3 原理

氟离子选择电极的氟化镓单晶膜对氟离子有选择性，由电极膜分开的两种不同浓度的氟溶液之间存在电位差即膜电位，其大小与溶液中氟离子活度有关。利用电动势与氟离子活度的线性关系，可直接求出血清中氟离子浓度。

4 试剂

本标准使用的试剂纯度除特别说明外均为分析纯。实验用水应符合 GB/T 6682 中规定的二级水。全部试剂贮于聚乙烯瓶中。

4.1 氟化物标准溶液

4.1.1 氟化物标准贮备液:准确称取经 120℃干燥 2 h并冷却至室温的氟化钠(优级纯)0.221 0 g,用水溶解后移入 100 mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀，倒入聚乙烯瓶中备用。此液 1 mL 含氟 1 000 μgF^-。

4.1.2 氟化物标准工作液Ⅰ[c(F^-)=100.0 μg/mL]:吸取氟化物标准贮备液 (4.1.1)10.00 mL，移入 100 mL 容量瓶中,用水定容至刻度。

4.1.3 氟化物标准工作液Ⅱ[c(F^-)=10.0 μg/mL]:吸取氟化物标准工作液Ⅰ (4.1.2)10.00 mL，移入 100 mL 容量瓶中,用水定容至刻度。

4.1.4 氟化物标准工作液Ⅲ[c(F^-)=5.0 μg/mL]:吸取氟化物标准工作液Ⅰ (4.1.2)5.00 mL，移入 100 mL 容量瓶中,用水定容至刻度。

4.1.5 氟化物标准工作液Ⅳ[c(F^-)=2.0 μg/mL]:吸取氟化物标准工作液Ⅰ (4.1.2)2.00 mL，移入 100 mL 容量瓶中,用水定容至刻度。

4.1.6 氟化物标准工作液Ⅴ[c(F^-)=1.0 μg/mL]:吸取氟化物标准工作液Ⅱ (4.1.3)10.00 mL，移入 100 mL 容量瓶中,用水定容至刻度。

4.2 总离子强度调节缓冲液（TISAB）

4.2.1 总离子强度调节缓冲液(TISAB)，称取58.0 g氯化钠、0.4 g柠檬酸钠三钠(Na₃C₆H₅O₇·2H₂O)，溶于约500 mL水中，加入57 mL冰乙酸，用氢氧化钠[c(NaOH)=5 mol/L]调pH为5~5.2，用水定容至1 L。

4.2.2 含氟总离子强度调节缓冲液：配制同4.2.1，在加水稀释前，加氟化物标准工作液Ⅱ(4.1.3)2.00 mL。此液含氟0.02 µg/mL。临用前现配。

5 仪器

5.1 离子活度计或精密酸度计：分辨率为0.1 mV。

5.2 氟离子选择电极：CSB-F-Ⅲ型（长沙特种硬质合金工业公司产）。

5.3 232型甘汞电极。

5.4 磁力搅拌器。

5.5 塑料微溶池，具有聚乙烯包裹的搅拌子。

5.6 可调微量移液器或微量加样器2~20 µL（±0.02 µL）。

6 采样

采集空腹静脉血1.5~2 mL，置于无氟具塞的聚乙烯管中，采集后立即离心(3 000 r/min, 10 min)取血清测氟。若不能及时分析，保存冰箱(4℃)中，一周内完成测定。也可保存于-18℃~-20℃冰盒内2周测定。

7 分析步骤

7.1 标准加入法

7.1.1 电极实际斜率的测定

7.1.1.1 氟化物标准系列的配制：取6个25 mL容量瓶，按表1配制标准系列。

表1 氟化物标准系列的配制

7.1.1.2 氟化物标准系列的测定：分别吸取上述各浓度的氟标准液0.80 mL于微容池内，放一根搅拌棒，移至磁力搅拌器上，插入氟电极和甘汞电极，测定溶液的电位值，从低浓度到高浓度逐个进行。待读数稳定后（即每分钟电极电位变化小于1 mV），读取电位值，同时记录测定时的温度。

7.1.1.3 电极实际斜率(S)的计算：由上述标准系列测得的电位值，浓度每变化10倍所引起的电位差即可得不同浓度范围内的电极实际斜率。也可用上述标准系列测得的电位值(E_i)和相应的标准液的浓度(C_i)按式(1)可求得任意两个标准溶液浓度范围的电极实测响应斜率。

S = (E_S2 - E_S1) / lg(C_S2/C_S1)

式中：S——电极实际斜率；

E_S2——高浓度标准溶液的电位值；

E_S1——低浓度标准溶液的电位值；