【QB轻工标准】 化妆品中溴代和氯代水杨酰苯胺的测定高效液相色谱法

ICS71.100.70
分类号：Y42
备案号：65906-2018
中华人民共和国轻工行业标准
QB/T5294—2018
化妆品中溴代和氯代水杨酰苯胺的测定高效液相色谱法
Determination of brominated and chlorinated salicylanilide in cosmetics-High performance liquid chromatography2018-10-22发布
中华人民共和国工业和信息化部2019-04-01实施
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由中国轻工业联合会提出QB/T5294—2018
本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257）归口。本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、上海市日用化学工业研究所（国家香料香精化妆品质量监督检验中心)。
本标准主要起草人：郭项雨、马强、白桦、孟宪双、李文涛、王超、康薇。本标准为首次发布。
QB/T5294—2018
本标准的被测物质34,5-三溴水杨酰苯胺、4,5-二漠水杨酰苯胺、3,5-二溴水杨酰苯胺、3'4-二氯水杨酰苯胺、4,5-二氯水杨酰苯胺是我国《化妆品安全技术规范（2015年版）》规定的禁用物质。禁用物质是指不能作为化妆品生产原料即组分添加到化妆品中的物质。《化妆品安全技术规范（2015年版）》规定：若技术上无法避免禁用物质作为杂质带入化妆品时，应进行安全性风险评估，确保在正常、合理及可预见的使用条件下不得对人体健康产生危害。目前我国尚未规定这些物质的限量值，本标准的制定，仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法。II
QB/T5294—2018
化妆品中溴代和氯代水杨酰苯胺的测定高效液相色谱法1范围
本标准规定了化妆品中3,4,5-三漠水杨酰苯胺、4,5-二溴水杨酰苯胺、3,5-二溴水杨酰苯胺、3,4,5-三氯水杨酰苯胺、3,4-二氯水杨酰苯胺、4,5-二氯水杨酰苯胺等6种溴代和氯代水杨酰苯胺的高效液相色谱测定方法。
本标准适用于膏霜类、水剂类、唇膏类、散粉类和香波类化妆品中3,45-三溴水杨酰苯胺、4,5二溴水杨酰苯胺、3,5-二溴水杨酰苯胺、3,4,5-三氯水杨酰苯胺、3,4-二氯水杨酰苯胺、45-二氯水杨酰苯胺等6种溴代和氯代水杨酰苯胺的测定。本标准的检出限和定量限：6种溴代和氯代水杨酰苯胺的检出限为5mg/kg，定量限为10mg/kg2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理
试样经溶剂超声提取，离心过滤后，以高效液相色谱进行测定，外标法定量，液相色谱-质谱确认。4试剂和材料
除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1甲醇：色谱纯。
4.2乙睛：色谱纯。
4.3四氢呋嘲。
4.4氯化钠。
4.5标准品：3,4,5-三溴水杨酰苯胺等6种溴代和氯代水杨酰苯胺的中文名称、英文名称、CAS号分子式、相对分子质量、结构式参见附录A表A.1，纯度不小于97%。4.6标准储备液：分别称取3,4,5-三溴水杨酰苯胺等6种溴代和氯代水杨酰苯胺标准品（4.5）各10mg（精确至0.0001g），分别置于10mL容量瓶中，用甲醇（4.1）溶解并定容至刻度，摇匀，配制成浓度为1000mg/L的标准储备液，于4℃保存，可使用3个月。4.76种卤代水杨酰苯胺混合标准储备液：分别准确移取3,4,5-三溴水杨酰苯胺等6种溴代和氯代水杨酰苯胺标准储备液（4.6）各1mL于10mL容量瓶中，用甲醇（4.1）稀释至刻度，该溶液中3,4,5-三溴水杨酰苯胺等6种溴代和氯代水杨酰苯胺的浓度均为100mg/L。5仪器和设备
5.1高效液相色谱（HPLC）仪：紫外检测器或二极管阵列检测器5.2液相色谱-质谱/质谱（LC-MS/MS）仪：配有电喷雾离子源（ESI)。5.3分析天平：感量为0.0001g和0.001g。5.4离心机：转速不低于5000r/min。5.5超声波清洗器。
5.6具塞塑料离心管：10mL。
QB/T5294—2018
5.7微孔滤膜：0.45um，材质为聚四氟乙烯。6分析步骤
6.1样品处理
6.1.1膏霜类样品
称取1g（精确至0.001g）试样置于10mL具塞塑料离心管（5.6）中，加入2g氯化钠（4.4），加入10mL甲醇（4.1），摇匀，超声提取20min，5000r/min离心15min后，上清液经0.45um微孔滤膜（5.7）过滤，滤液供高效液相色谱测定。6.1.2唇类样品
取1g（精确至0.001g）试样置于10mL具塞塑料离心管（5.6）中，加入2mL四氢呋响（4.3），加入8mL甲醇（4.1），摇勺，超声提取20min，5000r/min离心15min后，上清液经0.45μum微孔滤膜（5.7）过滤，滤液供高效液相色谱测定。6.1.3水剂类、散粉类及香波类样品取1g（精确至0.001g）试样置于10mL具塞塑料离心管（5.6）中，摇匀，加入10mL甲醇（4.1）超声提取20min，5000r/min离心15min后，上清液经0.45μm微孔滤膜（5.7）过滤，滤液供高效液相色谱测定。
6.2测定条件
高效液相色谱参考条件如下：
a）色谱柱：EclipseXDBPhenyl，5um，250mm×4.6mm（内径），或相当者；流量：1.0mL/min
流动相：乙腈+水（0.1%甲酸）=68+32（体积比）；c)
检测波长：220nm；
e）柱温：35℃；
f）进样量：10μuL。
6.3标准曲线的绘制
用甲醇（4.1）将3,45-三溴水杨酰苯胺等6种溴代和氯代水杨酰苯胺混合标准储备液（4.7）逐级稀释到浓度为0.05mg/L、0.10mg/L、0.20mg/L、0.50mg/L、1.0mg/L、2.0mg/L、5.0mg/L、10.0mg/L的混合标准工作溶液。按6.2测定条件浓度依次由低向高进样测定，以峰面积-浓度作图，绘制标准工作曲线。bzxz.net
3,4,5-三溴水杨酰苯胺等6种溴代和氯代水杨酰苯胺标准品溶液的高效液相色谱图参见附录B图B.1，其标准品溶液的紫外吸收光谱图参见附录B图B.2。6.4测定
按6.2测定条件对待测样品进行测定，如果检出的溴代和氯代水杨酰苯胺的色谱峰的保留时间与标准品一致，并且在扣除背景后的样品色谱图中，该物质的紫外吸收光谱图与标准品一致，则可初步认定样品中存在溴代和氯代水杨酰苯胺，用外标法定量。溴代和氯代水杨酰苯胺含量应该在标准曲线之内，超出线性范围则应稀释后再进行分析。必要时，阳性样品应用液相色谱-质谱进行确认试验（参见附录C)。
6.5空白试验
除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行。7结果计算
结果按公式（1）计算，计算结果保留两位小数，计算结果应扣除空白值：2
式中：
QB/T5294—2018
样品中澳代和氯代水杨酸苯胺的含量，单位为毫克每千克
mg/kg）;
代和氯代水核嵌苯胺的
从标准工作血线上查出的试样溶液中澳升（mg/L
样液最终定容体积，单位为毫升mL
试样的质量，单立为克（g）。
回收率和精密度
商浓度，单位为毫克每
在添加浓度10mg/kgm-200mg/kg浓度范内，满得后收率在89.4%107.8%，相对标准偏差为
2.1%~6.7%
9允许差
在重复性条件下获得的两次独
产扭付性术平均值的10%。
测完结果的绝对差值不
QB/T5294—2018
附录A
（资料性附录）
6种溴代和氯代水杨酰苯胺的中文名称，英文6种溴代和氯代水杨酰苯胺的中文名称、英文名称、表A1。
CAS号、分子式、相对分子质量、结构式AS号、分子式、相对分
子质量、结构式参见
表A.16种溴代和氯
代水杨酰苯胺的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、
相对分子质量，结
中文名称
3,4,5-三溴
水杨酰苯胺
4,5-二漠水
杨酰苯胺
3.5-二溴水
杨酰苯胺
3,4.5-三氯
水杨酰苯胺
3'.4-二氯水
杨酰萃胺
4,5-二氯水
杨酰苯胺
英文名利
$.4.5-Tribn
-salicylaninida
Dibromsalor
Metabr
3.4.5-Trichloro
saliev
3,4-Dit
nilide
4.5-Dichlorosalicylanilide
CAS号
87-10-5
87-12-7
642-84-2
1147-98-4
分手式
ChHaBrNO.
CHClNO2
CH,ClNO
相对分子
结构式
附录B
(资料性附录）
QB/T5294-2018
6种溴代和氨代水杨酰苯胺标准品溶液的高效液相色谱图和紫外吸收光谱图6种溴代和氯代水杨酰苯胺标准品溶液的高效液相色谱图和紫外吸收光谱图参见图B.1和图B.2。180
保留时间/min
1-3,4-二氯水杨酰苯胺；2-3,4,5-三氯水杨酰苯胺：3-4,5-二氯水杨酰苯胺：4-35-二漠水杨酰苯胶：5-4,5-二澳水杨酰苯胺：6-3,4,5-三澳水杨酰苯胺6种溴代和氯代水杨酰苯胺标准品溶液的高效液相色谱图图B.1
200220240260280300320340360380400波长/mm
1-3'4-二氯水杨酰苯胺；2-,4,5-三氟水杨酰苯胺：3-4,5-二氯水杨酰苯胺：4-3,5-二漠水杨酰苯胺，5—4,5-二溴水杨酰苯胺；6—3,4,5-三溴水杨酰苯胺图B.26种溴代和氯代水杨酰苯胺标准品溶液的紫外吸收光谱图5
QB/T5294—2018
液相色谱参考条件
液相色谱参考条件如下：
附录C
(资料性附录）
确认试验
a）色谱柱：XBridgeCi8，3.5um，150mm×2.1mm（内径），或相当者：流动相：甲醇+0.1%氨水溶液=45+55（体积比）；b)
流量：0.3mL/min；
柱温：30℃：
进样量：5uL。
C.2质谱参考条件
质谱参考条件如下：
离子源：电喷雾离子源：
离子化模式：负离子模式；
毛细管电压：3.0kV：
萃取锥孔电压：3V
离子源温度：150℃；
脱溶剂气温度：500℃：
数据采集方式：多反应监测。
C.3定性测定
进行试样测定时，将样液适当稀释，按液相色谱-质谱条件测定样液和标准工作溶液，如果所选择的离子均出现，而且所选择的离子比与标准物质的相对丰度一致，允许偏差不超过表C.1规定的范围，则可判断样品中含氯代或溴代水杨酰苯胺。6种溴代和氯代水杨酰苯胺的选择离子质量色谱图参见图c.1。
表C.16种氯代或溴代水杨酰苯胺的质谱分析参数化合物
3,4,5-三溴水杨酰苯胺
4,5-二溴水杨酰苯胺
3,5-二溴水杨酰苯胺
3,4,5-三氯水杨酰苯胺
3'4-二氯水杨酰苯胺
4,5-二氯水杨酰苯胺
定量离子对
(m/z）
448.9/251.0
370.0/171.0
370.1/78.8
315.5/160.0
281.1/160.0
281.2/126.8
定性离子对
448.9/78.8
370.0/173.0
370.1/171.0
315.5/127.0
281.1/93.0
281.2/154.0
锥孔电压
碰撞能量
30，25
30，28
25，25
相对离子
丰度/（%）
100,92
100，87
100，92
100，93
100，89
100，97
允许相对偏
差/（%）
保留时间/min
1-3,5-二漠水杨酰苯胺：2-4'5-二澳水杨酰苯胺：3-3,4-二氯水杨酰苯胺QB/T5294-2018
4-45-二氯水杨酰苯胺：5-3,45-三氟水杨酰苯胺；6-3.4,5-三溴水杨酰苯胺图C.16种溴代和氯代水杨酰苯胺的选择离子质量色谱图7
中华人民共和国
轻工行业标准
化妆品中溴代和氯代水杨酰苯胺的测定高效液相色谱法
QB/T5294—2018
中国轻工业出版社出版发行
地址：北京东长安街6号
邮政编码：100740
发行电话：（010)85119832/38
网址：http：//chlip.com.cnEmail:club@chlip.com.cn
轻工业标准化编辑出版委员会编辑地址：北京西城区月坛北小街6号院邮政编码：100037
电话：(010)68049923
版权所有侵权必究
书号：155019-5241
印数：1-200册
定价：25.00元
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。