【国家标准】 畜禽粪便监测技术规范

ICS65.020.30
CCSB43
中华人民共和国国家标准
GB/T25169—2022
代替GB/T25169—2010
畜禽粪便监测技术规范
Technical specification for monitoring livestock and poultrymanure2022-12-30发布
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会
2023-07-01实施
GB/T25169-—2022
第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定本文件按照GB/T1.1-—2020《标准化工作导则起草。
本文件代替GB/T25169—2010《畜禽粪便监测技术规范》，与GB/T25169—2010相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下：a)
删除了背景调查（见2010年版的第3章）：增加了监测方案制定（见第4章）：更改了检测项目（见第5章，2010年版的9.1）；删除了含内粪便的采样点布设（见2010年版的4.1)；增加了未经处理粪便采样布点（见6.1）：增加了堆肥过程粪便采样布点（见6.3）；删除了舍内粪便采样（见2010年版的5.3.1）；增加了未经处理粪便采样（见7.3.1)；增加了堆肥过程粪便采样（见7.3.3）；更改了样品记录和标识（见7.5，2010年版的5.4）；增加了采样安全（见7.6）；
更改了样品的运输（见第8章，2010年版的第6章）：更改了试样制备和样品的保存（见第9章，2010年版的第7章和第8章）；更改了分析方法（见第10章，2010年版的9.2）；删除了结果表示（见2010年版的9.3）；删除了质量保证（见2010年版的第10章）；更改了质量控制（见第11章，2010年版的10.1和10.2）；增加了证实方法（见第12章）：删除了畜禽粪便收集量记录表（见2010年版的附录A）：更改了备禽类便采样记录表（见附录B，2010年版的附录D)；更改了畜禽粪便样品标签（见附录C，2010年版的附录C）。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任本文件由中华人民共和国农业农村部提出。本文件由全国畜牧业标准化技术委员会（SAC/TC274)归口。本文件起草单位：中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所、中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所。
本文件主要起草人：尚斌、董红敏、朱志平、徐贞贞、张海燕、杨曙明、王雪、陈永杏、陶秀萍、尹福斌、张万钦、王悦、魏莎、郑云昊、曾剑飞本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为：—2010年首次发布为GB/T25169一2010；一本次为第一次修订。
1范围
畜禽粪便监测技术规范
GB/T25169—2022
本文件规定了畜禽粪便监测方案制定、监测项目、采样布点、样品采集、样品运输和交接、试样制备和保存以及质量控制等技术要求，描述了畜禽类便监测的试验方法和证实方法。本文件适用于畜禽粪便收集、处理和资源化利用过程的监测。本文件不适用于商品化有机肥料的监测规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB7959一2012粪便无害化卫生要求GB/T24875畜禽粪便中铅、铺、铬、汞的测定电感耦合等离子体质谱法HJ491土壤和沉积物铜、锌、铅、镍、铬的测定火焰原子吸收分光光度法NY/T525—2021
1有机肥料
NY/T3442—2019
畜禽粪便堆肥技术规范
术语和定义
下列术语和定义适用于本文件
livestockandpoultrymanure
畜禽粪便
备禽养殖过程产生的固体类便及其与垫料的混合物监测方案制定
在开展监测工作前，应制定监测方案。监测方案应包据：监测目的、监测项目、采样布点、样品采集方法、样品运输和交接、试样制备和保存、试验方法以及质量控制措施等。监测项目
根据监测目的，选择相应的监测项目，主要包括含水率、有机质、总氮、总磷、总钾、铜、锌、锯、铅、铬汞、粪大肠菌群数、蚓虫卵死亡率、种子发芽指数和磺胺嘧啶、磺胺甲暖唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、恩诺沙星、达氟沙星、沙拉沙星及系乐菌素1
GB/T25169—2022
菜样布点www.bzxz.net
6.1采用干清粪收集工艺的，应在类便临时存放处布设采样点位：采用水冲粪或水泡粪收集工艺的，应在固液分离后产生的固体粪便临时存放处布设采样点位：采用垫料养殖工艺的，应在垫料清理后临时存放处布设采样点位
6.2采用贮存、制处理工艺的，应在粪便存后、区制后布设采样点位。6.3
采用堆肥处理工艺的，应在发酵处理前后分别布设采样点位。7样品采集
7.1采样准备
7.1.1工具
铲、钻或竹片等采样工具及聚乙烯样品自封袋、样品混合盆（10L）、保温样品箱和冰袋测试金属指标，采样工具、样品混合盆等应不含金属成分。测试微生物指标，采样工具、样品混合盆应提前进行灭菌处理，自封袋应无菌。
7.1.2文具
现场记录表格、样品标、签学笔7.1.3器具
台秤（2kg士0.1kg）和量筒（20mL）。7.1.4试剂
硫酸：分析纯。
7.1.5安全防护用品
防护服、胶鞋、手套和口罩。
菜样频次
根据畜禽类便收集、处理利用时间安排采样，每次连续采样3d～5d，每天至少采样1次，确保3d有效采样。
7.3采样
7.3.1，未经处理粪便采样
根据类便临时存放堆体大小，从中心向边缘沿半径设置3个采样位置，每个位置由底部自下而土每20cm为一个取样点，每个点采样约0.5kg，装人样品混合盆中，混合均匀，用四分法（按附录A）分取样品，一式3份，每份约0.5kg，装人自封袋7.3.2购存、制过程粪便采样
根据堆体大小，从中心向边缘沿半径设置3个采样位置，每个位置由底部自下而上每20cm为一个2
GB/T25169—2022
取样点，每个点采样约0.5kg，装人样品混合盆中，混合均匀，用四分法（按附录A）分取样品，一式3份，每份约0.5kg，装人自封袋。
7.3.3堆肥过程粪便采样
发酵前菜样
发酵原料混合均匀后采样，设置3个采样位置，每个位置采样不少于1kg，装人样品混合盆中，混合均匀，用四分法（按附录A）分取样品，一式3份，每份约0.5kg，装人自封袋。7.3.3.2一次发酵采样
采用条垛式和覆膜式发酵处理工艺的，沿堆体长度方向前中后选择不少于3个位置，每个位置从底部自下面上每20cm为一个取样点，每个点采样约0.5kg：采用槽式搅拌和立式发酵处理工艺的，在发酵设施设备出料口设置3个采样位置，每个位置采样不少于1kg，将采集的样品装入混合盆中，混合均匀，用四分法（按附录A）分取样品，一式3份，每份约0.5kg，装人自封袋。3二次发酵（后熟）采样
在发酵完成后的堆体设置3个采样位置，每个位置采样不少于1kg，将采集的样品装人混合盆中，混合均匀.用四分法（按附录A）分取样品，一式3份，每份约0.5kg，装人自封袋7.4样品处理
根据不同检测项目，样品处理方式如下：a
测定含水率、种子发芽指数、粪大肠菌群和酮虫卵死亡率项目的样品·低温保存：测定有机质、总氮、总磷、总钾、铜、锌、镉、铅、铬、汞的样品，每100g样品中添加10mL硫酸b)
（7.1.4），混合混匀，低温保存；测定磺胺嘧啶、磺胺甲嗯唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、恩诺沙星、达氟沙星、沙拉沙星和泰乐菌素的样品，4℃以下避光保存。5采样记录和标签
7.5.1现场用签字笔填写畜禽粪便采样记录表（见附录B）和样品标签（见附录C）。每个样品编号唯一、内容齐全、填写期实、字迹清楚。填写完毕后将样品标签贴在对应的样品包装上，防止脱落7.5.2采样结束后，应对样品、采样记录表和采样器具等进行核实，确保样品和记录完整后撤离现场7.6
菜样安全
7.6.1采样人员应穿防护服和胶鞋，戴手套和口罩。7.6.2采样人员应身体健康，适应工作要求，现场采样时至少两人同时在场。7.6.3不应在搅拌设备运行时采样。7.6.4不应进人有限空间内采样。注：有限空间是指封闭或者部分封闭，与外界相对隔离，出入口较为狭窄，自然通风不良，易造成有毒有害，易燃易爆物质积聚或者氧含量不足的空间。8样品运输和交接
样品在运输前应逐一核对采样记录和样品标签，分类置于保温样品箱中运输，防止交叉污染，样8.1
GB/T25169-—2022
品应尽快送达检测实验室
2送样人与实验室接样人进行样品交接时，应清点和检查样品，并在交接记录上签字。样品交接记8.2
录内容包括交接样品的日期和时间、样品数量、测定项目、保存方式、送样人、接样人等。试样制备和保存
根据不同检测项目要求应及时进行试样制备和保存，并尽快分析化验。样品制备方法、保存条件和有效期按表1执行。
检测项目
含水率、类大肠菌群数、烟虫卵死亡率、种子发芽指数
有机质、总氮、总磷、总钾
铜、锌、销、铅、铬
磺胺嘧啶、磺胺甲嘎唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、恩诺沙星、达氟沙星、沙拉沙星、泰乐葡素
试验方法
含水率
样品制备方法、保存条件和有效期制备方法
新鲜样
新鲜样品晾干或冷冻干燥制备成风干样品，经粗磨，过2mm尼龙筛，再细磨过0.25mm尼龙筛
新鲜样品晾干或冷冻干燥制备成风干样品，经粗磨，过2mm尼龙筛，再经非金属磨细磨，过0.25mm尼龙筛
新鲜样品晾干或冷冻干燥制备成风干样品，经粗磨，过2mm尼龙筛，再经非金属磨细磨，过0.25mm尼龙筛
新鲜样品冷冻干燥后，经粗磨，过2mm尼龙筛。再经非金属磨细磨过0.25mm尼龙筛按GB7959—2012附录B的规定执行。10.2
有机质
按NY/T525—2021附录C的规定执行。10.3
总氮、总磷和总钾
按NY/T525—2021附录D的规定执行。10.4
铜、锌
按HJ491的规定执行。
保存条件和有效期
避光.0℃~5℃，24h
风干样，常温干燥避光，30d；
制备样，常温干燥避光，180d
风干样，常温干燥避光，180d：制备样，常干燥避光，365d
风干样和制备样，常温干燥避光，28 d
制备样，常温干燥避光
10.5镉、铅、铬、汞
按GB/T24875的规定执行
种子发芽指数
按NY/T3442—2019附录D的规定执行。10.7粪大肠菌群数
按GB7959—2012附录D的规定执行。10.8蛔虫卵死亡率
按GB79592012附录E的规定执行。GB/T25169—2022
10.9磺胺嘧啶、磺胺甲嗯唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、恩诺沙星、达氟沙星、沙拉沙星、泰乐菌素
测定方法见附录D。
质量控制
11.1采样过程质量控制
11.1.1采样全过程应双人采样并记录11.1.2：同一采样点采集的平行样品测定结果差异较大时，应仔细检查原因，以消除出现差异的因素，必要时重新采样。
检测分析质量控制
实验室接样人员应首先核对采样记录、样品编号、保存条件和有效期等，符合要求的样品方可开展检测分析。
控样品。
报出。
检测分析过程中采用市售有证标准样品进行质量控制，每20个样品至少加一个已知浓度的质测试结果超出方法规定的充许误差时，取有效期内的样品复测一次，充许误差符合规定后证实方法
备禽粪便监测过程应形成记录。重点核查以下内容：监测方案规定的相关检测工作是否完成；监测项目与本文件规定的指标是否一致；一一采样布点设计与布点记录是否一致：一采样记录表与样品数量是否一致；采样记录表中样品编号是否唯一：一样品保存和检测过程的相关记录是否符合检测方法要求5
GB/T25169—2022
四分法简图见图A.1。
混勾，等分
取两份，余弃
（规范性）
四分法简图
再混勾四等分
四分法简图
取两份，余弃
至设计采样量
附录B
（资料性）
畜禽粪便采样记录表
畜禽类便采样记录表内容和格式见表B.1。表B.1
畜禽场（户）名称
畜禽场（户）地址
葡禽种类
粪便处理工艺
粪便感官措述
样品编号
省（市、自治区）
采样位置
现场情况记录
记录人：
采样人：
畜禽粪便采样记录表
市(州、盟）
采样日期
县（市、区、旗）
饲养类型
口无味
口轻臭味
口重臭味
采样时间
GB/T25169—2022
乡(镇、街道)
含水情况
口较千
口糊状
口湿润
口水状
现场预处理情况
村（社区）
采样点位置示意图（含经纬度）日期：
GB/T25169-—2022
（资料性）
畜禽粪便样品标签
畜禽类便样品标签内容和格式见图C.1育禽类便样品标签
采样样品编号
监测点名称
样地点
现场预处理
采样H期：
采样人：
畜禽粪便样品标签
D.1原理
附录D
（资料性）
GB/T25169—2022
畜禽粪便中磺胺嘧啶、磺胺甲唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、恩诺沙星、达氟沙星、沙拉沙星、泰乐菌素的测定液相色谱-高分辨质谱法试样中的药物残留用Na，EDTA-Mcllvaine缓冲液和乙睛提取，经QuEChERS方法净化，用液相色谱-高分辨质谱仪测定，基质匹配标准曲线校准，外标法定量D.2
试剂或材料
除非另有说明，仅使用分析纯试剂。D.2.1
水：GB/T6682，一级水。
甲醇：色谱纯。
乙睛：色谱纯。
乙酸乙酯：色谱纯
50%甲醇溶液：取50mL甲醇于100ml容量瓶中，用水定容，混匀。流动相A：称取0.15g乙酸铵，置于1000mL容量瓶中，加水溶解后，再加2mL甲酸，用水定容，混匀。
流动相B：准确量取2mL甲酸于1000mL容量瓶，用甲醇定容，混匀。NaEDTA-Mcllvaine缓冲液：分别称取无水磷酸氢二钠10.9g，乙二胺四乙酸二钠3g，柠檬酸12.9g，加水溶解并定容至1000mL，混匀。D.2.9
混匀。
甲醇溶液（十1%H0+1%乙睛）：取1ml水和1mL乙睛于100mL容量瓶中，用甲醇定容，标准储备溶液（10pμg/mL）：分别准确称取标准品适量，按照表D.1对应药物的溶剂配制成磺胺嘧啶、磺胺甲嗯唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、恩诺沙星、达氟沙星以及泰乐菌素的标准储备溶恩诺沙星、达氟沙星、沙拉沙星、磺胺嘧啶、磺胺甲呕唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶标准储备溶液。
液于一20℃以下贮存，有效期12个月：泰乐菌素标准储备溶液一20℃以下贮存，有效期2个月。或购买商品化有证标准储备溶液
药物名称
磺胺嘧啶
磺胺甲恶唑
磺胺二甲嘧啶
磺胺间甲氧嘧啶
恩诺沙星（恩氟沙星）
达氟沙星（单诺沙星）
沙拉沙星
泰乐蘭素
英文名称
Sulfadiazine
各药物信息及其对应溶剂
CAS号
68-35-9
Sulfamethoxazole
Sulfadimidine
Sulfamonomethoxin
Enrofloxacin
Danofloxacin
Sarafloxacin
Tylosin
723-46-6
57-68-1
1220-83-3
93106-60-6
112398-08-0
98105-99-8
1401-69-0
化学式
ChHaN,O,s
CHuN,O,S
CuHuN,O,S
CHF,N,O
纯度/%
甲醇（D.2.2)
甲醇（D.2.2)
甲醇(D.2.2)
甲醇（D.2.2)
甲醇溶液（D.2.9）
甲醇溶液（D.2.9）
甲醇溶液（D.2.9）
乙酸乙酯（D.2.4）
GB/T25169—2022
D.2.11混合标准中间溶液（1ug/mL）：分别准确量取8种标准储备溶液（D.2.10）各1mL于10mL容量瓶中，用50%甲醇溶液（D.2.5）定容，摇匀。临用现配。D.2.12混合标准工作溶液（100ng/mL）：准确量取混合标准中间溶液（D.2.11）1mL于10mlL容量瓶中，用50%甲醇溶液（D.2.5）定容，摇匀。临用现配。D.2.13
QuEChERS盐析包：每份含4g硫酸钠及1g氯化钠QuEChERS除脂分散净化剂：每份含1g净化剂.或性能相当的产品。微孔滤膜：0.22μm，有机系。
仪器设备
液相色谱-高分辨质谱仪：配有电喷雾离子源的飞行时间质谱。分析天平：精度0.0001g和0.01g。涡旋混合仪。
离心机：转速不低于9500r/min。氮吹仪。
冷冻干燥机。
D.4基质空白试样
选取混合均匀、待测物保留时间处仪器响应值小于方法定量限对应响应值的30%的备禽粪便作为基质空白样品。制备和贮存方法按表1执行。D.5试验步骤
D.5.1提取
平行做两份试验。准确称取试样2g（精确到0.01g），置50mL离心管中，加人8mLNaEDTAMcIlvaine缓冲液（D.2.8）.涡旋混匀，再加人10.0mL（V）乙（D.2.3），涡旋1min后加人1份萃取盐包（D.2.13）.静置10min使盐析分层，9500r/min条件下离心10min，准确量取8mL（V，）的上层清液于15mL离心管中，在40℃吹干，用2mL乙睛（D.2.3）复溶，备用。D.5.2净化
称取含0.5g除脂分散净化剂（D.2.14）于15mL净化管，加人2mL水，混匀、涡旋2min后，将上述复溶液（D.5.1）全部转移至净化管中（V，），涡旋1min，在9500r/min条件下离心5min，上清液过滤膜，待测。
3基质匹配混合标准系列溶液的制备D.5.3
取若干份空白试样，按D.5.1和D.5.2处理，制备空白试样溶液。吸取适量的混合标准工作溶液（D.2.12）和混合标准中间溶液（D.2.11），用空白试样溶液稀释，配制成质量浓度为1ng/mL、2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL基质匹配混合标准系列溶液，供液相色谱-高分辨质谱仪测定。
D.5.4液相色谱参考条件
液相色谱参考条件如下：
色谱柱：C柱，柱长150mm，内径3.0mm，粒径1,8um，或性能相当者；b)
柱温：40℃：
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