【GA公共安全标准】 法庭科学血液中阿维菌素B1a 液相色谱-串联质谱检验方法

ICS13.310
中华人民共和国公共安全行业标准GA/T1331—2016
法庭科学血液中阿维菌素B1a
液相色谱-串联质谱检验方法
LC-MS/MS examination methods for abamectin Bla inblood samples in forensic science2016-09-14发布
中华人民共和国公安部
2016-09-14实施
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。GA/T1331-2016
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会（SAC/TC179/SC1）提出并归口。免费标准下载网bzxz
本标准起草单位：公安部物证鉴定中心、山西医科大学法医学院。本标准主要起草人：王、负克明。I
Hii KAoNhi KAca
HiKAoNhi KAca
1范围
法庭科学血液中阿维菌素B1a
液相色谱-串联质谱检验方法
GA/T1331—2016
本标准规定了法庭科学血液中阿维菌素Bla的液相色谱-申联质谱（LC-MS/MS)检验方法。本标准适用于法庭科学血液中阿维菌素Bla的定性定量分析。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682-2008分析实验室用水规格和试验方法GA/T122毒物分析名词术语
3术语和定义
GA/T122界定的术语和定义适用手本文件。4原理
以空白样品和添加样品作对照，按平行操作的要求，对血液进行提取，净化及浓缩后，采用液相色谱-离子质谱法检测，以保留时间（t）、质谱特征离子碎片峰和相对丰度作为定性判断依据；与平行操作的添加标准物质响应值比较，根据峰面积之比，用外标法进行定量分析。试剂和材料
除另有说明外，本标准所用试剂均为分析纯，试验用水为一级水（见GB/T6682一2008规定）：乙腈：色谱纯；
b）甲醇：色谱纯：
c）无水硫酸钠；
d）0.1%甲酸溶液：移取1.0mL甲酸于1L容量瓶中，加水稀释至刻度，混勾；e）标准溶液：
1）100μg/mL标准物质溶液：称取阿维菌素（Abamectin，C4sHz2Ou，CAS：71751-41-2，其中Bla含量大于95%，以下阿维菌素含量均以阿维菌素Bla计。阿维菌素Bla成分及质谱图参见附录A标准物质适量，用乙睛配制成浓度为100ug/mL的标准物质溶液。密封，置于冰箱中冷冻保存。保存时间6个月；标准工作溶液：根据需要移取一定量100.0ug/mL阿维菌素标准物质溶液，用乙睛稀释2)
配制成适当浓度的标准工作溶液。密封，置于冰箱中冷藏保存。保存时间3个月。1
HiKAoNhi KAca
GA/T1331—2016
6仪器和设备
仪器和设备包括：
a）高效液相色谱-离子阱质谱联用仪：配电喷雾离子源（ESI）；b）固相萃取装置：
c）氧化铝固相萃取柱：
d）涡旋振荡器；
e）微孔有机滤膜：0.22μm
f)）电子天平：分度值为0.1mg；g）离心机；
h）浓缩器。
操作方法
7.1定性分析
7.1.1样品萃取
7.1.1.1样品制备
移取血液样品1.0mL于具盖离心管中。移取等量空白血液两份于具盖离心管中，一份作为空白样品，另一份添加阿维菌素Bla标准物质作为添加样品，混勾，待检。7.1.1.2固相萃取
取7.1.1.1待检样品，分别加人乙睛4mL，振荡5min，8000r/min离心10min，取上清液用无水硫酸钠脱水后，过氧化铝固相萃取柱（事先活化），收集滤液，再用适量乙继续冲洗固相萃取柱，收集洗液，合并滤液与洗液在浓缩器上50℃下浓缩至干，残渣加人甲醇500L定容，用微孔有机滤膜过滤并转移至进样瓶内，供仪器分析。7.1.2仪器检测
以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整：a）色谱柱：Cl反相色谱柱（2.1mm×100mm，3.5μm）或其他等效柱；b）柱温：30℃；
c）流动相：甲醇：0.1%甲酸溶液=75：25；d）流速：0.2mL/min;
进样体积：10μL；
离子化方式：ESI；
g）扫描方式：MS/MS-SCAN，正离子检测；h）母离子[M+Na]：895，定量离子碎片：751：i
源电压：4.58kV；
加热毛细管温度：280℃，
鞘气（氨气，纯度大于99.999%）流量：25；辅助气（氮气，纯度大于99.999%）流量：5：k）
碰撞能：31%。
HiiKAoNniKAca
7.1.3记录和计算
GA/T1331—2016
记录各样品及标准物质平行进样2次～3次中目标物的t及峰面积值，按式（1）计算回收率：Az ×Wn ×V=×100%
式中：
回收率
添加样品中标准物质峰面积平均值；标准物质的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；添加样品的定容体积，单位为毫升（mL）；一标准物质纯品的峰面积平均值；添加样品中标准物质添加量，单位为微克（ug）。定量分析
样品萃取
移取血液样品1.0mL两份；另移取空白血液1.0mL两份，分别添加阿维菌素B1a标准物质（添加量应与样品粗测量相近），作为添加样品，混匀。按7.1.1进行操作。7.2.2仪器检测
按7.1.2进行检测。
7.2.3记录与计算
7.2.3.1计算药物含量
记录各样品平行进样2次～3次中目标物的峰面积值，按式（2)计算含量：W
式中：
A#XMXVm
AXM#XV
·（2）
单位质量案件样品中目标物质的含量，单位为微克每克（ug/g）或微克每毫升（ug/mL）；案件样品中目标物峰面积平均值；添加样品中标准物质添加量，单位为微克（μug）；案件样品的定容体积，单位为毫升（mL）；一添加样品中目标物峰面积平均值；案件样品的取样量，单位为克（g）或毫升（mL）；添加样品的定容体积，单位为毫升（mL）。7.2.3.2计算相对相差
记录2份平行操作的案件样品含量，按式（3）计算相对相差：1X,-X21
式中：
相对相差，(%)；
X1、X2-—2份案件样品平行定量测定的含量数值；（3)
HiiKAoNhiKAca
GA/T1331--2016
———2份案件样品平行定量测定含量的平均值。8结果评价
8.1定性结果评价
8.1.1阴性结果评价
如果案件样品未出现与标准物质t相同的色谱峰，添加样品的回收率大于或等于60%，则阴性结果可靠。如果添加样品中未出现与标准物质t相同的色谱峰或回收率小于60%，则阴性结果不可靠。应按7.1重新提取检验。
本标准血液中阿维菌素Bla的检测限为0.01μg/mL。8.1.2阳性结果评价
如果案件样品中的m/2=751离子色谱峰t与目标物一致，且［M+Na]+（m/z=895）母离子、特征碎片离子m/=751的丰度比与当前浓度的标准工作溶液的丰度比相对一致（参见图A.1和图A.2），则阳性结果可靠。
如果空白样品中出现与标准工作溶液与目标物t一致的色谱峰，且[M+Na］+（m/z=895)母离子、特征碎片离子m/z=751的丰度比相对一致，则阳性结果不可靠。应按7.1重新提取检验。8.2定量结果评价
如果案件样品中目标物含量的RD小于或等于20%，定量数据可靠，其含量按2份案件样品的平均值计算。如果案件样品中目标物含量的RD大于20%，定量数据不可靠。应按7.2重新提取检验。4
HiKAoNhiKAca
A.1阿维菌素的成分组成
附录A
（资料性附录）
相关资料及图谱
GA/T1331-2016
天然的阿维菌素有8个成分，即阿维菌素Bla、B1b、B2a、B2b、Ala、A1b.A2a、A2b，其中阿维菌素Bla是主要活性成分，市售的阿维菌素农药以阿维菌素Bla（含量大于90%）标定。阿维菌素B1am/z=751离子流图和LC-MS/MS质谱图A.2
阿维菌素B1am/z=751离子流图和LC-MS/MS质图见图A.1和图A.2。RT:0.00-10.00
Time(min)
图A.1阿维菌素B1a的m/z=751离子流图5
iiKAoNhiKAca
GA/T1331—2016
326.94376.88 449.13
751,25
607.1764.25689.26
895,31
阿维菌素B1a的LC-MS/MS质谱图
GA/T1331-2016
中华人民共和国公共安全
行业标准
法庭科学血液中阿维菌素Bla
液相色谱-串联质谱检验方法
GA/T1331—2016
中国标准出版社出版发行
北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029）北京市西城区三里河北街16号（100045）网址spc.net.cn
总编室：（010)68533533
3发行中心：（010)51780238
读者服务部：(010)68523946
中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销
开本880X1230
印张0.75
字数14千字
2017年2月第一版2017年2月第一次印刷书号：155066·2-31130定价
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。