【GA公共安全标准】 法庭科学血液中甲草胺等五种酰胺类除草剂气相色谱-质谱检验方法

ICS13.310
中华人民共和国公共安全行业标准GA/T1332—2016
法庭科学血液中甲草胺等五种酰胺类除草剂气相色谱-质谱检验方法
GC-MS examination methods for five actamide herbicides including alachlorinbloodinforensicscience
2016-09-14发布
中华人民共和国公安部
2016-09-14实施
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。GA/T1332—2016
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会（SAC/TC179/SC1）提出并归口。
本标准起草单位：北京市公安局刑侦总队，公安部物证鉴定中心。本标准主要起草人：杨士云、乔静、袁增平、张文芳、何毅、于忠山、王芳琳。Hii KAoNhi KAca
HiKAoNhiKAca
1范围
法庭科学血液中甲草胺等五种酰胺类除草剂气相色谱-质谱检验方法
GA/T13322016
本标准规定了法庭科学血液中五种酰胺类除草剂甲草胺、乙草胺、异丙甲草胺、丁草胺、丙草胺的气相色谱-质谱（GC-MS）检验方法。本标准适用于法庭科学血液中甲草胺、乙草胺、异丙甲草胺、丁草胺、丙草胺的定性定量分析。2
规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682-2008分析实验室用水规格和试验方法GA/T122毒物分析名词术语
3术语和定义
GA/T122界定的术语和定义适用于本文件4原理
以空白样品和添加样品作对照，按平行操作的要求，对血液进行提取，净化及浓缩后，采用气相色谱-质谱法检测，以保留时间（t），质谱特征离子碎片峰和相对丰度作为定性判断依据；与平行操作的添加标准物质响应值比较，根据峰面积之比，用外标法进行定量分析。5试剂和材料
除另有说明外，本标准所用试剂均为分析纯，试验用水为三级水（见GB/T6682一2008规定）：a）环已烷：
b）乙醇，
c）标准溶液：
1）1.0mg/mL标准物质溶液：分别称取甲草胺、乙草胺异丙甲草胺、丁草胺，丙草胺标准物质50.0mg于50mL容量瓶中，加一定量乙醇溶解并稀释至刻度，混匀。分别配制成1.0mg/mL的甲草胺，乙草胺、异丙甲草胺、丁草胺，丙草胺标准物质溶液。密封，置于冰箱中冷冻保存。保存时间12个月；2）0.1mg/mL标准工作溶液：分别移取1.0mg/mL酰胺类除草剂标准物质溶液1.0mL于10mL容量瓶中，加人乙醇稀释至刻度，混勾。分别配制成0.1mg/mL的甲草胺、乙草胺、异丙甲草胺、丁草胺、丙草胺标准工作溶液。密封，置于冰箱中冷藏保存。保存时间6个月。
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GA/T1332—2016
6仪器和设备
仪器和设备包括：
a）气相色谱-质谱联用仪：配电子轰击离子源（EI)，离子阱或四级杆检测器；b）电子天平：分度值为0.1mg
c）离心机：
d）涡旋振荡器；
e）硅胶柱：500mg/3mL
f）微量注射器：10μL；
g）移液器：
h）具盖离心管；
浓缩器。
7操作方法
7.1定性分析
7.1.1样品萃取
7.1.1.1样品制备
移取血液1.0mL~2.0mL于具盖离心管中。移取等量空白血液3份于具盖离心管中，一份作为空白样品，另两份添加酰胺类除草剂标准物质1.0μg，作为添加样品，混勾，待检。7.1.1.2液液萃取
取7.1.1.1待检样品，分别加人环已烷8mL，振荡5min，8000r/min离心10min，提取有机相；重复提取一次，合并两次提取的有机相，过硅胶柱（使用前分别用甲醇2mL、环已烷2mL活化），收集流出液在浓缩器上50℃下浓缩至干或自然挥干，残渣加人乙醇100μL定容，转移至进样瓶内，供仪器分析。
7.1.2仪器检测（气相色谱-质谱仪条件）以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整：a）色谱柱：DB-5MS毛细色谱柱（或其他5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷等效柱），30mX0.25mm×0.25μm
注：DB-5MS毛细色谐柱为Agilent公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。b）色谱柱温程：100C保持1min，以10℃/min速率升温至280C，保持20min进样口温度：280℃；
d）传输线温度：260℃；
载气：氮气，纯度大于99.999%；电子轰击能量：70eV；
离子源温度：200℃；
倍增器电压：自动调谐值；
溶剂延迟：3min；
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j）柱流量：lmL/min；
k）分流比：10：1；
1）质量范围：40amu~400amu；
m）扫描方式：全扫描（SCAN）。7.1.3记录和计算
GA/T1332—2016
记录各样品及标准物质平行进样2次～3次中目标物的tR及峰面积值，按式（1)计算回收率：A×W#×V±×100%
式中：
回收率：
一添加样品中标准物质峰面积平均值；标准物质浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；一添加样品的定容体积，单位为毫升（mL），V
标准物质的峰面积平均值；
M—添加样品中标准物质添加量，单位为微克（μg）。7.2
定量分析
样品萃取
·（1)
移取血液2.0mL两份，另取相应的空白血液两份，分别添加标准酰胺类除草剂（添加量应与案件样品的粗测值相近），混匀。按7.1.1进行操作。7.2.2仪器检测
按7.1.2进行检测。
7.2.3记录与计算
7.2.3.1计算药物含量
记录各样品平行进样2次～3次中目标物的峰面积值，按式（2)分别计算各酰胺类除草剂的含量：W
式中：
A#XMXV样
AXM￥XV
单位质量案件样品中目标物质的含量，单位为微克每毫升（ug/mL）：案件样品中目标物特征离子的峰面积平均值；添加样品中标准物质添加量，单位为微克（ug）；案件样品的定容体积，单位为毫升（mL）；添加样品中目标物特征离子峰面积平均值；案件样品的取样量，单位为毫升（mL）：M样
添加样品的定容体积，单位为毫升（mL）。7.2.3.2计算相对相差
记录2份平行操作的案件样品含量，按式（3）计算相对相差：IX,-X21>
（2）
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GA/T1332—2016
式中：
RD—相对相差（%)；
X1、X——2份案件样品平行定量测定的含量数值；X
-—2份案件样品平行定量测定含量的平均值。8结果评价
8.1定性结果评价
8.1.1阴性结果评价
在气相色谱-质谱（选择离子为146，160，176）分析中，如果案件样品未出现与标准物质t相同的色谱峰，添加样品的回收率大于或等于60%，则阴性结果可靠。如果添加样品中未出现与标准物质t相同的色谱峰或回收率小于60%，则阴性结果不可靠。应按7.1重新提取检验。气相色谱-质谱方法检出限为：甲草胺16.7ng/mL（S/N=101）、乙草胺30.0ng/mL（S/N=10：1)、异丙甲草胺10.0ng/mL(S/N=10：1)、丁草胺10.0ng/mL（S/N=10：1)、丙草胺12.5ng/mL(S/N=10:1).
保留时间及碎片参见表A.1，回收率数据参见表A.2。五种除草剂的质谱图参见图A.1~图A.5。8.1.2阳性结果评价
在气相色谱-质谱分析中，案件样品出现与标准物质t相同的色谱峰，且质谱特征离子碎片及相对丰度一致，空白样品无干扰，则阳性结果可靠。在气相色谱-质谱法分析中，如果空白样品中出现与标准物质ts相同的色谱峰，且质谱特征离子碎片及相对丰度一致，则阳性结果不可靠。应按7.1重新提取检验。8.2定量结果评价
如果案件样品中目标物含量的RD小于或等于20%，定量数据可靠，其含量按2份案件样品的平均值计算。如果案件样品中目标物含量的RD大于20%，定量数据不可靠。应按7.2重新提取检验。气相色谱-质谱方法定量检出限为：甲草胺50.0ng/mL（S/N=30：1）、乙草胺150.0ng/mL（S/N=50：1）、异丙甲草胺50.0ng/mL（S/N=501）、丁草胺50.0ng/mL（S/N=50*1）、丙草胺50.0ng/mL(S/N=40:1)。
8.3相关资料
甲草胺等五种酰胺类除草剂的理化性质参见A.4。4
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附录A
（资料性附录）
五种除草剂的相关数据和图谱
五种除草剂的特征离子碎片见表A.1。表A.1五种除草剂的特征离子碎片除草剂
乙草胺
甲草胺
异丙甲草胺
丁草胺
丙草胺
五种除草剂的提取回收率见表A.2保留时间
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特征离子碎片
146.174.223.132.117
160、188、146、132、117
162、238.146
160.176.188、238、132、117
176.162.202.238.262.146.117
表A.22mL血添加五种除草剂的提取回收率和相对标准偏差（RSD%，n=3）添加量
μg/mL
乙草胺
甲草胺
五种除草剂的相关质谱图见图A.1图A.5。A.3
异丙甲草胺
130150
(mainlib) Acetamide, 2-chloro-N-(ethoxymethyl)-N-(2-ethyl-6-methylphenyl)-图A.1
乙草胺质谱图
丁草胺
丙草胺
iiKAoNniKAca
GA/T1332—2016
(mainlib) Alachlor
117132
甲草胺质谱图
103117131
224237
174188
(mainlib) Acetamide, 2-chloro-N-(2-ethyl-6-methylpheny)-N-(2-methoxy-1-methylethyl)-图A.3异丙甲草胺质谱图
(mainlib)Butachlor
270290此内容来自标准下载网
90110130150170190210
丁草胺质谱图
(mainlib)Pretilachlor
118132
150170
210230
图A.5丙草胺质谱图
A.4甲草胺等五种酰胺类除草剂的理化性质262
GA/T1332--2016
270290310
乙草胺，甲草胺，异丙甲草胺、丁草胺，内草胺为酰胺类除草剂。此类除草剂多数为土壤处理剂，几乎均能防除一年生禾本科杂草。使用此类除草剂后，幼苗矮化、畸形，单子叶作物心叶紧缩卷曲，不能正常展开，双子叶作物幼苗片状皱缩成杯状，中脉缩短，叶尖向内凹。此类除草剂均对人畜低毒，对眼和皮肤有刺激作用。无致癌，致畸，致突变性，对鱼毒性较大。此类除草剂使用广泛，常用于毁坏农田、鱼塘等投毒案件，也有由于意外事故、自杀等原因引起人，畜中毒的。因此，此类除草剂为一类很重要的刑事毒物。甲草胺（alachlor）纯品为乳色固体，熔点39.5C~41.5C，沸点100C/0.02mmHg，蒸气压2.9mPa（25C），密度1.133g/mL。25C下水中溶解度242mg/L，溶于丙酮、苯，乙醇、乙酸乙酯，稍溶于庚烷。本品在105℃下分解，对紫外光稳定，在强酸与碱性条件下水解。在土壤中的持留时间为42天～70天，通过微生物作用而损失。乙草胺（acetochlor）纯品为兰色至紫色油状物，蒸气压室温下可忽略不计。25C下水中溶解度223mg/L。稳定性：EC制剂稳定期两年以上（室温）。主要是因为土壤微生物所致而从土壤中消失。丙草胺（pretilachlor）纯品为无色液体，熔点小于一20C，沸点135℃C/0.001mmHg，密度1.07g/mL（20C），蒸气压0.133mPa。20℃下水中溶解度50mg/L，溶于苯，二氯甲烷、已烷、甲醇等大多数有机溶剂。稳定性：水解（20C)DT50（计算值）大于200天（pH=1～pH=9），14天（pH=13）；土壤中(DT5）20天～50天。
丁草胺（butachlor）纯品为淡黄色液体：熔点小于一5C：沸点156C（67Pa）：蒸气压0.6mPa（25℃）。24℃下水中溶解度23mg/L，溶于丙酮、苯、乙醇、乙酸乙酯、已烷。本品对紫外光稳定；在165C下分解。土壤中持留时间42天～70天，损失主要是微生物所致。对钢和铁有腐蚀性。异丙甲草胺（metolachlor）纯品为无色液体：沸点100C/0.001mmHg蒸气压1.7mPa（20℃）。20℃下水中溶解度530mg/L；易溶于苯，二氯甲烷，已烷、甲醇，1-辛醇。300C下稳定；20℃下不水解。
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中华人民共和国公共安全
行业标准
法庭科学血液中甲草胺等五种酰胺类除草剂气相色谱-质谱检验方法
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印张0.75字数16千字
2017年2月第一版
2017年2月第一次印刷
书号：155066·2-31097定价16.00元
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