【地方标准】 梨黑斑病菌的LAMP检测方法

ICS01.040.65 CCSB16 DB34 安徽省地 方 标准 DB34/T4198—2022 梨黑斑病菌的LAMP检测方法 Detection of Alternaria species involved in pear black spot using LAMP地方标准信息服务平台 2022-06-29发布 安徽省市场监督管理局 发布 2022-07-29实施 地方标准信息服务平台 前言 DB34/T4198—2022 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所提出。本文件由安徽省农业农村厅归口。本文件起草单位：安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所、巢湖市农机管理中心、安徽省农业科学院园艺研究所、怀远县农业技术推广中心。本文件主要起草人：杨雪、谷春艳、潘锐、翟承勋、徐会永、减吴昱、戚仁德、高正辉、齐永杰、王同岁。 地方标准信息服务平台 地方标准信息服务平台 1范围 梨黑斑病菌的LAMP检测方法 本文件规定了梨黑斑病菌的LAMP检测方法。本文件适用于梨黑斑病菌检测的组织和人员。2规范性引用文件 DB34/T4198—2022 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 分析实验室用水规格和试验方法GB/T6682 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 梨黑斑病pearblackspot 由链格孢类（Alternariaspp.）真菌引起的一种重要病害，已报道病原菌主要包括AlternariagaisenK.Nagan、A.alternata (Fr.)Keissler、A.tenuissima(Fr.)Wiltsh、A.infectoria、A.yaliinficiensR.G.Roberts和A.ventricosaR.G.Roberts。方法原理 根据梨黑斑病病原菌的ctb序列设计的特异性引物进行LAMP（Loop-mediatedisothermal唯信息服务平台 amplification，环介导等温扩增技术）检测作为判断梨黑斑病菌的依据。5 仪器设备 5.1高速离心机：转速<15000r/min5.2涡旋振荡器 5.3恒温金属浴 5.4光照培养箱：20℃~30℃ 超低温冰箱：-80℃ 5.5 5.6电泳仪 5.7凝胶成像仪 可调移液器：1-10μ，10μ-100μ，100μ-1000μ5.8 试剂和培养基 6 1