【国家标准】 脊尾白虾

ICS65.150
中华人民共和国国家标准
GB/T35896—2018
脊尾自虾
Ridge tail shrimp
2018-02-06发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
哈层童真
2018-09-01实施
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。GB/T35896—2018
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国水产标准化技术委员会海水养殖分技术委员会（SAC/TC156/SC2)归口。本标准起草单位：中国水产科学研究院黄海水产研究所。本标准主要起草人：李健、刘萍、李吉涛、段亚飞。1下载标准就来标准下载网
1范围
脊尾白虫
GB/T35896—2018
本标准给出了脊尾白虾（EropalaemoncarinicaudaHolthuis，1950）的学名与分类、主要外部形态特征、生长与繁殖特性、细胞遗传学特性、生化遗传学特性、分子遗传学特性、检测方法及判定规则。本标准适用于脊尾白虾的种质鉴定和检测。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T18654.2养殖鱼类种质检验第2部分：抽样方法GB/T19782中国对虾
SC/T1102
虾类性状测定
学名与分类
3.1学名
脊尾白虾（EropalaemoncurinicaudaHolthuis，1950)。3.2分类位置
甲壳纲（Crustacea），十足目（Decapoda），长臂虾科（Palaemonidae），白虾属（Eropalaemon）。4主要外部形态特征
4.1外部特征
脊尾白虾额角侧扁细长，上下缘均具锯齿。腹部第3节至第6节背面中央有一明显的纵脊。第二步足的腕节和指节长度约相等，但长于掌节。体色透明，微带蓝色或红色小斑点，腹部各节后缘颜色较深。雌雄异体，雄性第二腹肢肢内缘有一细长带的棒状突起，称雄性附肢，雌性具开放式纳精囊。抱卵期间雌虾第1～5腹节两侧各有蓝色圆斑。尾节末端尖细，呈刺状。脊尾白虾的外部形态见图1。1
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GB/T35896—2018
可数性状
脊尾白虾外部形态图
脊尾白虾形态图
额角齿式：额角齿数/下额角齿数为69/3～6。4.3
可量性状
b）脊尾白虾尾棘外部形态图
额角基部
3具鸡冠状隆起额角长度约为头胸甲的12倍倍4.3.2尾节两侧有2对微小的棘剂第一触角上鞭分为
5生长与繁殖特性
枝内侧枝短，为
腾甲长
脊尾白虾为中型虾类，成体体长cmm体长与体重之间的指敷关系方程W1026X10T
(r=0.995)
生物学最小型
性成熟最小个体体长4.4cm，抱卵个体最小体长4.9cm。5.2.2
繁殖期
当水温达12℃C～13C时，成熟亲虾即蜕壳、交配、产卵。雌虾在繁殖期内可以进行2次～3次产卵，再次产卵的时间间隔为产卵后30天左右。一般2次以上产卵后自然死亡。3月～11月自然海区都能捕到怀卵亲体。脊尾白虾养殖群体的繁殖盛期为4月～6月和8月～9月。5.2.3卵的特性
具抱卵特性，雌虾抱卵量一般在600粒/尾~1500粒/尾之间。卵径（0.5mm~0.7mm）×（0.7mm～0.9mm），椭圆形，粘在腹部游泳足上受精卵开始为桔黄色，逐渐变为桔红色至红棕色，最后变成灰黑色。
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6细胞遗传学特性
染色体数目为2n=90。
生化遗传学特性
肌肉中谷氨酸脱氢酶(GDH)电泳图谱见图2。Gdh1
图2脊尾白虾谷氨酸脱氢酶（GDH）电泳图谱8分子遗传学特性
对线粒体16SRNA基
，片段序列如下
距离小于2%
GB/T35896-2018
片股进行扩增和测序家得长应为509核荐酸序列种内个体间遗传GGCTGTGTGGTTTATTAGTATAE
IGTCTAGC
ITGACCGTGCA
AGGIAGCATAA
GGCTGGATAAAAGAGAAGCTGTCTT
DTTCAAGT
ACTGAGTTTTTAAAGGGOTGCGG
TTAATT
TGAAGO
TTGAA GAAC
TTAAGTGAAAAG
TAACTAAGGGOACGATAAGAOTATAAAACTTAATAAAAGGTTAAT
GTATTTAAAAGTTGTGAAATCTCTTTTATTTTGTTCCGCCGACATTGATCTATG
ATAAG TGTAACTGTC
TGATAATAAAATAGTTATCACTAIAACCTGATCCTTTTTTAGGGATAATAAGTATAAGTTACTTIAGGGAIAACAGCGTAATTTTTTCTGAGAGTT TTATCGAAGAAAC TAGTTGCGACCT
IAATAAAI
GTGTGGGTOTGTCGACCTTTAAAATTTT检测方法
抽样方法
按GB/T18654.2执行。
形态测量
按SC/T1102的规定执行。
9.3繁殖特性检测
CAIGCAGGTGTAGUCGCTTGCC
抱卵雌虾测量形态性状后，活体剥离腹部所抱受精卵，进行计数，测量30尾抱卵雌虾所抱受精卵数量后，取平均值，受精卵卵径采取解剖镜下目微尺测量，测量30尾个体，每尾个体测量50个，取平均值。9.4染色体的检测
按GB/T19782的规定执行。
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GB/T35896—2018
9.5同工酶检测
9.5.1样品制备
虾活休运到实验室，肌肉放入液氮中。取出样品，加人5倍体积的0.1mol/L磷酸缓冲液（PBS)后冰浴匀浆，4℃离心（15000r/min，10min），取上清液加人少量1%溴酚兰，再加人等体积的40%蔗糖溶液，一20℃保存待测。
9.5.2电泳
同工酶电泳采用不连续聚内烯酰胺凝胶垂直电泳。电泳在4℃冰箱中进行。电泳参数如下：凝胶浓度（T）：T浓缩股=3.6%（pH6.7），T分离胶=8.2%（pH8.9）：电压：Tris-甘氨酸（TG，PH8.3）系统，恒压230V；电泳时间4h。谷氨酸脱氢酶（GDH)染色液配方如附录A所示。9.6mtDNA16SrRNA序列分析
9.6.1DNA提取
每尾个体取约100mg腹部肌肉，剪碎组织，加人475μL组织匀浆缓冲液（10mmol/LTris-HCl，pH=8.0；50mmol/LEDTA，pH=8.0），充分混匀，依次加入终浓度为10%的SDS和20μg/mL的蛋白酶K，55℃裂解至澄清，用酚、酚：氯仿（1：1)和氯仿各抽提1次。用DNA定量仪测定样品DNA的浓度和纯度，1%琼脂糖凝胶电泳检测，全自动凝胶成像系统拍照，一20℃C保存备用。9.6.2线粒体16SrRNA基因片段的扩增引物:16S AR:5-CGCCTGTTTATCAAAAACAT-3',16SBR:5-CCGGTCTGAACTCAGAT-CACG-3
PCR反应条件：94C预变性2min，94℃变性45s，48C退火1min，72℃C延伸1min，35个循坏，72℃延伸5min。PCR反应总体积休系为25μL，10XPCRbuffer2.5uL，dNTPs0.2mmol/L，MgClz2mmol/L，Taq酶1U。引物各0.12μmol/L，模板DNA50ng~100ng。PCR扩增产物经1.0%琼脂糖凝胶检测，电泳缓冲液为1×TBE（pH8.0），电压为4V/cm，Genefinder染色，于凝胶成像系统下观察并拍照记录。9.6.3DNA序列测定
将PCR产物纯化后双向测序。
10判定规则
检测结果不符合第4章、第6章任意一条要求的，则判定为不合格项，有不合格项的样品为不合格样品。
-TKAoNrKAca
（规范性附录）
谷氨酸脱氢酶(GDH)染液配制方法谷氨酸脱氢酶（GDH)染液配制方法如表A.1所示。表A.1
谷氨酸脱氨酶
英文及缩写
Glutamate
谷氨酸脱氢酶(GDH)染液配制方法药品
Sodium Lglutamate
dehydrogenase,
0.5mol/L pH 7.0
1mol/LpH7.0
5mg/mL
5mg/mL
5mg/mL
GB/T35896—2018
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GB/T35896-2018
中华人
共和国
GB/T358962018
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开本880×12301/16印张0.75字数12千字2018年2月第一版
2018年2月第一次印刷
书号：155066-1-59411定价
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