【商检行业标准(SN)】 鱼鳃霉病检疫技术规范

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T2439—2010
鱼鳃霉病检疫技术规范
Protocol of quarantineforbranchiomycosis of fish2010-01-10发布
中华人民共和国
数码防
国家质量监督检验检疫总局
2010-07-16实施
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
鱼鳃霉病检疫技术规范
SN/T2439—2010
中国标准出版社出版
北京复兴门外三里河北街16号
邮政编码：100045
网址www.spc.net.cn
电话：6852394668517548
中国标准出版社秦皇岛印剧刷厂印剧.
开本880×12301/16印张0.5
字数9千字
2010年4月第一版
2010年4月第一次印刷
印数1—1600
书号：155066·2-20701
本标准的附录A为规范性附录，附录B为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。SN/T2439—2010
本标准起草单位：中华人民共和国湖南出人境检验检疫局、中华人民共和国北京出人境检验检疫局、中华人民共和国福建出人境检验检疫局。本标准主要起草人：唐连飞、张利峰、郑腾、朱中武、吴愈柏、江为民。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。1范围
鱼鳃霉病检疫技术规范
本标准规定了鱼鳃霉病的现场检疫、实验室检验和结果判定。本标准适用于鱼鳃霉病的检疫。2规范性引用文件
SN/T2439-—2010
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T18088出人境动物检疫采样
3器材和试剂
3.1器材
3.1.1小动物解剖器具。
3.1.2灭菌试管（供采集样品用）。3.1.3载玻片和盖玻片。
3.1.4培养皿。
3.1.5接种环或接种针。
3.2设备
3.2.1恒温箱（能控制温度在25℃30℃的全温恒温箱）。3.2.2普通显微镜。
3.3试剂
3.3.1沙保劳(Sabouraud)氏葡萄糖琼脂培养基(配方见附录A中第A.1章)或玉米粉琼脂培养基(配方见附录A中第A.2章)。
3.3.2乳酸苯酚溶液（配方见附录A中第A.3章)。4现场检疫
4.1临床检查
仔细检查全群鱼的健康状况，观察鱼是否有厌食、游动迟缓、鳃盖张开，鱼浮于水面而体表却无其他明显变化等异常表征。鱼鳃霉病的分布及症状参见附录B。4.2解剖检查
对在临床检查中发现有异常表征的鱼进行解剖检查，出现下列a)或(和)b)病变的，可怀疑为鱼鳃霉病：
鱼鳃黏液多，鱼鳃出血、淤血或缺血，出现红色或暗红色、灰色斑点或斑块，呈现花斑鳃；a)
b）鱼鳃坏死、腐烂脱落，出现鱼鳃缺损。5采样
5.1有临床症状的鱼的采样
对有临床症状的鱼，挑选临床症状明显的活鱼或濒临死亡的鱼，每一批次取10尾～20尾鱼的鱼鳃1
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作为样本。
5.2外表健康无临床症状的鱼的采样对外表健康无临床症状的鱼，按GB/T18088规定，采取鱼鳃组织作为样本，采样数量如下：a)
亲鱼、观赏鱼及鱼苗每批次采150尾；批量总数小于或等于250尾的，采23尾；b)
批量总数为251尾～500尾的，采25尾；批量总数为501尾～1000尾的，采26尾；批量总数为1001尾～5000尾的，采27尾：批量总数大于5000尾的，采30尾。实验室检验
显微镜检查
取小块疑似鳃霉病鱼鳃组织，在灭菌蒸馏水中漂洗，以除去淤泥和黏液。在载玻片上滴一滴蒸馏水，取少量鳃丝制作压片，镜检。若发现有霉菌菌丝、结合临床症状和病理变化即可确诊为鳃霉病。6.2鳃霉菌分离
取鳃组织用沙保劳氏葡萄
糖琼脂培养基或玉米粉琼服
莓菌分离培养。用灭菌镊子耳
7.1经6.1或6.2观察或分离到鳃霉菌的结合临床症状和病理变化确诊为鳃霉菌病。7.2现场检疫判为可疑的但6.1或6.2未观察或分离到鳃菌的确定为非鳃霉菌病。附录A
（规范性附录）
主要试剂的配制方法
A.1沙保劳(Sabouraud)氏葡萄糖琼脂培养基40g
葡萄糖
蛋白陈10g
琼脂粉18g~20g
蒸馏水1000mL
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将以上成分倒入烧杯或三角烧瓶内，先加少量蒸馏水加热溶解。待完全溶解后补足蒸馏水至所需要的总体积，并加人氟霉素至终浓度为50μg/mL～100μg/mL，用四层纱布过滤，按要求定量分装于小烧瓶或中试管内，塞以棉塞，再于棉塞外加包牛皮纸和油纸各一层，挂上标签，于121℃灭菌10min～15min后保存备用。
玉米粉琼脂
玉米粉
琼脂粉15g~18g
蒸馏水1000mL
将玉米粉加入蒸馏水中，搅匀，文火煮沸1h，纱布过滤，加琼脂后加热熔化，补足水量至1000mL。分装，121℃灭菌20min。
A.3乳酸苯酚溶液
乳酸（密度1.21kg/m）10g
甘油20g
蒸馏水10mL
将以上试剂溶解混匀。bZxz.net
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附录B
(资料性附录）
鱼鳃霉病
鱼鳃霉病(BranchiomycosisofFish)在全世界分布较广，美国、印度尼西亚、日本、以色列和欧洲等都有发生，在我国南方和北方（包括台湾省）均有散在性发生。每年5月～10月的夏秋季节（温度高于20℃时)多暴发流行，尤以5月～7月为甚，其流行与水质的恶化密切相关，鱼鳃霉病的病原为鱼鳃霉菌属霉菌，其生物学分类为真菌门、卵菌纲、水霉目、水霉科、锶霉菌属，菌丝无隔。寄生在鱼鳃弓和鳃小片的血管内的鳃链菌，其菌丝沿血管生长，不分枝（见图B.1）：寄生在鳃小片组织中的鳃霉菌菌丝分枝（图B.2)，菌丝充满鳃丝。鳃霉菌菌丝产生的孢子释放到水中或沉淀于底部腐质上，与鱼体接触后附着在鳃部发育成菌丝。图B.1
离培养，20×）菌丝无隔，不分枝图B.2寄生在小片组织中的鳃霉菌菌丝（分离培养，20×）菌丝无隔，分枝本病的临床表现和病理变化是鱼不摄食，游动迟缓，出现浮头、鲲盖张开；鳃上黏液增多，鳃瓣出现充血、出血和淤血。如果菌丝堵塞血管，鳃瓣失去正常鲜红色，呈粉红或苍白色。鳃因出血、淤血和缺血而呈现花斑状。病程进一步发展，鳃丝呈坏疽性崩解，坏死部位腐烂脱落，鱼鳃出现缺损。书号：155066·2-20701
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