【国家标准(GB)】 大豆种子产地检疫规程

本标准代替G12743—1851%大豆种了产地检疫规：CB 12743—2D03
GB1274319915大豆种子产地检疫鼠程\已热行「十余年，日前，大上的危险性有奔尘物种类已娩发尘了变化，赖换检接技术也有了没展和提商，原规程已不适应大豆生产发展的需要，将对原标准进行够订，修订后的标准增划了1995年新公的国内检疫对家一一大互疫病，该病也是我国1993年公布的一类进境拉物榨疫对象；向时，由丁大豆菌较病是上传病害，种了本身开不带菌病，因此参订后不再列为应检有害生物。有密生物的综合治型措施也做「相应的谢整，增切了一些新的技术内穿，本都厘的谢录B,附承亡为规范性帖录+陷录A为资料社附录。本标准由中华人民共利国农业部提出，本标难由农业部种植业管理司归口。本标负卖起草单位：全国农业巷术推广中心，亦北农业人学、迁宁省技保插检站.古林管植物检变站，黑江省拉保柏检站、农业部大豆种子质量监哲检验中心，黑龙江咨宽锦市植保站，本标准主要起草人：王福样，灵立蜂、文景芝，亲明、灵雨泉、杜张构、孙波、万振家、车标准承托全国业技术推广服务中心负责解释，本标难1991年肯次岁布，本次为第一次燃订，1范臣
大豆种子产地堰规程
CB 12743—2003
本标准规定了大豆种了产地的限定性有害生物种炎娃康种子生产，验，检度、签证等木标推烂用于实施大H种子产地检接肾到的物疫机构及繁育，牛产大豆神子的单位和个人。2术信和走义
下列术语和定义适用于本标非：2.1
因植物校疫的月的而单独普理的生产点。2.2
产地检疫
独物检液机构对植物及其产品（种出及其他露殖材料，下同>在原产地生产过程的全部工作，包指田间调查、本内检验、链发证一及监督生产单位做好选地，选种和疫情处型等工作。2.3
有生物
任何对范物或植物产品有未的扭物、动物或病原物的种、怀（品)系或生物型2.4
阻定性有害生物
一种枪游性有害生物或限定非检疫性有害生物，2.5
检安性有害生物
对受其成晚的地区其有浩在经许最要性，旭尚未在激地区发生，或已发生但分布不井进行盲方防治的有害生物。
限定非检疫性有需生物
-种非检疫栏自害生跑包它在供种慎的稍物中有在，危及这些植物的预期用途而产无法接受的经济影响，而疯人境内受到限制、2.7
健扇种子
批本标准所列尬验力法构教，符合本标准对限定性有告生物要求的大豆种户。3限定性有害生物
9，1检按性有告生物，
大豆.疫病PhyuhthmrwinanRaufm,&：Gerd葱丝广寓Cureutaspp.
3.2限定非检遮性有告牛物
大豆病毒病SraylbeanvirulisriusetPergnspora manschuuicutNeum,)Syd大豆花薯病
CB12743—2003
太H.东班病Cereopura sujiaHara3.3查单补充的其他检游对象，
4体种子生产
4.1繁育地选择
4.1.1紧育地语在排严录件良虾好、上填肥力业等的地块.升拼辆土，4.1、2策育地选择准续种精未谷类作物二车一年以上的地决无不标难所划的检疫性有安生按发牛4.1.3避免邻作走限定性有害牛物的寄士（如向奖和油菜等）：并保持10UⅡ内元大豆的辅离条件，4.1.4产地检疫甲报：种了产单位或个人应在播种前一月间当地柑物检痰机构中请产地检疫，并填写中报表（见表1)。
表1产增检壁申报表
申根号，
作物名称：
中扳单位农户》
种查电点
表系人：
冲拉染
拉物检换们均度百况
市核人：
加盗两源/
联系电话：
拉物控疫专用章
社1，本表一取，需致由年钱机关湖车，二致交申报单位在2，本表段医进季使川。
4.2种子健患标准
4.2.1原原种：不带本标剂所列的限定性有害失物，无斑较。地址：
种于素kg
限高·年作
4. 2. 2原种:尤疫每菌免效子种粒;需毒病,病率病发病要分肿低于3%和 0, 2%,染班斑病发病率,种子度驱适于3%，
4.2. 3一般良种;无疫毒菌、范丝子种粒黏避病、病奇病发病率要分别低于心%和0.5牙,灰班痴发病率、种子死收率低于5%。
4.3蛛种
4.3.1原原种自上一年无愿定性有存物的大豆用中大豆健株上采集，经检疫证明行合原原种睡患标年：
整良种采自上·绒符合标准的种了田。4.3.2阅种及
4.4防疫措施
4.4.1播种前用筛子、选种机等机缺或人工办送粒选，泓除饿人的杂断，2
4.4,2播种前用药剂拌种，防止大疫病或其他有弃生物危告。4.4.3在缺苗期，及时按除两苗杂单.4.4.在人豆花期以前，如果有蛎央发生，应对种子且及保与带施药灭好。花期道潮湿天气，用间点斑病病计率达到50火时，应距药酚将。4,4.5
GB12743—2003bzxz.net
4.4.6五展大点疫病用间监测，发现可疑球，应进行土观检微.一几确认文即销整病株并步行十填处理.
当用间发现药丝下即，少的随即拨嗪，害的连同大点-起销毁4.4.8对压块内的大豆残蛛及落叶等应及时清除、境毁，经免串伤带溉，并及时防治其他有告牛物，5检查、检险、签证
5.1检查以农业控部7为工，钟子部门、生产单位（农户)协助，5.2原原种逐行逐排月源，就种、一般定种求用供盘式抽样格验，格验区而积不仅人-133.3上m0.67hm以取G点.0.57hm~-6,6Yhm取8点.6.67m~13.33hr:取1点.13.a3lm.-33.33hm取15点，每点检验抹数不得少于200。33.35m以上可起期各方面终件的均句程度，另外则分检验区
5.3检查时期：在大实整个生育期则、要进行限定性有害生物发生情说的系统调益，在动南期、盛花期、敦粒成熟朔进行二次日问检查，工间症快详必附录A，将检将结果填入大豆种子日间检验记录表（见表 2)。
囊2大互种子田调检验记录表
查顺信
轻变致
頭丝子科（铁）数
需据病率(X)
京前病率/(%)
种了流驻率（托》
病毒种专率（K
阅查时期
范葬收效
盘期神了
产量/
5.3.1动劳期检查，格查有无限定性有告生物的可症状.如发现存则按4.1的有关防疫错范处项，5.3.2盛花期检查：桩查大H疫病和范丝子按阻4.4所有戈防疫猎谢及时处理。病毒病拉验以化期为主，俊期除补及良种卫旧间病林可作为该地块种传率承改的依带、原种及良钟州花期病典病殊剂血分别低于1必和%，规法病于代期挖套后，根提病情和当垃气象预报决定还否应进行到利防陷。5.3.3缺粒成照期检者检查大豆疫病并按照4.4结出的所疫措范及时处理。5.4出间不诊的限定性有害牛树样本匹实验实做室内检验（大豆疫病控测方法见附录.病毒病检测力法详见附录C，其他有市生物控常期方法进行》。按验结果职入大豆实内检整报告单（表
CE12743—2003
则度自技：
作物名：
性按力必
资业销采，
备祥：
抢验具<笠名)：
市接人：等名)，
5.5签证
囊3产地检短室内检验报告单
华木编导：
养物品种：
5.5.1凡检食,检验发现大点疫端潜不于签证。联样：划：
取样都位
核内性疫专用车
年月日
5.5.2病毒病检验以日间为主，必要时做室内检龄，荐病举病不符合本标准要求，不应签证，5.5.3发现蕊丝子轻严格处州合格，可以签证。5.5.4凡额对田间检验及实内检验后.收获的种了合催患种子标推的，发龄产地检竞合格证见表13.
表4产地检整合格证
有效制书：
检癌川期：
虾物芝称
种杭三积
种前教量
种板甲应
抢控结果
品种名称
用块效目
种击素
落发机关益章，
按疼员
兰，本证·式网联，第一房充生产单位货证换取植响验证书，带联留行检划关备全本证不作物检意证书使
5.5.5若检验没有发现检变性有守型物，但发现限查非格整性有害生物的，录下结果，不予签发产也检感合格训，谢运时，控控机构说量否符合种子调人地控疮要求确竞卡否签空错物检变证书。A,1大豆噬病
附录4
【密料性附最）
大互定有害生物的田间症状
G12743—2D03
苗期，幼苗出七萌治验侧，根及下胚轴受据，变软：真叶期被本动留擎部呈水洗状，叶片黄，严亚者枯荐而死。
成抹受害时，往往在茎基部发病、出现血啡色病实，并向上下产展，新省髓部变超，皮层和维管壳组织坏死、片变黄下亚付不脱落，根绑受考变盟摇色脱减缘不清晰，A.2泵丝子
茎规状，自径1，mm1.5mm，货色淡橙费色或费燥色，光帮无毛，在寄主学上间左烧，叫韩点状，喂质，花黄口位，多教赋生一起，早绣球形，种子为小型剪果，A.3大豆藕幕烟
A.3.1动苗沿叶川丰脉两侧出现褪绿块斑，扩大后叶片全部变黄、病叶背面生灰凹色减层，病味坏化叶皱菊·封后死亡
A.3.2成惨叶出上病敬牛，早医形或不规则形的黄绿色小斑点，叶草有东白他零层，呈呈芒求。发病重的，病斑可汇成更人将块，病叶干村，被害杆粒表面粘附有灰白色毒是。A.4大互灰斑病
否病斑色较深，些有黑灰色福层（即分生孢子梗和分生独子），干枯时破裂成孔，竹在片友面作圆形小班点，后扩人，中心变灰色或求格色，周缘成亦据色，围形，翻团形、多角形成不妮购觉，亮上病为鼠杉，秘色，有深悔色轮痴，茎部病斑呈纺锤形，将色·逐渐发展绕草一周，种子上的病班为根色圆形，边膝深裕色，轻病农产半好色木规则形小点。A.5大豆烯毒病
A.5.1大豆花叶烟毒病(Soybeen mosalc virus)A.5. 1.1病苗症状
大率病苗在第1~2友吓展川后部巨.品疗，气盘持在25℃以上时期酸追或延退显拉，病用单吗两测何下缺卷成等状，或衡一角形，单时这安叶司有妍孜、花时，或背面计辣层部环死，而引起片向下A, 5. 1. 2成株症装
花叶型：花叶、斑驳、黄斑、矮化、教罪。砖型：叶脉坏两，自蒸顶等牛长点尚下坏死，生可套曲A,5.E大豆矮化病毒病（Snyhean stuntvirne）羊以伍曲叶背肽部分坏死，叶片铅脉排响、复叶轻所爱·实叶脉退绿，成株期品顶枯状，与大口花病的预粘型相司。
A 5. 3其他病毒病
十不同病再引起。
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A, 5. 3. 1花生轻性斑驳病毒离(Pratut mild moule lrls)味工有黄斑，粘斑、脉坏死、斑或皱断。4,5.3.2首着花叶病毒病（Alfallamusuievirus）叶！上呈现些色斑驳或花吃.
附录B
（规范性附录）
大豆壁两实验声检验方法
B.1病踪葡分商和培养
B,1,1以摘组织分商
选择典病袜，划取满轻边练病避组织交齐处约5cm长的一载组织，效人滤网中，自来永冲流IGrain然后划成0.cm见力的小块，放人U.1%次摄酸钠水落浓中没池0.5min1rrin后敢出立即敢人无苗水巾冲浩3次~4放用选控性超养进行分离，充温2忙一下培齐3、在实体解剃境下现察,挑取疫毒菌丝,转移到胡尊下[CA)或利乃点(IA)培养基上常殖.B.1.2从主堰分商
将十壤风十，研碎，过筛（孔格2mm)，加薰愉水润况，使十增含水量达到或接近饱和，24℃~26它光照条件下培养4d--5d后，加适盘蒸确水设泡、世泡水尚高出十表不超过1.5cm，加感病大点品外5nm叶弹诱案6h~12勺，取出磷，光照条性下用菌水培养,1d--3d后镜检叶谦边缘有无泡子毫，若有，吸取酶动孢子盘浮疫，涂于选择性培养基上，24℃--26:思暗张件下培养4h--12h显微等下选择已期发的单个独厂，用接种换取合单个孢了的琼脂块转秘到选择性培并基上，25℃黑音条件下塑续培芥，1L~斤下后继续特血纯化。得单游动了晒标后，以形态和致病性作最终监定。B.2鉴别特征
大互疫年菌在P培养基上生长經慢，气生菌丝致密，幼静菌丝无隔争核，分技大多直角，分快片部稍有经缩菌丝老化时产生匾膜，并形成结节状或不规则膨大：影大萍球形，椭圈形太小不等，菌效体素r~\[\m。可以产牛厚脏地于该函在利马立赔养求和自来水可以形或大耳独子囊，孢套梗单生，无能生长，多数不分枝，范子寒顶生，倒柔形，顶部稍厚，筑突不明鼠，新泡子毫在日弛子套内以偿出方式产生：逆子囊不脱落，（23~89）（17-52）#m，均58pm×88um，游动拖子在饱子赛内形成，形，-端或两弗纯尖，具其两报毛，推朝前,长度为革糖的4倍-~5倍.利马H不易购得，川以用\片芸点脉脂养基\化替。该培养基用干或吸账24h,取吸账豆153g面00蒸潮水高长灵菌锅12煮2a双层布过，滤汁加水年1m如廉脂制成个2%琼脂的谱养基。在白芸豆琼脂培并基平板上·菌落逆缺整齐，菌些效席，气心尚丝白色，世格前消有环形半呼书（淀新利用带）满落工可产生大盘卵袍子。用多+或利马豆固体消养未培养，一尚后可产生大基闸孢一：旅邮壁薄，球形至扁球形，直径m~m般在m以下，器侧生形或阅形。跑了球送，径19m--3有光滑的内壁和外谈黄色，壁享1um~3m，日丁常说淤检醛也可伪下大豆需难菌卵孢F，为免泡滑可推据表.1行甄别，
卵狗子直经mT.1
塑型子形皮包
卵独子鲁生需位及等点
新种子衣面特证
B.3常用培养基及其配方
裹B、1整霉菌和霜睾菌卵孢子比较渡于
23.2--31.9
球形，黄均色
种皮甲面，分载
无需层
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活排面如拒子
23.2--29,心
1, 3-- 2, 5
球恶,激色
种立农面，囊中必堆
灰白色干粉状霉层
B.3.1胡剪琼脂培排基（CA），胡萝卜200g加200mL烹增水组织档解，过津计减中加20琼脂加热融化：热水补足至！ooumL，分装灭凿0min.H.3.2利马豆琼胎培荞基（1.A：利至豆2*加水泛胀后如人1(0(心L获馅水，高温灭菌30min划踏，2℃g琼脂将游液体积补充至100m高温灭菌30m.in。B.3.3在CA或L4培排出中悉加不向数剂即配胃点多护境托性培养求，常用的有以下儿种，R.3.3.1PARP选择性培荠基：在CA或LA基础培养基中添加压马露索(Pimaricin)lOmg/L,安比西tAmpicillin250mg/L.利通半（Rifampicin)10mg/I..氟销美苯(PCNn)50ng/TB.3.3.2PARPH选择性培养基在心A或1.A础培养基中添如匹马每末（Pimriin)10g/L安比西林【Arpieillin250g/l.，到福平（Rifu[iuin）ag/，五氯硝基举（PCNB>5umg/L，思毒灵（Hymxazon)somg/I.
B.3.3,3PBNC.选拆性培养草t在IA基石培养基中希加干氯硝基苯(PCNB>20 mg/L,苯莱特(Ben-l:1）g/1.硫酸新每素（NevyuinSulte新丝季）lJomg/L，点举素（Chloroampheicol>10mg/附录C
（规范性附录）
大豆病毒病种传率的检测技术
C, 1 检测范围
原原种邦原种，
C.2器材
C.2.1陷虫组室或网室。
2.2减沙,标石珍珠岩或消每土塘，选一种，c.2.3花盆或塑料果盘（长方形，约长45cm.宽33cm.高10cm.底有细孔)供种。C2.4消等锌体，
C2.5月镜
C2.6韩菜土或金刚妙（4日600日）.2.7指示作物菜品种“mwn*uebl\，供式效曲，要求在防其温家培，在单叶到一片友叶吃使片。
C.3控测步鼻
以生长试验为主，必要时进行指示拉物反底、土清反应新电镜观察。CB12743—2003
C.3.1生长试险
C.3.1.1取钟样，原原神按种项1/10.最多不超过500粒，原种取500粒，C.3,1.2播种，在防虫条件下播和和培有劲苗。种距约3cm--5ctl。即十上球规括的翊料果点中每行播19粒，10行，共播100格/盘：其他盘则以此类推.培温度不低于15，不高于:，以1%%：~23为宜，
C.3.1.3观赛记载，第一次于单叶展平时，下症状明显的病苗教，第二次于第一友叶乎展时，证！下症状明显的病苗数，拨除病苗和继苗，留下可题而未确定的苗：C.3.2换种措示植物
收叫题苗的叶片少许，在加有少许金刚砂【或准藻土》的消再研就中研成：孩状，常规接种莱“manroehean\。观赛指示植物按种的病斑成幼叶的系症状，判断叫斯苗尽书有病毒病.心3.3琼双扩数血消反应
平加中倾人熔化的培养基（NaN1%SX0,S%，优质综脂粉0.B%.蒸准水配制.凝面后打一或四孔，中类孔痛人抗血清，四周孔滴人待衡描棵的汁谦。年克叶片加1LPH7，2～7，4的链經神滤研磨，并加1m/%SLS泌处理，吸出汁液，加人平血孔中（测定球状病市时不用SDS处理）。平加盖，效25～37亡孵育14。样品孔与中孔（抗血清）之间出现淀线为阳性反应，C.3.4电锂观票
过取一小块（1mm×3mm)叶片放人滴2%~3%的磷码欧（PTA)额中，用玻誉掉辞叶组织，取滤滴放在被有相尔马膜的铜网上，存载30：取出吸云多余的获体，即可在心惜下观赛。如观寒CMV，时用乙酸边2%液染色
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