【国家标准(GB)】 实验动物 小鼠肺炎病毒检测方法

ICS65.020.30
中华人民共和国国家标准
GB/T 14926.24-2001
实验动物
微生物学检测方法（4）
Laboratory animalMicrobiological examination methods2001-08-29发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2002-05-01实施
GB/T14926.24—2001
小鼠肺炎病毒检验方法》的修订，别除了血凝抑制本标准是对GB/T14926.24-1994%实验动物试验检测方法，对个别文字作了改。本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起章单位，中国实验动物学会。本标推主婴起享人·用程等bZxz.net
本标准于1994年1月首次发布。
中华人民共和国国家标准
实验动物
小鼠肺炎病毒检测方法
Laboratory animal-Method for examination ofpneumonia virus of mice (PVM)本标准规定了小鼠肺炎病毒（PVM）的检测方法，试剂等。本标准适用于小鼠，大鼠，跑鼠，腺鼠PVM的检测。引用标准
GB/T14926-24—2001
代警GB/T14926-24—1994
下列标准所包含的条文，酒过在本标难中引用面构成为本标准的条文，本标准出版时，所承版本均为有效，所有标准都会被您订·使用本标准的各方应探讨使用下列标准量新版本的可能性，酶联免疫吸附试验
GB/T14926-50—2001
实验动物
GB/T14926.51—2001
GB/T14926.52—2001
实验动物
实验动物
免疫酶试验
免疫荧光试验
根据免疫学原理，采用PVM抗原检测小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠血清中PVM抗体。主要试剂和器材
4-1试剂：
4.1.1 ELISA抗原
4.1.1-1特异性抗原
PVM感染小鼠待发病后取肺胜，研声，制成10%悬减，3000r/min离心10min后取上清液感染BHK21细胞，吸附1.5~2h+加维持液培养10~14d，当细胞病变达+++时收获，冻融三次或超声被处理后，低速离心去除细胞碎片上清流再经期速声心嵌缩后制成ELISA抗原，4.1.1.2正常抗原
BHK21细胞冻酸破碎后，经低速离心去除细胞碎片而获得的上青藏。4.1.2抗原片
PVM感染BHK21细胞.培养5~7d.病变达++~+++时，酶细胞用胰酵消化分散，PBS洗涤，徐片，室温干燥后冷两酮圈定10min，一20C保存。4.1.3阳性血清
PVM免疫清清或SPF小风、大风、豚鼠、地鼠所获得的抗血清。4.1.4明性血清
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2001-08-29批准29
2002-05-01实施
SPF小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠血清。4.1.5酶结合物
GB/T14926-24—2001
辣根过氧化物醇标记单或免抗小鼠，大鼠，豚鼠、地鼠IgG抗体，用手检测相应动物血清抗体，辫根过氧化物标记葡毒球菌蛋白A(SPA)可用于小鼠，原鼠，地泉血清抗体的检查。4.1.6异氧酸荧光素标记羊或免抗小鼠，大鼠、豚鼠、地鼠IgG抗伴，用手检测相应动物血清抗体。4.2器材
42.1需标仅
4.2.2荧光显微镜。
4.2.3酱通显微镜。
4.2.437C培养箱或水番霜
5检测方法
采用ELISA方法（见GB/T14926.502001》进行血清学检测。51
采用IFA方法（见GB/T14926.52—2001）进行血清学检测。52
采用IEA方法（见GB/T14926-51—2001)进行血清学检测结巢判定
对阳性检测结果，选用同一种方法或另一种方法重试。如仍为阳性则拜为阳性。结果报告
提据判定结果，作出报告。
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