【国家标准(GB)】 实验动物 支原体检测方法

ICS 65.020.30
中华人民共和国国家标准
CB/T 14926. 8-2001
实验动物
微生物学检测方法（2）
Laboratory animalMicrobiological exaraination methods2001-08-29发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检独总局
2002-05-01实施
GB/T 14926.82001
车梯座量对GB/T11926.8—199实验动物醇支原件检验方法修订，
本标连章请了用于支原体种需定的生长押制试验，将盲传达数展至1次，增加了ELISA法作为礼步整则的造用方法。
本标连由中华入民共和国科学技术部出并妇口本标座起草单位，中国实验动物学会，车标鑫主要超草人，李红
本保生手9年工月支市
中华人民共和国国家标准
实验动物支原体检测方法
Lahoratory animalMethod for Examinatiam of Mycopfssms 慈围
本标准限定了实鞋动主的在测古法本际准适用于小程点
2引用标准
原件超
下列标准所回配文，通过在
为有效，所有标#魅订，使用
CE/T1192#42001实童号
GB/T1492C9
GB/T149H
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4主要读者和材料
47替通恒盟培养箱，
42实件显活抢
4.3蜗旋星为器
4.4毛细吸管，每份样晶1支
45恒温水路箱。
46高连离心机。
47超声鼓相国粉韩器，
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GB/T14926-8--2001
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单基和试剂
伴在车院体始养是和固停培养基上可#行病凰专墨发，敬物感用支原伴动自然后品清抗体本平轻低，
出请学方仅使为有步检测的选用4.9乙婚板，40孔.55孔哦96孔（可拆或不可拆3，用菌选净晚干，靠外光期射1h4.10微量加样器，客量5-50L和200叫5请者基和过剂
5.1正原体事证体培养基
中车人民和国国家质量蓝誉检验检康点易2001-08-29推通24
2002-05-01实范
5-2支厚性症体清养基
53支原怀固体培养基，
5-4Din染色夜
GB/T14926.82001
551支氧体培养：陈支原体、类节支原体和痛神经支真体标准株接种支原体接体培养基-36C握励培
5.5.2已明星爆由的墙养植接a000/min离心30mim·风定用Ps在相同录件下德&决，5.5.3上建证C淀用PBS县浮超声度打碍底，上清即ELISA抗原.市活音
韩靓让卓化物酶标记羊或免抗小大鼠IgG抗体，用手配调相应动物血调执停，蹄提过氧化物毒标记香雷球两蛋白A(SPA2.用于国小鼠自等5.7用性血清
支原体凯原更疫清带
5.8開性动清
无支愿体感染的
59其快试制带液门
61分离培养法
61.1型程房
6.1.2操作营器
6.1.2.1景样
GB/T14926-8—2001
主摩伟车营体核养基
caarrd
无可蒙蓝落
可最随器
壶照体准体培养基
满±七
支质体国体培养器
(36±15
Dieres ae
豆原体中流体塔养
无可蒙陶器
取包括电市至以下气管的5~10mm左右放人费有0.6~0.1mL障母是班的就中，用竭能湿与器制或洗脱液
6.1-2-2身离墙养
技GB14825.42—20014.18遵行接种后散C36士13C培养箱培推。6.12.3鉴宝
支原伴在半流体培养基中经3一7培养，在培养基的上革可形虎小的健量书，宝客状或沙粒肤国客。
b）吸致击可是菌费的半流体培养物约0.5mL转种支原体植体培养基，(36士13C增幕5-7d，吸取该培养物药在|mL提种于支原件固体培养基，用L捧亲均，潜表面于后指培养基放人保鲜费，2
密士心智靠
GB/T 14926.8--2001
“）支原体在固体培养基培养3一了后可形虚“敢蛋欢“或“惕研状“菌落。d）靠色，将有可疑菌落的固爆培养基平置进行is色，30mi收更长时间后支原体面落依越为生色单两上国周幕周空为无色）如初代事产体培养7d无可愿活出理，应吸取约1/10的搏代培养基挂种于相同培养基进行面传，经（36士1)C培养7d期仍无可量随落出现则判定为明性：对出理可量菌落者制族照b）.c>d)爆进行署定。
6.2高既免变吸附试险（ELISA)
621#就代
根探消定的量适工作添度，将抗享用包植液幕择，每孔100L.置&TC点再心进商。62-2用特练惠注5水，每家3min甲千，6-2-3加样
替检血清和盟性用性直清导别用疑造放1拍器释，孔100971选降固上6.2.4加醇结台物
用解样液格酶结台物需释而适当液度，每孔加100，31h，选练同上6.2.5加度物格液
每孔相人新配时的密特喜脑JL置37雅光显色10~15m62.6禁止匠应
每孔加人资止旗
测A值
在酵标位上，于4处读由各孔4道。6.2.8墙果划定
在阴性和阳性库清对照或立的需件下，进行结果具定。6.2.8.1同时待合下列2个新件者，到为阳性a特检直请降去靠202
b）择检血清的4值/用性对用直清的A值多2.1.62.8-2均不符膏上连8个条件者，判为闭性62.83促有1案荐合者，别为可整，需重试。62-84对阳性果需重试如为阳性则判亮阳性，幼果眼香
S活活来用生书质用单相同动牌啡动能进行至原停奔内请界·特合上连路养，心证有作出阳程报告·不格合者作出界理靓堂。量
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