【林业行业标准(LY)】 银杏叶提取物

ICS65-050
中华人民共和国林业行业标准
LY/T16992007
银查叶提取物
Fxtraet of Ginkgo biloba L.
2007-06-04发布
国家林业局
2007-10-01实施
本标准由中国林业科学研究院林产化学工业研究所提出并归口。本标准负责起草单位：中国林业科学研究院林产化学工业研究所。本标推主要起草人：王成章沈兆邦、郑光耀LY/T1699—2007
LY/T 1699--2007
中国是银否的源产地，又是止界上银的主产区，目前我国的银杏资源占全世界的70%。银杏叶提取物是以银杏叶为原料，采用适当的溶剂，提取和富集银否黄酮、内酯等有效成分的植物提取物产品，以银查叶提取物为原料制成的各种制剂，广泛应用于药物、保健品、食品添加剂、功能性饮料、化妆品等领域，很受消费者欢迎。为了保护原产地域产品，提高银杏叶提取物质量和出口创汇能力，特制定本标。
1范围
银香叶提取物
LY/T1699—2007
本标规定了银否叶提取物的术语，定义，技术要求，试验方法，检验规卿，标志，色装，贮存，运输没煤质期：
本标准适用丁以银杏叶为原料，经乙醇或水等溶剂加热国流、浓缩、离心、大孔树脂吸附和解附、溶荆脱银香酸及干燥舒工艺加工的银查叶提物，2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用面成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标推达成协议的各方研究是否而使用这些文件的最新版术。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标，GI3/T5009.3食品中水分的测定
GB/T 500S.4食品中灰分的测定
GBT5009.11食品中总确及无砷的测定G13/T5009.74食品添加剂中重金属限带试验GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。3.1
银香总黄酮醇苷
total flavunt glycousides frum GBE银杏叶提取物中所含的黄酮类化合物，用黄醇苷来表示，主要指皮素（quercetil)、山蔡素（kaempferul)和乒鼠季素（isorhamnetin）为母体的黄酮醇苷元的伟皮酰糖苷类总和，称为银查总黄酮，如图1。
kacmpferol:
quercatin：
isorhamnctins
R,=OCH
K2为单糖、一糖或多糖。 表示黄酮醇行。R2—H表示黄酮醇元。
图1银杏叶黄酮醇苷的化学结构
银杏总内酯total terpene lactone from GBE杏叶提敢物中总内酯是指二菇内酯ginkgulide和倍半蓓内醋 bilobalide的总和。二内酯包括银查内酯 A、银杏内酯B、银杏内酯C;倍半内酯主要指白果内酯,如图 2.1
LY/T 1699—2007
银杏酸ginkgolic acid
ginkgolide A: Rt-R-JI Ra=ollginkgolidcB：Rt-o Rg=ll Ra=lginkgplde C: R,=( Rg--(l! R,=([图2
银杏菇内酯的化学结构
bilobalide
6烷基水杨酸的衍生物，6位上的侧链+要是C3.0C1s16.C5,1.C.1,(2等烷烃化合物。银酸是指这些同系混合物的总称，姬图3R-Ci2-(Ct5)
R-Cla (Cia
4技术要求
4.1感官指标
R-Ci.ll(C)
R C...(C.)
R-C.l. (C...)
银查酸的化学结构
浅棕黄色至棕褐色的粉未，味微皆.4.2理化指标
理化指标应符合表！的规定。
理化指标
干燥失重/
总黄醇含禁/
皮与山蔡素峰而积比
总内酯碎量/%
总银杏酸含量/(mg/kg)
灼烧残渣/%
重金属(以Pbj/(mg/kg)
神(As)/(mg/kg)
5试验方法
优级品
一级品
10~500
合格品
综特别注明外，本标所用试剂均为分析纯，所用水应符合GB/T6682规定的三级水。5.1感官检验
自然光下日测，蘸点在舌头品尝。2
5.2干燥失重含量的测定
1.Y/r 1699—2007
按照GB/T5009.3的规定执行。测定时称取约1试样，精确到0.001乌，干燥温度为105℃+5%。干燥失重以质量分数X，订数值以%表示，在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不人于0.2%。取其算术平均值为测定绢果。
5.3总黄酮醇苷含量的测定
5.3.1原理
银杏叶提取物经酸水解后生成黄酮醇片儿，通过HPC分离和测定榭皮素、1茶素利异鼠李素三种苷元的含量，再根锯银杏黄酮醇桂皮酰基糖并的半均分广量是760，由三种苷元的含最和乘以平均转化因子2.51,即为银查总黄酮醇苷的含量5. 3.2试剂和溶液
浓盐酸（G13/T622）
1)甲醇(GB/T 683);
磷酸(GB/T1282)
甲醇-25%盐酸游液（4：1.体积分数）；中醇-0.5%磷酸溶液（5C：50.体积分数）：e)
f）榭皮素、茶素和异鼠李素标淮样品。5.3.3
仪器设备
高压液相色谱仪（HPLC），匹配紫外检测仪：b)
分析天子：感量0.0001%：
水浴锅；
超声波清洗器；
巅转发器
5.3. 4IIPLC 分析条件
色谱柱以十八烷化学键合固定相为填充剂，（>SC社（200m×4.6m）；ODSC预处理杜，紫外检测波长为360rm，空温，流动相为中醇一0.5%磷溶液，流速为【ml./mim，山蔡素与异鼠拿素的分离度要求人于1.5,
5.3.5标准样品标准曲线
分别称取皮素、山萘素和异鼠李素对照品，精确到 0.000 1 多,分别加入甲醇配成1mg/rnl.溶液再分别稀释成10mg/L～10cmg/1.的标准系列落液。榭皮索、山紫素和异鼠李案每个标准品溶液吸取10L，按5.3.4HPLC分析条件逊样，计算峰面积，分别由皮素、川茶索和异鼠李素峰面积和浓度关系，确定归方程，绘制皮素的标准曲线。本方法的最住线性范围为0.1g-1.。5.3.6供试样品的制备
在50ml.锥形瓶中称取25mg--35mg银叶提取物.精确到0.0001g，加甲醇-25%盐酸熔液25ml,在80℃~90℃水浴锅内水解4.5mi.迅速冷却牟室温，转移全5GmL的容最瓶中，用甲醇稀释至刻度.摇匀，微孔滤膜(0.45 μIn)过滤.即得供试样品。5. 3. 7HPLC 测试
取1auL供试样品，按5.3.4HPLC分析条件操作，进行IPLC测定。根据榭皮素，山禁素和异鼠李素标准曲线，分别计算榭皮素、山萘素和异鼠牛素三种黄酮醇百元的含量。5.3.8总黄酮醇苷元含量计算
总黄酮醇比元含量按式（1)和式（2)计算： -××100
LY/T 1699--2007
式中：
分别对励于橱皮素蔡素和异鼠李素三种黄酮醇荠元的含量（1一12、3），次—-分别由榭皮素、山素素和异鼠李素标准曲线查山供试样品中榭皮素、山蔡素和异鼠李素三种黄酮醇苷元的浓度(i=1.2、3).单位为毫克每毫升(tmg/tnL）；供试样品溶液体积，单位为毫升(mL)V
样品的质量，单位为毫克（mg）X, - (C +C,+C)×2.51
式中：
X2—一供试样品中总黄酮醇苷的含量，%；(1-—榭皮素黄酮醇皆元的含量,%;C2-—山蔡素黄酮醇苷元的含量,%;C.异鼠李素黄酮醇苷元的含量，%。5.3.9精密度的测定
用配制好的皮素、山禁素和异鼠李素标准样品，重复测试5，其R岛门值应小于3%。5.3.10重复性试验
取同一批次银叶提取物，行测试5次，其RSI）值应小于5%。5. 4榭皮素与山素峰面积比
对各供试样品，按5. 3. 4 HPT.C分析条件操作,计算皮素，山萘素和异鼠李素的峰面积，其中榭皮索和山蔡素的峰面积比接式（3）算：A
式中：
-供试样品HPI.C巾擀皮素和山萘素的峰面积比值；At
供试样品HPLC中榭皮素峰面积；供试样品HPLC中山蔡索峰面积。A,--
5.5总菇内酯含量的测定
5.5.1原理
银杏内酯具有不间的折光系数，采用示差检测器，外标法楚最，分析菇内酯含量。5.5.2试剂和溶液
甲醇(GB/T683)；
甲醇-水溶液（35：65，体积分数）；乙酸乙酯(GB/T 12589);
浓盐酸(GB/T622)；
酸性氧化铝：80目～100；
f）GA,GB,GC、BB标准对照样品。5.5. 3
仪器设备
高压液相色谱仪(HPI.C),匹配示差检测仪;b)
10进梯器；
分析天平：感量0.0001只；
d）水浴锅；
超声波清洗器；
f)ODS C1色谱柱(5,0 μtm,200 mmX4. G mm);g)
旋转蒸发器。
.-..-.-( 3 )
5.5. 4HPLC 分析条件
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色谱柱以十八烷基化学键合固定相为填充剂,即sla柱;示差器检测,Range 8;流动相为甲醇-水溶液；流速为1mL/min,柱温35℃，5.5.5标准样品溶液的制备
分别称取白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯13和银杏内酯C标准样品适量,精确到 0.0001多，分别加甲醇制成 1 mg/mL的标准溶液。再分别稀释成 100 μg/ml-~1 000 μg/mL的标准系列溶液。本方法的最佳线性范围为1μg～10g。5.5.6标准样品标准曲线
分别吸取上述白果内酷、银否内酷A,银否内酯B和银杏内C标准样品溶液10μL进样，每个进样量平行定3饮，记录巧果内霏、银柔内酯A，银香内醋B和银内酯标谁样品的峰面积的华均值.计算峰面积对浓度的回归方程.分别绘制向果内酯、银香内酯A、银香内酯B和银香内酯C标准样品标准曲线。本方法的最佳线性范围为1以g～10 g。5.5.7供试样品的制备
取 -根带活塞阀的玻璃柱(1 cm×30 cm)，下端用少许脱脂棉衬垫：半开活塞阀。称取 5.C只已活化的酸性氧化铝粉，放入50mL的小烧杯,如人15mL甲醇,边搅拌边加人层析柱内：再用15mL甲醇将烧杯内残留的氧化铝粉转移到层析柱，待甲醇液面接近氧化铅上层时，关闭活塞阀，备用，称取银杏叶提取物供试样品 0.15 g,精确到0.001g-用 5mL甲醇溶解,转移到酸性氧化铅层析杆进行层析，再用30mL甲醇洗脱，收集全部的洗脱液,50℃下旋转真空浓缩至干后，残渣用甲醇溶解并转移至5 mL容量瓶中，加甲醇牟刻度，勾，微孔滤膜(0.45μIm)过滤.制成供试样品溶液，5. 5. 8HPLC测试
用10 μL微量进样器,取5 μL供试样品溶液，注人 HFLC液相色谱仪，根据5.5.6 标准样品标推函线,分别计算白果内酯、银查内酯A、银查内酯H和银查内酯（的含量。5.5.9总内酯含量计算
总帖内醋含量按式(4)和式(5)计算：G, =ex×100
式中：
分别对应于白果内酯、银杏内酯 A,银杏内酯B和银杏内酯C的含量(i=1,2,3、4),%P
分别由果内酯、银杏内酯A银杏内酯B和银杏内酯C标准曲线计算出供试样品小白果内酯,银杏内酯A,银杏内酯B和银杏内酯C的浓度(j=1、2,3、4),单位为毫克每磨升(mg/ml.)：V
供试样品溶液体积，单位为毫升（mL)；m2——样品的质量，单位为毫克（mg）。X4=G 1G 1 G. 1 G
式中：
X,—供试样品中总内酯的含量，%；G—桦品中白果内酯的含量，%；G
-样品中银杏内酯A的含量，%；
样品中银查内酯B的含量，不；
一样品中银查内酯C的含，%。
5.5.10精确度的测定
.--( 5
用配制好的上述白果内酷、银杏内酯A，银杏内酷B和银否内酯C标准样品溶被，重复5饮测试，其RSD值应小于3%。
5.5.11重复性试验
取同--批次银查叶提取物，平行测试5次，其RSD值应小于5%。5
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5.6总银杏酸含的测定此内容来自标准下载网
5.6.1原理
银否酸侧链主要为CC和（1银杏酸，选择其中之一（C）作为银香酸的标准品，用HPLC/TV定量检测。
5.6.2试剂和溶液
甲醇(GB/F 683);
冰醋酸(GB/T 676—1990):
e）醇-1%醋酸溶液（90：10，体积分数）；d）石油醚(30℃～60℃,GB/T15894)；e)
C银查酸标准样品和C131nC1和C银香酸混合标雅品n5.6.3仪器设备
分析天平：感量0.0001g
水浴锅；
超波清洗器；
旋转蒸发：
0DSC色谱柱(5.0m.200mm×4.Gmm）：e）
F）高压液相色谱仪（HPLC),匹配紫外检测仪。5.6.4HILC分析条件
色谱柱以十八烷基化学键合固定机为填充剂，即OT)SC1e柱；OSCis预处理柱；紫外检测波长310 nml,流动相为甲醇-1%冰醋酸溶液，流速为 1 ml./min。5. 6.5 对照品标准溶液的制备
称取C：银否酸标准样品适量，精确到0.0001多.加甲醇制成5Pg/mL的溶液，作为标准样品溶液，男取总银查酸标准样品适量，加甲醇制成每1m1.含100的溶液，作为定性用对照溶液。5.6.6标准样品标准曲线
分别吸取C+银杏酸标推样品标准溶液（5g/mL）1μL、5μL.10ul，15μL20μL，每个进样量平行测定3次，计算其峰面积的平均值，由峰面私对浓度绘制C1.。银杏酸标准样品标准曲线，计算其回归方程：本方法的最佳线性范围为10ng-~100ng。5.6.7供试样品的制备
称取银叶提取物10，精确到0.01，置于具塞锥形瓶中，加人50ml名油醛（30℃～60℃）.m热回流2h，过滤，重复提取一次，合并两次提取滤液，挥于石油醚，残渣加适甲醇溶解，并转移至5ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇勾，微孔滤膜（0.45Hm)过滤，制成供试样品溶液，5. 6. 8HPLC 测试
吸取[0uL.供试样品溶液，按5.6.4HPLC分析条件进样，出IIFLC中Cit5、Ci5.1和Ci1711银杏酸峰面积总和，根据5.6.6标准样品标准曲线，计算供试样品中总银杏酸的含量。5. 6. 9总银查酸含量计算
总银否酸含量按式(6)计算：
式中：
Xe=exV,
供试样品中总银查酸的含鼠，单位为毫克每干克(ng/kg)；X
P-一出C5.Cs.和C银杏酸峰面积总和，根据5.6.6标准样品标准曲线回归方程，计算供试样品中总银查酸的浓度，单位为纳克每微升（ng/uL)；V.-.样品定容体积.单位为毫升（mI.)：n
样品的质量，单位为克（g）。
5.6.10精确度的测定
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吸C13银杏酸标准样品标准溶液（5！g/mL),重复5饮测试,其RSI)值应小于3%。5.6. 11重复性试验
取同一批欲银查叶提取物.平行测试5欲.其RSD值应小于5%。5.7灼烧残留的测定
按照 GB/T 5009.4的规定执行。5.8重金属的测定
按照GB/T5009.74的规定执行。
5.9砷的测定
按照GB/T5009.11的规定执行。
6检验规则
6. 1检验分类
产品检验分出厂检验和型式检验。6.2检验项目
6.2.1出」检验项目为感官指标、干燥失重，总黄酮醇苷，6.2.2举式检验应包括4.1~4.2所有项目。有下列情说之时，亦应进行型式检验：a）原料，工艺有较人变化，可能影响产品质量时；h）正常生产每年进行1次；
停产3个月以上，恢复生产时；
d）国家质量监督机构进行抽查时。6.3组批与抽样规则
在规定时间内，投料生产的产品组成一个批次。在同一-批次产品中，随机从3个以上的包装单位中各抽取2008，混合均勾后，取其中的100作试样。6.4判定规则
6.4.1每批产品应经生产单位质量检验部门按本标准检验，检验合格并签发合格证书底方可出厂。6.4.2产品的级别是根据各项技术指标断定。只要产品技术指标有项不符，则用低级指标判定，有至完全符合。只要有一项低丁合格品指标，则判为不合格品。6.4.3试验结果如有技术指标不符合要求时，应重新在两倍样件中取样，重新检验不合格指标，如仍不符合要求时，则按重新检验指标所属级别，作为该产品的等级。7标志，包装、贮存和运输
7. 1标志
包装F标明产品名称、标准号、生产日期或批号、保质期、净含量、生产厂名、厂址。7.2包装
产品内包装材料应符合食品卫生要求，外包装应保证运输和贮存安全。7.3购存
产品应贮存在阴凉、通风、干蝶、清洁的室内：严禁与有毒、有害、有异味的物品混贮。7.4运输
运输儿具应清洁卫生，防晒、淋、受潮，严禁与有毒、有害、有异味的物品混运。8保质期
在.F.述贮运条件下，产品保质期为24个月。E
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中华人民共和国环业
行业标
银查叶提取物
LY/T 1639—2007
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印张0.75字数17千学
并本 880×1230 1/16
2007年12月第一版
2007年12月第一次印刷
书号：155056：2-18320定价14.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究
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2007—6691
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