【地方标准】 禽肉肌纤维特性的测定石蜡切片法

ICS65.020.30 B40 备案号： 江苏省地方标准 DB32/T 1824—2011 禽肉肌纤维特性的测定 石蜡切片法 Determination of poultry muscle fiber characteristic Paraffin section method 2011-06-15发布 2011-08-15实施 江苏省质量技术监督局发布 前言 本标准按GB/T1.1-2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构与编写》的规定编写。 本标准由江苏省家禽科学研究所提出。 起草单位：江苏省家禽科学研究所、农业部家禽品质监督检验测试中心（扬州）、扬州翔龙禽业发展有限公司。 主要起草人：唐修君、高玉时、王克华、葛庆联、陆俊贤、施祖灏、张小燕、蒲俊华。 1 范围 本标准规定了采用石蜡切片法测定禽肉肌纤维特性的术语和定义、试剂与配制、仪器与设备、样品处理、切片制作、读片与计算、数据记录及允许差。 本标准适用于测定禽类肌纤维密度、直径、间距、肌束间距以及肌大束间距。 2 规范性引用文件 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。 3 术语和定义 3.1 肌纤维密度（Muscle fiber density） 同一肌束内单位面积肌纤维根数。 3.2 肌纤维直径（Muscle fiber diameter） 肌纤维长径与短径的几何平均数。 3.3 肌纤维间距（Muscle fiber gap） 同一肌束内相邻肌纤维之间的垂直距离。 3.4 肌束间距（Muscle bundle gap） 同一肌大束内相邻肌束之间的垂直距离。 3.5 肌大束间距（Distance between muscle bundles） 相邻肌大束之间的垂直距离。 4 试剂与配制 除特殊注明外，本方法所用试剂均为分析纯，用水符合GB/T 6682一级水规定。 4.1 4%甲醛溶液：1体积甲醛与9体积水混匀。 4.2 无水乙醇。 4.3 酒精梯度溶液： 75%酒精：7.5体积无水乙醇与2.5体积水混匀； 85%酒精：8.5体积无水乙醇与1.5体积水混匀； 95%酒精：9.5体积无水乙醇与0.5体积水混匀。 4.4 二甲苯。 4.5 石蜡：65℃反复提炼至蜡色泛黄可用。 4.6 苏木素。 4.7 1%盐酸酒精：1体积盐酸与99体积无水乙醇混匀。 4.8 0.5%伊红酒精：0.5g伊红溶于100mL无水乙醇。 4.9 中性树脂。 5 仪器和设备 5.1 组织切片机（切片厚度5μm～1000μm）。 5.2 烘箱（精度±1℃）。 5.3 恒温水浴锅（精度±1℃）。 5.4 包埋框。 5.5 镊子（使用前60℃预热）。 5.6 载玻片与盖玻片（经清洗、酒精处理后备用）。 5.7 光学显微镜（10×4至10×40倍）。 6 样品处理 6.1 取样与固定 家禽宰杀放血后30min内沿肌纤维方向取样。胸肌取胸大肌前端1/3、距龙骨2cm处；腿肌取大腿肌中部、距股骨1cm处。样品约2cm×1cm×1cm，去除筋膜脂肪后置于4%甲醛中固定10h，再修块后继续固定12h。 6.2 洗涤 在流动自来水中浸泡冲洗10h～15h。 6.3 脱水 采用梯度酒精脱水（75%、85%、95%、无水乙醇等），各步骤2h～4h或2h～3h不等。 6.4 透明 置于二甲苯中浸泡10min～15min，至组织半透明或透明。 6.5 浸蜡与换蜡 6.5.1 浸蜡：60℃石蜡中浸泡2h。 6.5.2 换蜡：更换新蜡再浸泡约2h。 6.6 包埋与修块 将组织块置入包埋框中，使肌纤维长轴与切面垂直，待石蜡凝固后完成包埋。