【地方标准】 实验动物 SPF鸭遗传质量控制规范

DB23/T 3871—2024
ICS 65.020.30
CCS B 44

黑龙江省地方标准
DB23/T 3871—2024
SPF鸭遗传质量控制规范

2024-08-30 发布 2024-09-29 实施
黑龙江省市场监督管理局 发布

前言

本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由黑龙江省科学技术厅提出并归口。
本文件起草单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所。
本文件主要起草人：高彩霞、夏长友、王伟、于海波、李昌文、张贺、陈洪岩、杨鸣发。

1 范围
本文件规定了SPF鸭遗传质量控制的形态外观检查、封闭群的命名、繁殖方法和遗传质量监测。
本文件适用于SPF鸭封闭群的遗传质量控制。

2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 14923—2022 实验动物 遗传质量控制
GB/Z 34792 实验动物引种技术规程
NY/T 1673—2008 畜禽微卫星DNA遗传多样性检测技术规程
DB23/T XXXX 实验动物 SPF鸭饲养繁育规范

3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
封闭群 outbred strain
不引进外部动物、在群体内随机选择种动物进行繁殖，以维持有限杂合度的实验动物种群。
[来源：GB 14923—2022, 3.1]

4 形态外观检查
（注：原文此处仅有标题，具体检查标准通常参照品种特征或引用标准，原文未提供具体细则，保留标题。）

5 封闭群的命名
封闭群的命名应按照GB 14923—2022中4.2.2规定执行。

6 繁殖方法
6.1 原则
封闭繁殖，保持SPF鸭的遗传异质性及基因多态性，避免近交系数随繁殖代数增加而过快上升。
6.2 引种
作为繁殖用原种的封闭群应三代以内无共同亲代，并符合GB/Z 34792对封闭群动物引种的技术要求。SPF鸭引种应引入SPF鸭种蛋，种蛋数量不少于1000枚。
6.3 繁殖
SPF鸭的饲养繁育按照DB23/T XXXX规定执行，交配方法按照GB 14923规定执行。

7 遗传质量监测
7.1 遗传质量要求
7.1.1 形态外观应符合品种特征。
7.1.2 应有完整的遗传背景资料。
7.1.3 遗传谱系和记录卡内容清楚完整。
7.2 遗传检测方法
采用微卫星DNA标记检测方法，按照NY/T 1673—2008中5的规定执行。SPF鸭封闭群微卫星DNA标记位点按照附录A规定选择。
7.3 检测频率
每世代每年至少检测1次。
7.4 抽样
7.4.1 从每个种群中随机抽取非同胞成年鸭，采集血液或其他组织。
7.4.2 种群数量小于100羽的群体，抽样不少于15羽；大于等于100羽的群体，抽样不少于30羽。抽样应雌雄各半。
7.5 结果判定
数据统计分析与判定按照NY/T 1673—2008中6的规定执行。SPF鸭封闭群遗传质量采用平均遗传杂合度进行评价，当群体平均遗传杂合度在0.5以上时，该群体判为合格，否则判为不合格。

附录A
（规范性）
SPF鸭封闭群微卫星DNA标记位点

SPF鸭封闭群遗传质量的微卫星DNA标记位点为26个，相关信息应符合表A.1规定。

表A.1 SPF鸭封闭群微卫星DNA标记位点

位点: APL2
引物序列（5'～3'）: GATTCAACCTTAGCTATCAGTCTCC / CGCTCTTGGCAAATGTCC
退火温度(℃): 58.5
最大等位基因数: 7
等位基因分布范围(bp): 115~125

位点: APL579
引物序列（5'～3'）: ATTAGAGCAGGAGTTAGGAGAC / GCAAGAAGTGGCTTTTTTC
退火温度(℃): 55
最大等位基因数: 8
等位基因分布范围(bp): 118~227

位点: APH09
引物序列（5'～3'）: GGATGTTGCCCCACATATTT / TTGCCTTGTTTATGAGCCATTA
退火温度(℃): 58
最大等位基因数: 2
等位基因分布范围(bp): 93~188

位点: APH11
引物序列（5'～3'）: GGACCTCAGGAAAATCAGTGTA / GCAGGCAGAGCAGGAAATA
退火温度(℃): 58.5
最大等位基因数: 3
等位基因分布范围(bp): 183~185

位点: APH18
引物序列（5'～3'）: TTCTGGCCTGATAGGTATGAG / GAATTGGGTGGTTCATACTGT
退火温度(℃): 58
最大等位基因数: 9
等位基因分布范围(bp): 179~324

位点: AY258
引物序列（5'～3'）: ATGTCTGAGTCCTCGGAGC / ACAATAGATTCCAGATGCTGAA
退火温度(℃): 58.1
最大等位基因数: 11
等位基因分布范围(bp): 90~161

位点: AY264
引物序列（5'～3'）: GCAGACTTTTACTTATGACTC / CTTAGCCCAGTGAAGCATG
退火温度(℃): 58.1
最大等位基因数: 3
等位基因分布范围(bp): 112~328

位点: AY314
引物序列（5'～3'）: CTCATTCCAATTCCTCTGTA / CAGCATTATTATTTCAGAAGG
退火温度(℃): 50.3
最大等位基因数: 2
等位基因分布范围(bp): 135~250

位点: CAUD001
引物序列（5'～3'）: ACAGETTCAGCACACTTAGA / GCAGAAAGTCTATTAAGGAAG
退火温度(℃): 55.5
最大等位基因数: 3
等位基因分布范围(bp): 234~390

位点: CAUD002
引物序列（5'～3'）: CTTCGGTGCCTGTCTTAGE / AGCTGCCTGGAGAAGGTCT
退火温度(℃): 60.8
最大等位基因数: 3
等位基因分布范围(bp): 175~231

位点: CAUDO004
引物序列（5'～3'）: TCCACTTGGTAGACCTTGAG / TGGGATTCAGTGAGAAGCCT
退火温度(℃): 60.8
最大等位基因数: 8
等位基因分布范围(bp): 162~290

位点: CAUD005
引物序列（5'～3'）: CTGGGTTTGGTGGAGCATAA / TACTGGCTGCTTCATTGCTG
退火温度(℃): 60.8
最大等位基因数: 6
等位基因分布范围(bp): 180~300

位点: CAUD006
引物序列（5'～3'）: ATGGTTCTCTGTAGGCAATC / TTCTGCTTGGGCTCTTGGA
退火温度(℃): 63.5
最大等位基因数: 9
等位基因分布范围(bp): 183~248

位点: CAUD007
引物序列（5'～3'）: ACTTCTCTTGTAGGCATGTCA / CACCTGTTGCTCCTGCTGT
退火温度(℃): 60.8
最大等位基因数: 3
等位基因分布范围(bp): 100~208

位点: CAUD010
引物序列（5'～3'）: GGATGTGTTTTTCATTATTGAT / AGAGGCATAAATACTCAGTG
退火温度(℃): 50.3
最大等位基因数: 3
等位基因分布范围(bp): 180~300