【地方标准】 粮食中串珠镰刀菌的PCR检测

粮食中串珠镰刀菌的PCR检测 DB22/T1820—2013 1 范围 本标准规定了粮食中串珠镰刀菌的PCR检测方法。适用于粮食中串珠镰刀菌的快速筛选检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB4789.15 食品微生物学检验——霉菌和酵母计数 GB/T4789.16 食品卫生微生物学检验——常见产毒霉菌的鉴定 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB19489 实验室生物安全通用要求 WS/T230 临床诊断中聚合酶链式反应（PCR）技术的应用 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 串珠镰刀菌（Fusarium moniliform） 串珠镰刀菌是一种重要的农作物病原真菌，能引起禾本科作物的根腐、茎腐和穗腐，是玉米青枯病和穗腐病的主要病原真菌之一。 3.2 聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR） 聚合酶链式反应是一种分子生物学技术，通过高温变性使模板DNA变为单链，经过多次变性、退火和延伸循环，使用DNA聚合酶和特定引物使目标DNA片段快速扩增。 4 试剂和材料 除特别说明外，所用试剂为分析纯或生化试剂。 4.1 水：应符合GB/T6682中一级水的规格。 4.2 马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基（Potato Dextrose Agar，PDA）：按GB4789.15规定。 4.3 CTAB缓冲液：55 mmol/L CTAB，1400 mmol/L 氯化钠，20 mmol/L EDTA，100 mmol/L Tris，用10%盐酸（HCl）调pH至8.0，121℃，20分钟高压灭菌，储存于2℃~8℃。