【地方标准】 向日葵黄萎病田间抗性鉴定技术规程

DB15/T2445—2021
向日葵黄萎病田间抗性鉴定技术规程
Technical code of practice for resistant identification to sunflower Verticillium wilt in field

前言
本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
本文件由内蒙古自治区农牧厅提出。本文件由内蒙古自治区农业标准化技术委员会（SAM/TC20）归口。本文件起草单位：内蒙古农业大学、内蒙古自治区科学技术战略研究中心。本文件主要起草人：周洪友、王东、张键、赵君、孟焕文、张笑宇、乔旭。

1 范围
本文件规定了向日葵黄萎病抗性鉴定的前期准备、鉴定程序、结果的计算、黄萎病抗性评价等技术要求。
本文件适用于内蒙古自治区向日葵产区。

2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 4407.2 经济作物种子 第2部分：油料类

3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1 向日葵黄萎病 (sunflower Verticillium wilt)：由大丽轮枝孢菌引起的一种土传病害。田间的症状多从植株下层叶片显症，叶尖叶肉部分呈现褪绿、黄化的症状。随后，病部沿叶内的脉间组织发展导致整个叶片的叶肉组织褪绿，变褐，干枯。发病重的植株下部叶片全部枯死，中位叶片呈斑驳状。剖开病茎观察，可见茎部的维管束变褐。

4 前期准备
4.1 病原菌的选择与培养
4.1.1 病原菌的选择
根据所鉴定品种推广应用区域选择能代表该区域病原菌致病力水平的优势菌系。
4.1.2 病原菌的培养
在超净台上，将分离纯化的向日葵黄萎病菌，从PDA平板上的菌落边缘挑取直径 5mm 的新鲜菌块，接种到查比克液体培养基（NaNO3：2.0g；K2HPO4：1.0g；KCl：0.5g；MgSO4·7H2O：0.50g；FeSO4：0.01g；蔗糖：30.0g；用水定容至1000mL）中，置于25℃下，150r/min，黑暗培养6d备用。制作麦麸培养基，加入适量的水，装入三角瓶，0.1MPa，高压湿热灭菌30min，冷却到室温备用；吸取上述液体培养的向日葵黄萎病菌菌液15mL转接至装有麦麸沙粒培养基的三角瓶中，随后放入到25℃培养箱中静置培养7d，待黄萎病菌的菌丝布满后，将培养物掏出，自然条件下风干备用。