【地方标准】 间接ELISA方法检测羊溶血性曼氏杆菌抗体

DB15/T2741—2022 间接ELISA方法检测羊溶血性曼氏杆菌抗体 (Indirect ELISA for detection of antibody of sheep Mannheimia haemolytica)
发布日期：2022-07-29
实施日期：2022-08-29

前言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由内蒙古自治区农牧业科学院提出。本文件由内蒙古畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC19）归口。本文件主要起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院。本文件主要起草人：张月梅、赵世华、宋越、白帆、王娜、戴伶俐、张帆、杨斌、刘威。

1 范围
本文件规定了应用间接ELISA检测羊溶血性曼氏杆菌抗体的方法。本文件适用于羊溶血性曼氏杆菌P1pE蛋白抗体检测。
2 规范性引用文件
本文件没有规范性引用文件。
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1 酶联免疫吸附试验 (enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)
以固相载体吸附技术和免疫酶技术相结合建立的一种检测方法。通常在合适的载体上，酶标记抗体或抗原与相应的抗原或抗体形成酶标记的抗原-抗体复合物，在一定底物参与下，复合物上的酶催化底物，使其水解、氧化或还原成另一种带色物质。酶的降解底物和呈现色泽成正比，可以使用酶标仪进行测定，从而计算出参与反应的抗原或抗体的种类和含量。
3.2 辣根过氧化物酶 (horseradish peroxidase, HRP) 与碱性磷酸酶 (alkaline phosphatase, AKP)
常被用于免疫酶技术中的抗体或抗抗体的标记，形成仍保持免疫学活性和酶活性的酶标记物，进而催化底物产生水解、氧化或还原反应，最终生成可溶或不可溶有色物质。
3.3 溶血性曼氏杆菌 (Mannheimia haemolytica, Mh)
巴氏杆菌科曼氏杆菌属的微生物，球杆状或短杆状菌，两端钝圆，菜兰染色阴性，典型两端深染，中间浅，单个或成双存在，无鞭毛，有荚膜，不形成芽孢。
3.4 3,3',5,5'-四甲基联苯胺 (3,3',5,5'-tetramethylbenzidine, TMB)
用于酶联免疫吸附试验（ELISA）的可视化试剂。其可在辣根过氧化物酶（HRP）的催化下发生颜色变化。