【地方标准】 H7亚型禽流感病毒胶体金试纸条抗原检测方法

DB42/T1590-2020 H7亚型禽流感病毒胶体金试纸条抗原检测方法 前言 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》起草，由华中农业大学提出，湖北省农业农村厅归口。起草单位包括华中农业大学和武汉科前生物股份有限公司，主要起草人有金梅林、范俊青、李冉、董俊、王园园、但汉并、邹忠、董晓辉、徐高原。本文件实施应用中的疑问，可咨询湖北省农业农村厅（电话：027-87665821，邮箱：hbsnab@126.com）或华中农业大学（电话：027-87282038，邮箱：xys@mail.hzau.edu.cn）。对文件修改意见建议请反馈至华中农业大学（电话：027-87286905，邮箱：jm18328@126.com）。 引言 禽流感（avian influenza, AI）是由甲型流感病毒感染引起的禽类急性传染病。按致病力可分为无致病性、低致病性、中致病性和高致病性禽流感。H7亚型禽流感病毒属于高致病性禽流感，OIE将其列为必须上报的传染病，我国列为重点防范的人兽共患病。目前检测H7亚型禽流感病毒主要采用荧光定量PCR方法，优点为敏感性高，缺点是对操作人员要求高、试验条件苛刻且仪器昂贵。胶体金试纸条检测方法是一种现场快速检测方法，有助于疾病早发现、早报告、早处置，同时提供简单便捷的检测手段，支持高通量检测。 1 范围 本文件规定了H7亚型禽流感病毒胶体金试纸条抗原检测的术语和定义、检测原理、检测条件、检测方法及结果判定，适用于H7亚型禽流感病毒的检测。 2 规范性引用文件 本文件未引用其他规范性文件。 3 术语和定义 本文件未规定需特别界定的术语和定义。 4 检测原理 本文件采用双抗夹心检测抗原的方法制备胶体金试纸条，属于一步式固相膜反应。制备两株具有夹心效果的H7亚型禽流感病毒单克隆抗体，一株包被在硝酸纤维素膜上，另一株进行胶体金标记并固定在金垫上。在加样孔（A）加入待检样品时，样品中的抗原先与胶体金标记的单抗结合形成可见的红色金标抗体-抗原复合物。该复合物在毛细管作用下层析向前移动，与硝酸纤维素膜上的单抗结合，在检测线（T）处被捕获并截留，随着红色结合物累积形成红线，可判定样品为阳性；若无抗原，则T线保持白色，判定样品为阴性。质控线（C）出现红线表示检测有效。 胶体金试纸条结构示意图： A：加样孔；S：检测区；T：检测线；C：质控线。