【地方标准】 羊传染性脓疱病毒检测 环介导等温扩增（LAMP）法

ICS 11.220 B41 备案号：56331-2017 吉林省地方标准 DB22/T 2630—2017 羊传染性脓疱病毒检测 环介导等温扩增（LAMP）法 The detection of Orf virus by Loop-Mediated Isothermal Amplification (LAMP) method 2017-06-12发布 2017-08-12实施 吉林省质量技术监督局 发布 前言 本标准按照GB/T 1.1—2009和GB/T 20001.4—2015给出的规则起草。 本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。 本标准起草单位：吉林省畜牧兽医科学研究院、吉林省动物疫病预防控制中心。 本标准主要起草人：程荣华、邵洪泽、呼延含蓉、柴方红、卢松岩、王楠、李文东、毛文智、刘沂霖、赵欣、石春军、陆伟、何浩、孙健。 警示 使用本标准的人员应具备正规实验室工作经验。本标准未指出所有可能的安全问题，使用者有责任采取适当的安全与健康措施，并确保符合国家相关法规要求。 1 范围 本标准规定了羊传染性脓疱病毒（Orf病毒）环介导等温扩增（LAMP）检测方法的操作步骤及结果判定。 本标准适用于羊传染性脓疱病毒的实验室检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 试剂和材料 3.1 试剂 3.1.1 DNA提取试剂盒 3.1.2 LAMP试剂 包括： - 10×Bst DNA聚合酶缓冲液（200 mmol/L Tris-HCl，100 mmol/L KCl，100 mmol/L (NH4)2SO4，20 mmol/L MgSO4，1% Triton X-100，pH 8.8，25℃） - 25 mmol/L MgCl2 - 10 mmol/L dNTPs混合物（含dATP、dTTP、dCTP、dGTP） - 8 U/μL Bst DNA聚合酶 - 5 mol/L Betaine - ddH2O 3.1.3 其他试剂 SYBR Green I染料 3.2 特异性引物 引物序列及浓度见表1