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- DB22/T 2629-2017猪肠道微孢子虫检测 聚合酶链式反应(PCR)法
标准号:
DB22/T 2629-2017
标准名称:
猪肠道微孢子虫检测 聚合酶链式反应(PCR)法
标准类别:
吉林省地方标准(DB22)
标准状态:
现行-
发布日期:
2017-06-12 -
实施日期:
2017-08-12 出版语种:
简体中文下载格式:
.pdf .zip下载大小:
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标准简介:
本标准规定了猪肠道微孢子虫(Enterocytozoon bieneusi)聚合酶链式反应(PCR)检测方法的技术要求,包括试剂材料、操作规范及检测标准,适用于猪肠道微孢子虫的实验室检测与诊断。
部分标准内容:
ICS 11.220
B41
备案号:56330-2017
吉林省地方标准
DB22/T 2629—2017
猪肠道微孢子虫检测 聚合酶链式反应(PCR)法
Detection method of polymerase chain reaction (PCR) of Enterocytozoon bieneusi in pigs
2017-06-12发布
2017-08-12实施
吉林省质量技术监督局 发布
前言
本标准按照GB/T 1.1—2009和GB/T 20001.4—2015给出的规则起草。
本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。
本标准起草单位:吉林省畜牧兽医科学研究院。
本标准主要起草人:曹利利、郭衍冰、姚新华、苑淑贤、程荣华、姚琳、董航、邵洪泽。
1 范围
本标准规定了猪肠道微孢子虫PCR检测方法的技术要求。
本标准适用于猪肠道微孢子虫的实验室检测。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有修改单)适用。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB 19489 实验室生物安全通用要求
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1 猪肠道微孢子病(Intestinal microsporidiosis of pig)
由肠道微孢子虫(Enterocytozoon bieneusi)引起的猪的一种人兽共患寄生虫病,以腹泻为主要临床特征。
4 试剂和材料
4.1 试剂
除另有规定外,本标准所用试剂均为分析纯,实验用水为符合GB/T 6682的双重蒸馏水(ddH2O)。
4.1.1 粪便DNA提取试剂盒
4.1.2 10 mg/mL溴化乙锭(EB)溶液(见附录A.1)
4.1.3 50×TAE电泳缓冲液(见附录A.2)
4.1.4 1.5%琼脂糖凝胶(见附录A.3)
4.1.5 上样缓冲液(见附录A.4)
4.1.6 10×PCR缓冲液(见附录A.5)
4.1.7 Taq DNA聚合酶(200 U或2 U/μL)
4.1.8 10 mmol/L dNTPs
4.1.9 标准分子量DL2000 Marker
4.1.10 1.4 g/mL CsCl溶液(见附录A.7)
4.1.11 猪肠道微孢子虫阳性对照:肠道微孢子虫基因组DNA(10 ng/μL)
4.1.12 引物序列及浓度见表1
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