【地方标准】 高粱花叶病毒RT-PCR检测技术规程

DB53/T1082—2022 高粱花叶病毒RT-PCR检测技术规程
发布日期：2022-05-20
实施日期：2022-08-20
发布单位：云南省市场监督管理局

前言
DB53/T1082—2022
本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意，本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由云南省农业科学院甘蔗研究所提出，由云南省农业标准化技术委员会（YNTC07）归口。本文件起草单位为云南省农业科学院甘蔗研究所。主要起草人包括：李婕、黄应昆、单红丽、王晓燕、张荣跃、仓晓燕、王长秘、尹炯、罗志明。

1 范围
本文件规定了高粱花叶病毒RT-PCR检测方法中涉及的仪器与耗材、试剂、检测样品的取样及对照设置、检测方法和结果判定等。本文件适用于高粱花叶病毒（Sorghum mosaic virus，SrMV）侵染的植物样品的RT-PCR检测。

2 规范性引用文件
本文件没有规范性引用文件。

3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1 高粱花叶病毒 (Sorghum mosaic virus, SrMV)
高粱花叶病毒（Sorghum mosaic virus，SrMV）属于马铃薯Y病毒科（Potyviridae）马铃薯Y病毒属（Potyvirus），是引起高粱花叶病的主要病毒之一。参见附录A。
3.2 RT-PCR
反转录聚合酶链式反应（Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction，RT-PCR）的简称，是一种在体外利用反转录酶将RNA反转录为cDNA，再以cDNA为模板进行PCR扩增，以获得RNA特定片段的方法。

4 仪器与耗材
4.1 仪器
主要仪器包含电子天平、恒温水浴锅、高速台式冷冻离心机、蛋白/核酸分析仪、PCR扩增仪、涡旋混匀器、微波炉、电泳仪、水平电泳槽、凝胶像仪、可调微量移液器、研钵等。
4.2 耗材

5 试剂
5.1 常规试剂
液氮、焦碳酸二乙酯（DEPC）灭菌水或者RNase-free水、植物总RNA提取试剂盒、三氯甲烷、70%乙醇、异丙醇、无水乙醇等。