【地方标准】 鹅星状病毒病诊断与防控技术规范

ICS11.220 CCSB41 四 川 省地 DB51 方 标准 DB51/T3303-2025 鹅星状病毒病诊断与防控技术规范2025-09-15发布 四川省市场监督管理局 发布 2025-10-15实施 前言 1 2 3 4 5 6 7 8 9 范围 规范性引用文件 术语和定义 缩略语 实验室生物安全措施 临床诊断 实验室诊断 鹅星状病毒病综合判定 防控措施 附录A（规范性） 附录B（规范性） 附录C（规范性） 参考文献 RNA提取及反转录 鹅星状病毒RT-PCR检测 目 鹅星状病毒RT-gPCR检测 次 DB51/T3303—2025 II 8 10 前言 DB51/T3303—2025 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由四川省农业农村厅提出、归口、解释并组织实施。本文件起草单位：西南民族大学。本文件主要起草人：张焕容、杨发龙、张凯、陈果。1 1范围 鹅星状病毒病诊断与防控技术规范DB51/T3303—2025 本文件规定了鹅星状病毒病的临床诊断、实验室诊断和防控措施，包括流行特征、临床症状、部检病变、分子生物学诊断、病毒分离鉴定等诊断依据，以及预防措施、疫情处置等防控技术。本文件适用于鹅星状病毒病的诊断、预防和控制。2规范性引用文件 2 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB19489，实验室生物安全通用要求GB/T45093水禽新型星状病毒病诊断技术NY/T541兽医诊断样本采集、保存与运输技术规范术语和定义 3 下列术语和定义适用于本文件。3.1 鹅星状病毒病gooseastrovirus disease又称鹅痛风”，是由鹅星状病毒（GooseAstrovirus，GoAstV）感染维鹅引发的一种病毒性传染病。该病毒主要感染1周~3周龄鹅，病鹅主要表现为跛行、全身多组织器官表面广泛性尿酸盐沉积。4缩略语 下列缩略语适用于本文件。 Ct值：循环阅值（CycleThreshold）cDNA：互补DNA（ComplementaryDNA）GoAstV：鹅星状病毒（GooseAstrovirus）LMH：鸡肝癌细胞系（ChickenHepatomaCellLine）PBS：磷酸盐缓冲液（PhosphateBufferedSalineBuffer）RNA：核糖核酸（RibonucleicAcid）RT-PCR：反转录-聚合酶链式反应（ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction）RT-qPCR：实时荧光定量反转录PCR（Real-TimeQuantitativeReverseTranscriptionPCR）TAE：三羟甲基氨基甲烷-乙酸-乙二胺四乙酸缓冲液（Tris-aceticacid-EDTABuffer）实验室生物安全措施 5 实验操作应在生物安全二级及以上实验室进行，按照GB19489的规定执行。1 临床诊断 6 6.1流行特征 DB51/T3303-—2025 病鹅、隐性带毒鹅、带毒种蛋是主要传染源，自然感染潜伏期3d左右，既可垂直传播，也可水平传播，1月龄以内各品种鹅均易感，最早可在3日龄发病，以5日龄～20日龄最为常见，发病率为60%～90%死亡率为30%～50%，严重时可达60%。6.2临床症状 病鹅精神沉郁，食欲减退或废绝，消瘦，翅下垂，关节肿大，双腿瘫痪倒地，排白色稀便，泄殖腔周围稀便污染。 6.3剖检病变 患病鹅心、肝、脾、肺、肾、胃肠道等器官表面，各关节周围及关节腔内，甚至血管周围，可见白色尿酸盐沉积。 6.4临床诊断结果判定 同时符合6.1、6.2和6.3可判定为鹅星状病毒病疑似病例。7实验室诊断 7.1器材 同GB/T45093。 7.2样品采集与处理 按照NY/T541要求，采集病鹅的泄殖腔棉拭子，或采集死亡鹅及死鹅的肝、脾、肾等实质性器官。棉拭子采集后立即置于含有RNA保存液的离心管中，-20℃或以下保存：实质器官样品取5g～10g，置于RNA保存液中，-20℃或以下保存。所有样品应在48h内完成运输。随后，按照附录A或使用等效的商业试剂盒提取RNA，并反转录合成cDNA。7.3RT-PCR检测 以7.2的cDNA为模板，采用附录B规定的方法检测。7.4RT-qPCR检测 以7.2的cDNA为模板，采用附录C规定的方法检测。7.5病毒分离培养 7.5.1病毒分离样品的处理 取10g～20g在7.2或7.3中检测为阳性的病死鹅肝、脾、肾等组织样品剪碎，与无菌生理盐水按1:5（W/V)比例混合并磨碎，反复冻融三次，8000r/m、4℃离心15min后取上清，0.22μm滤膜过滤除菌后备用。 7.5.2细胞分离病毒 2