【地方标准】 食品中四氯虫酰胺残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法

DB37/T3990—2020
食品中四氯虫酰胺残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法
Determination of tetrachlorantraniliprole residue in foods-Liquid chromatographytandem mass spectrometry

前言
本标准按照 GB/T 1.1—2009 规定的规则起草。本标准由青岛海关提出、归口并组织实施。
本标准起草单位：青岛海关技术中心、黄岛海关。
本标准主要起草人：崔淑华、郭庆龙、张谦、王宇、刘宏玉、刘成帅、崔伟佳、逢昔莎、装萍。

1 范围
本标准规定了食品中四氯虫酰胺残留量的液相色谱-质谱/质谱检测方法。本标准适用于大米、玉米、甘蓝、番茄、苹果、干辣椒、猪肉、鸡肝、牛奶、鸡蛋中四氯虫酰胺残留量的测定，其它食品可参照执行。

2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

3 原理
试样经乙腈提取，分散固相萃取（油脂含量高的样品须先用乙腈饱和正己烷去脂和冷冻去脂）后，用液相色谱-质谱/质谱仪测定，外标法定量。

4 试剂和材料
除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为 GB/T 6682 规定的一级水。
4.1 试剂
4.1.1 乙腈 (CH3CN, 75-058)：色谱纯。
4.1.2 甲醇 (CH3OH, 67-56-1)：分析纯。
4.1.3 正己烷 (C6H14, 110-54-3)：色谱级；乙酸铵 (CH3COONH4, 631-61-8)：色谱纯。
4.1.4 氯化钠 (NaCl, 7647-14-5)：用前在 450℃ 灼烧 1 h，冷却后密封备用。
4.1.5 无水硫酸镁 (MgSO4, 7487-88-9)：用前在 650℃ 灼烧 4 h，贮藏在干燥器中，冷却后备用。

4.2 溶液配制
4.2.1 乙腈饱和正己烷溶液：取适量乙腈加入正己烷中，剧烈振摇，静置至出现明显分层，弃去乙腈层备用。
4.2.2 乙酸铵溶液 (5 mmol/L)：称取 0.385 g 乙酸铵用水溶解并定容至 1 L。

4.3 标准品
四氯虫酰胺 (Tetrachlorantraniliprole, C8H2Cl3N2O2, CAS号: 1101384-14-6)，纯度 $ge$ 95.5%。

4.4 标准溶液配制
4.4.1 标准储备溶液：准确称取适量的标准品（精确至 0.1 mg），用乙腈溶解，配制成浓度为 1000 $mu$g/mL 的标准储备溶液，该储备溶液 -18℃ 保存，保存期为一年。
4.4.2 标准中间溶液：准确吸取适量标准储备溶液，用甲醇配制成浓度为 10 $mu$g/mL 的标准中间溶液，该溶液 4℃ 保存，保存期为一个月。
4.4.3 基质标准工作溶液：根据需要准确吸取适量标准中间溶液，用样品空白基质溶液配制成 0.0005、0.001、0.002、0.005、0.01、0.02 mg/L 的系列标准工作溶液。该溶液应现用现配。

4.5 材料
4.5.1 N-丙基乙二胺 (PSA)：粒度 40～60 $mu$m。
4.5.2 十八烷基硅烷键合相 (C18)：粒度 40～60 $mu$m。
4.5.3 有机滤膜：0.22 $mu$m。

5 仪器和设备
5.1 液相色谱-三重四级杆质谱仪：配备电喷雾离子源 (ESI)。
5.2 高速组织捣碎机。
5.3 高速粉碎机。
5.4 匀浆机。
5.5 天平：感量 0.01 mg 和 0.01 g。
5.6 振荡器。
5.7 超声波仪。
5.8 离心机：转速不低于 8000 r/min。
5.9 涡旋混合器。
5.10 具塞离心管：50 mL, 10 mL。

6 试样制备与保存
6.1 大米、玉米、干辣椒：取 500 g 代表性样品，用高速粉碎机处理至粉状，均分成两份，分别装入洁净容器作为试样，密封并做好标识。于 -18℃ 以下保存。
6.2 甘蓝、番茄、苹果：取 500 g 代表性样品，用匀浆机制成匀浆，均分成两份，分别装入洁净容器作为试样，密封并做好标识。于 -18℃ 以下保存。
6.3 猪肉、鸡肝：取 500 g 代表性样品，用高速组织捣碎机制成糊状，均分成两份，分别装入洁净容器作为试样，密封并做好标识。于 -18℃ 以下保存。
6.4 牛 milk、鸡蛋：取 500 g 代表性样品，充分混匀，均分成两份，分别装入洁净容器作为试样，密封并做好标识。于 -18℃ 以下保存。

7 分析步骤
7.1 提取
7.1.1 大米、玉米：称取 4 g 试样（精确至 0.01 g）于 50 mL 具塞离心管中，加 5 mL 水混匀，放置 30 min。准确加入 20.0 mL 乙腈振荡提取 30 min，超声提取 5 min 后加入 3 g 无水硫酸镁和 2 g 氯化钠，涡旋振荡 1 min，8000 r/min 离心 5 min 后，待净化。
7.1.2 甘蓝、番茄、苹果：称取 10 g 试样（精确至 0.01 g）于 50 mL 具塞离心管中。准确加入 20 mL 乙腈振荡提取 30 min，超声提取 5 min 后加入 3 g 无水硫酸镁和 2 g 氯化钠，涡旋振荡 1 min，8000 r/min 离心 5 min 后，待净化。
7.1.3 干辣椒：称取 4 g 试样（精确至 0.01 g）于 50 mL 具塞离心管中，加 15 mL 水混匀，放置 30 min。准确加入 20.0 mL 乙腈振荡提取 30 min，超声提取 5 min 后加入 3 g 无水硫酸镁和 2 g 氯化钠，涡旋振荡 1 min，8000 r/min 离心 5 min 后，待净化。
7.1.4 猪肉、鸡肝、牛奶、鸡蛋：称取 4 g 试样（精确至 0.01 g）于 50 mL 具塞离心管中，加 5 mL 水混匀（检测牛奶时，不需加水），放置 30 min。准确加入 20.0 mL 乙腈振荡提取 30 min，超声提取 5 min 后加入 3 g 无水硫酸镁和 2 g 氯化钠，涡旋振荡 1 min，8000 r/min 离心 5 min 后，待净化。将 10 mL 上清液转移至 50 mL 具塞离心管中，加入 10 mL 乙腈饱和正己烷，涡旋振荡，静置分层，弃去正己烷层，再加入 10 mL 乙腈饱和正己烷重复操作一次，然后将离心管置于 -18℃ 冷冻 3 min 后，迅速取出 2 mL 提取液，待净化。

7.2 净化
称取 0.15 g 无水硫酸镁、0.10 g PSA 和 0.10 g C18 置 10 mL 管，吸取 2 mL 上述提取液至此离心管中，涡旋 1 min，8000 r/min 离心 5 min。取上清液过 0.22 $mu$m 有机微滤膜后，供液相色谱-质谱/质谱测定。

7.3 测定
7.3.1 液相色谱参考条件
条件如下：
a) 色谱柱：C18 柱，柱长 150 mm，内径 2.1 mm，粒径 3 $mu$m，或等效柱；
b) 流速：0.25 mL/min。