【地方标准】 牛结核病多方法联合诊断规程

DB42/T1843—2022 生结核病多方法联合诊断规程 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意，本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本文件由华中农业大学提出，由湖北省农业农村厅归口。本文件起草单位：华中农业大学、湖北劲牛牧业有限公司、高安市裕丰农牧有限公司。本文件主要起草人：陈颖钰、郭爱珍、章恺伦、闫钰、胡长敏、李翔、曾稳兵、杨建军、陈焕春。本文件实施应用中的疑问，可咨询湖北省农业农村厅，联系电话：027-87665821，邮箱：hbsnab@126.com；对本文件的有关修改意见建议请联系华中农业大学，电话：027-87286861，邮箱：chenyingyu@mail.hzau.edu.cn。 引言 牛结核病（Bovine Tuberculosis）是由结核分枝杆菌复合群成员牛分枝杆菌、结核分枝杆菌及山羊分枝杆菌等感染导致的一种慢性消耗性人兽共惠病，临床呈慢性经过，导致肺结核、肠结核、乳腺结核等多器官结核。在我国一、二、三类动物疫病的病种名录中，牛结核病规定为二类疫病。《国家中长期动物疫病防治规划（2012-2020年）》中，奶牛结核病被列为优先防治的动物病种。由于国家对牛结核病采取检疫扑杀策略进行控制和净化，准确诊断牛结核病是牛结核病控制、净化的重要前提。然而，牛结核病诊断缺乏快速、灵敏、低成本、适合于现场诊断的金标准。现有诊断方法包括：皮内变态反应（单皮内变态反应及比较皮内变态反应）、IFN-体外释放法、ELISA抗体检测法、临床剖检诊断、细菌学诊断及PCR检测等。 皮内变态反应是牛结核病检测中最经典的方法，敏感性高，成本相对低，但特异性较差，操作费时、费力；IFN-体外释放法是目前灵敏性和特异性均高的检测方法，48小时之内就可以出结果，但价格最为昂贵，且具有较高的实验室技术要求。该两种方法主要针对牛结核病的细胞免疫反应阶段，均适合于牛结核病的早期检测。ELISA抗体检测方法操作成熟，简便、快捷，适合于高通量检测；由于主要针对牛结核病的体液免疫反应阶段，适合于牛结核病的晚期检测。临床剖检诊断是基于观察结核结节等病理变化的死后诊断方法，适合于牛结核病的追踪溯源，但不适合于临床活体检测。结核分枝杆菌培养和种型鉴定准确性高，但敏感性差，耗时长，且需在生物安全三级实验室进行操作，同样不适合于临床检测。PCR检测能够对带菌组织样本或培养物进行种型鉴定，但由于牛结核病具有慢性经过和持续感染等特征，活体采样往往难以达到检测所需的菌量，因此，也不适合于活体检测。 为了在现有技术条件下提升牛结核病检测的敏感性和特异性，最大限度地减少假阳性牛错杀和假阴性牛漏检，本文件从各方法的检测原理、敏感性和特异性以及检测成本等多方面综合考虑，制定了一套适用于牛结核病不同流行背景和检测条件的多方法联合诊断方案，明确了牛结核病多方法联用的条件和技术，旨在为临床牛结核病的精准诊断提供依据。