【烟草标准】 烟用添加剂中马兜铃酸A的测定　高效液相色谱法

中华人民共和国烟草行业标准

YC/T 406—2011

烟用添加剂中马兜铃酸 A 的测定
高效液相色谱法

Determination of aristolochic acid A in tobacco additives—
High performance liquid chromatographic method

国家烟草专卖局  发布

前 言

本标准按照 GB/T 1.1 —2009 给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本标准由国家烟草专卖局提出。

本标准由全国烟叶标准化技术委员会烟用材料分技术委员会(SAC/TC 144/SC 8)归口。

本标准起草单位：云南烟草科学研究院、红塔烟草（集团）有限责任公司、红云红河烟草（集团）有限责任公司。

本标准主要起草人：张承明、陈永宽、缪明明、者为、王磊、孟昭宇、贺兵、夏建军、杨光宁、陆含铭、宾婕。

烟用添加剂中马兜铃酸 A 的测定
高效液相色谱法

1 范围

本标准规定了烟用添加剂（香精和料液）中马兜铃酸 A 的测定方法——高效液相色谱法。

本标准适用于烟用添加剂（香精和料液）中马兜铃酸 A 的测定。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅该日期版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

YC/T 145.10—2003 烟用香精 抽样

3 原理

采用含 0.1% 甲酸的甲醇-水混合溶剂萃取烟用添加剂中的马兜铃酸 A，经高效液相色谱仪分离，以紫外检测器测定，外标法定量。

4 试剂和材料

除特殊要求外，均使用分析纯试剂。

1. 4.1 水：符合 GB/T 6682 中一级水的要求。
2. 4.2 乙腈，CH₃CN，色谱纯。
3. 4.3 甲酸，HCOOH。
4. 4.4 甲醇，CH₃OH。
5. 4.5 马兜铃酸 A，C₁₇H₁₃NO₆ (CAS:313 67-7)，纯度≥97%。
6. 4.6 甲醇-水混合溶剂：体积比 9 : 1。
7. 4.7 萃取溶剂：取 1 mL 甲酸（4.3）置于 1 000 mL 容量瓶中，用甲醇-水混合溶剂（4.6）定容至刻度。
8. 4.8 标准溶液
   1. 4.8.1 一级标准储备液
      称取 100 mg（精确至 0.1 mg）马兜铃酸 A（4.5），用萃取溶剂（4.7）溶解转移至 100 mL 容量瓶中，定容至刻度并摇匀。在 2 ℃～8 ℃下保存，有效期 1 个月。
   2. 4.8.2 二级标准储备液
      准确移取 5.0 mL 一级标准储备液（4.8.1）至 100 mL 容量瓶中，用萃取溶剂（4.7）稀释定容至刻度并摇匀。在 2 ℃～8 ℃下保存，有效期 1 个月。
   3. 4.8.3 标准工作溶液
      分别准确移取 100 μL、300 μL、500 μL、1 000 μL、2 000 μL、4 000 μL 二级标准储备液（4.8.2）至 50 mL 容量瓶中，用萃取溶剂（4.7）定容至刻度，得到系列标准工作溶液。即配即用。