【地方标准】 动物组织中莱克多巴胺的残留测定——气相色谱质谱法

备案号：
安徽省地
方标准
DB34/T8262008
动物组织中莱克多巴胺的残留测定气相色谱质谱法
2008-08-01发布
2008-08-01实施
安徽省质量技术监督局发布
日纯伴区
本标准由安徽省畜牧兽医局提出。本标准由安徽省质量技术监督局批准。前言
本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。DB34/T8262008
本标准由起草单位：安徽省兽药饲料监察所、安徽省畜产品质量安全检测中心。本标准起草人：许世富、汤春莲、明文庆、陶小平、蔡东东。本标准于2008年8月1日首次发布。http：//foodmate.net/1范围
动物组织中莱克多巴胺的残留测定气相色谱质谱法
DB34/T8262008
本标准规定了动物肌肉、肝脏、肾脏中莱克多巴胺检验的制样和气相色谱一质谱（GC/MS）法测定方法。
本标准适用于动物肌肉、肝脏、肾脏中莱克多巴胺的定量检测和仲裁测定。本标准在动物肌肉、肝脏、肾脏中定量限为1.0ug/kg，线性范围：0.05ng～1.Ong。2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。3试样制备
肌肉、肝脏、肾脏动物组织，去筋后切成小块，制成肉糜后，于一18℃以下温度冷冻保存。4原理
用乙为提取剂提取试样中游离的莱克多巴胺，然后用固相萃取柱净化，双三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）+三甲基氯硅烷（TMCS）衍生，最后用GC/MS法进行分析。5试剂和溶液
5.1除非另有说明，本法所用试剂均为分析纯，水为去离子水，符合GB/T6682二级水的规定5.2双三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）+1%三甲基氯硅烷（TMCS）。5.3莱克多巴胺标准贮备溶液（5mg/mL）：准确称取50mg莱克多巴胺对照品于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，存放在冰箱中备用（一18℃保存90d）。5.4莱克多巴胺标准工作溶液：取莱克多巴胺标准贮备溶液，用甲醇稀释至所需浓度（4℃保存7d）5.5乙腈。bZxz.net
5.6正已烷。
5.7氯化钠。
5.8饱和氯化钠溶液：取过量氯化钠溶解于水中，取上清液。5.9无水硫酸钠。
5.10甲醇色谱纯。
5.11乙酸乙酯。
3%甲醇一乙酸乙酯溶液：取15mL甲醇加乙酸乙酯至500mL，混匀。5.1350%甲醇一乙酸乙酯溶液：取250mL甲醇加乙酸乙酯至500mL，混匀。5.14甲苯。
5.15固相萃取柱：500mg/3mL，填充料为硅藻土和硅胶，或相当者。1
6仪器设备
6.1气相色谱一质谱仪
6.2干燥箱。
6.3冷冻离心机。
6.4振荡器。
6.5涡旋混合器。
6.6分析天平：感量0.0001g。
6.7旋转蒸发仪。
6.8鸡心瓶50mL
6.9离心管：50mL，10mL。
6.10氮吹仪。
6.11固相萃取装备。
测定步骤
7.1试样提取
DB34/T8262008
称取匀浆后的动物组织样品试样10土0.1g至50mL离心管中，加10mL乙，涡旋2min，4℃条件下4000g离心5min，取上清液于分液漏斗中，加入10mL正已烷充分振摇，静置后分离乙相；另取10mL乙腈重复提取一次，再用同一份正已烷分配，合并两次分离的乙睛相，加入10mL饱和氯化钠溶液（5.8）充分振摇，静置后分离乙腈相，经无水硫酸钠过滤，用2mL乙腈洗涤无水硫酸钠，旋转蒸干。7.2试样净化
固相萃取柱依次用5mL甲醇和5mL乙酸乙酯润洗，用2mL乙酸乙酯溶解鸡心瓶中的残留物，过固相萃取柱（5.15）；另取5mL3%甲醇一乙酸乙酯（5.12）洗涤鸡心瓶中的残留物，过柱，抽干；再用5mL50%甲醇一乙酸乙酯（5.13）洗脱，收集，氮气吹干。7.3试样衍生
吹干剩余物加0.1mL双三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）+1%三甲基氯硅烷（TMCS），加盖于旋涡混合器上振荡，80℃的干燥箱加热1h，氮气吹干，加0.2mL甲苯溶解。另取适量的莱克多巴胺标准工作溶液（5.4），氮气吹干，与试样同法进行衍生化。7.4色谱条件
色谱柱：HP-5MS5%苯基甲基聚硅氧烷，（柱长30m，内径0.25mm，膜厚0.25um），或相当者。进样口温度：300℃。
升温程序：起始温度150℃，保持3min，以10℃/min升至230℃，保持10min，再以20℃/min升至280℃保持10min。
载气：高纯氢气（99.999%）。
流速：1.OmL/min（恒流），不分流进样。进样量：1.0μL。
7.5质谱条件
E1源：离子源温度：200℃。
E1源轰击能：70eV。
传输线温度：280℃。
EM电压：高于调谐电压200V。
扫描范围：30U～550U。
四极杆温度：160℃。
选择离子扫描（SIM）
监测离子（m/z）：250、267、179、502溶剂延迟：5min。
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6上机测定
DB34/T8262008
莱克多巴胺对照溶液和试液分别注入气相色谱一质谱联用仪，记录谱图，按外标法以峰面积进行计算。
结果计算
结果按下式计算：
式中：
样品中莱克多巴胺含量（ug/kg）：质谱测定对应莱克多巴胺量（ng）：取样量（g）：
稀释倍数。
测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留2位有效数字。检测方法灵敏度、准确度、精密度灵敏度
本方法莱克多巴胺的检测限为1.oug/kg。9.2准确度
本方法回收率均为70%~120%。
9.3精密度
本方法的批内变异系数CV≤15%，批间变异系数CV≤20%。http：//foodm
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