【地方标准】 蛋禽H5亚型禽流感免疫抗体卵黄检测技术规程

DB13/T946—2008
蛋禽H5亚型禽流感免疫抗体卵黄检测技术规程
地方标准
发布日期：2008-03-28
实施日期：2008-04-12
本标准由河北省畜牧兽医局提出。起草单位：河北省动物疫病预防控制中心、河北省畜牧兽医研究所。

1 范围
本标准规定了蛋禽H5亚型禽流感免疫抗体卵黄检测技术中的样本采集、试验准备、试验方法、结果判定等操作方法。本标准适用于用卵黄进行蛋禽H5亚型禽流感灭活疫苗免疫抗体检测。

2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可以使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T18936 高致病性禽流感诊断技术

3 术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
3.1 蛋禽：已经产蛋的禽类。
3.2 检样：经过直接稀释或氯仿萃取制备好的、用于检测的样品。
3.3 跳管：血凝抑制试验中，同-检样在反应板上出现的前、后孔凝集抑制而中间孔凝集的现象。

4 样本采集
采集蛋禽免疫接种后所产的新鲜离蛋。

5 试验准备
5.1 材料准备
5.1.1 仪器设备
96孔90°V型微量反应板、微量移液器、滴头、微量振荡器、离心机液体快速混合器、容量瓶。
5.1.2 试剂
a）葡萄糖、柠檬酸钠、柠檬酸、氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氢氧化钠、盐酸等。
b）禽流感病毒H5亚型HI抗原、禽流感病毒H5亚型阳性血清和阴性血清。

5.2 试液配制
5.2.1 阿氏（Alsevers）液配制
称取葡萄糖2.05g、柠檬酸钠0.8g、柠檬酸0.055g、氯化钠0.42g，用适量蒸馏水溶解后，移入100ml容量瓶中，定溶。用0.01mol/l氢氧化钠或0.01mol/L盐酸调pH值至6.1，在69kPa高压灭菌15min。