【地方标准】 禽蛋中沙门氏菌的检测-荧光PCR法

DB34/T 1539—2011
禽蛋中沙门氏菌的检测—荧光PCR法
Testing for Salmonella in Poultry eggs—Qualitative polymerase chain reaction (PCR) method
发布日期：2011-11-15
实施日期：2011-12-15
发布单位：安徽省质量技术监督局

前言
本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。
本标准由国家农副加工食品质量监督检验中心、安徽国家农业标准化与监测中心提出。
本标准起草单位：国家农副加工食品质量监督检验中心、安徽国家农业标准化与监测中心。
本标准主要起草人：陈戈、张波、汪永信、安虹、刘娟娟、程潇。

1 范围
本标准规定了窝蛋中沙门氏菌的荧光PCR检测方法。本标准适用于禽蛋及禽蛋制品中沙门氏菌的快速检测，也适用于该产品的风险预警监测及相关科学研究。

2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 4789.4 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验
GB/T 4789.19 食品卫生微生物学检验 蛋与蛋制品检验
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB 19489 实验室生物安全通用要求

3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件
3.1 CT值
PCR扩增过程中荧光信号强度达到阈值所需要的循环数。

4 方法原理
本方法是基于TaqMan实时荧光PCR技术，选取沙门氏菌种属特异性的invA基因序列设计引物和两端有荧光基团标记的寡核苷酸探针。PCR每进行一次循环，PCR产物的量与荧光信号的强度呈对应关系，当荧光信号超过所设定的阈值时，荧光信号可被检测出来。通过观察实时PCR扩增曲线，对样品中的沙门氏菌进行快速检测。

5 设备和材料
5.1 实时荧光PCR仪。
5.2 离心机。
5.3 微量移液器和灭菌吸头（10μL、100μL、200μL、1000μL）。
5.4 恒温培养箱。
5.5 恒温水浴锅。