【GA公共安全标准】 人毛发ABO血型检测解离法

ICS13.310
中华人民共和国公共安全行业标准GA655—2006
人毛发ABO血型检测
解离法
Detection method for ABO blood type in human hairs--Elution test2006-11-03发布
中华人民共和国公安部
2007-03-01实施
本标准的4.1a)为强制性的，其余为推荐性的。本标准的附录A为规范性附录。
本标准由全国刑事技术标准化委员会提出并归口。本标准起草单位：公安部物证鉴定中心、黑龙江省公安厅等。GA655-2006
本标准起草人：温佩忠、张大安、刘开会、李晓平、朱爱民、李澎、刘旭丹、常彩琴、张英兰、李兆隆等。1范围
人毛发ABO血型检测解离法
GA655—2006
本标准规定了法医生物物证检验中人毛发ABO血型检测的材料准备、操作方法和结果判定。本标准适用于从事法庭科学检验人毛发ABO血型。2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GA471—2004抗A、抗B血清试剂
3原理
解离法是利用抗原和抗体反应所形成的抗原抗体复合物，在一定条件下抗原抗体复合物可以释放抗体，而保持抗原和抗体原有的性质不变的原理来设计的。毛发检材中的ABO血型物质存在于髓质中，在抗A抗体或抗B抗体存在的情况下，发生抗原抗体反应，形成抗原抗体复合物。当在50℃～56℃条件下，抗原抗体复合物发生解离，使抗体游离于液体中，当温度降低至37℃左右时，游离的抗体与相应的指示红细胞抗原发生凝集反应，在显微镜下可观察到凝集块。根据与相应指示红细胞发生凝集反应的情况，可判断ABO血型。
4试剂与器材
4.1试剂
a）标准抗A抗体、标准抗B抗体试剂。符合GA471一2004的各项要求；b）A型、B型指示红细胞悬液(0.2%)(见附录A)；c）无水乙醇；
d）无水乙醚；
e）洗涤液；bZxz.net
f）生理盐水。
4.2器材
台式离心机；
光学显微镜；
负压吸引装置；
恒温箱；
冰箱；
加样器、加样器吸头；
眼科剪、眼科镊；
压毛机或其他替代设备、器材：凹玻板，
载玻片、盖玻片、载玻片架、保湿盒、毛细管；j）
记号笔、滤纸、脱脂棉。
GA655—2006
5.操作方法
5.1取待检毛发，用洗涤剂清洗，然后用无水乙醇浸泡20min~30min脱水，无水乙醚浸泡10min脱脂。
5.2用压毛机（也可用其他方法）将毛发压扁，使其暴露出毛发髓质，压后其直径约为压前的3倍～4倍。
5.3用洁净的眼科剪剪取压好的毛发两段，每段约0.4cm，分别置于凹玻板对应的上下两凹内，并分别标记A与B。
5.4按标记，分别在两凹内滴加相应的标准抗A、标准抗B抗体试剂各1滴～2滴，使毛发完全浸在抗体试剂中。将凹玻板置于保湿盒内，在负压760mmHg下，吸收20min，取出保湿盒，将其置于4℃冰箱中，吸收3h～4h或吸收过夜。
5.5取出毛发后，用滤纸轻轻吸去标准AB血清液体然后将毛发分别置于另一冷的凹玻板上下两凹内，用冷生理盐水洗涤4次
一次，最后，用吸管将洗涤用生理盐水液吸丢用洁净的眼科镊将毛发分别置于载玻片两端，并分别标记写B。5.6在A、B两段的毛发上分别滴加4.1b)中相应的指示红细胞悬液1滴，分别加盖玻片，并置56℃恒温箱中5min~10
5.7从恒温箱中敢出并置于室温保湿盒内，10min~20min后，取出载玻片，显激镜下观察凝集情况，记录凝集情况，结果判是，
6结果判定
结果判定
毛发检材编导
7注意事项
检验的同时应取已知
果才能采信。
表1解离法检测人毛发ABO血型结果判定A侧
结果判定
流型的毛发检材做对照，并只有当已知对照毛发结果正确时，样本的检验结7.2指示红细胞应新鲜配置，
详在显微镜下检查有无自凝集现象，隔天使用应进行洗涤。另外，指示细胞为同型多人份混合血液制备的较好。7.3抗体的效价不应低于1：128倍。7.4毛发压扁的程度，以暴露髓质而又不使毛干分离为宜。7.5抗体吸收时间不应少于3h~4h。7.6若无条件负压吸收，则应放于4℃冰箱，适当延长吸收时间，使之充分吸收。7.7吸收后的洗涤次数应根据洗涤的手法、轻重而相应调整。7.8加盖玻片时，应避免出现气泡。7.9在判断结果时，除了应考虑阳性和阴性对照外，还要注意AB抗原性的不均衡性，有时需要适当调高标准抗A抗体试剂效价。
配制材料
新鲜A型、B型人红细胞；
生理盐水；
离心机、离心管、吸管；
加样器、加样器吸头；
记号笔。
操作步骤
附录A
（规范性附录）
指示红细胞配制
GA655-—2006
A.2.1在3个10mL离心管上分别标记上A型、B型字样，并分别加人5mL～8mL生理盐水，然后分别加入约0.5mL新鲜A型、B型、O型人红细胞A.2.2将以上3个离心管离心，800x/min1000r/min，5min。A.2.3轻轻将上清液吸出、弃去。如果上清液为无色透明，进行下一步，如果上清液颜色淡红，则要重复A.2.1和A.2.2步骤，直至其颜色为无色透明。A.2.4用生理盐水将A.2.3洗涤后的红细胞分别配成0.2%A型、B型红细胞悬液。GA655-2006
中华人民共和国公共安全
行业标准
人毛发ABO血型检测解离法
GA655—2006
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开本880×12301/16印张0.5字数6千字2007年1月第一版2007年1月第一次印刷*
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