【地方标准】 甘薯茎腐病菌检疫鉴定方法

DB33/T2408—2021
甘薯茎腐病菌检疫鉴定方法
Detection and identification of Dickeya dadantii

2021-12-24 发布
浙江省市场监督管理局 发布
2022-01-24 实施

前言
DB33/T2408—2021
本标准按GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的要求起草。请注意本标准的某些内容可能涉及专利。本标准的发布机构不承担识别专利的责任。本标准由浙江省农业农村厅提出。本标准由浙江省种植业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：浙江省植保检疫与农药管理总站、浙江大学、浙江省植物保护学会。本标准主要起草人：楼兵干、李艳敏、沈肖玲、陆剑飞、施海萍、高其康、李国钧、张莉丽、李月红、刘丽华、仇智灵、姚海峰、王荣洲。

1 范围
本标准规定了术语与定义、缩略语、甘薯茎腐病菌PCR反应和实时荧光PCR反应体系的构成、试剂和材料、器材与设备、操作步骤和结果判定。本标准适用于甘薯根、茎、叶等植物材料甘薯茎腐病菌的检测。

2 规范性引用文件
本标准没有规范性引用文件。

3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1 the pathogen of stem and root rot of sweet potato 甘薯茎腐病菌
引起甘薯茎腐病的病原菌，属于细菌界（Bacteria）、变形菌门（Proteobacteria）、伽玛变形菌纲（Gammaproteobacteria）、肠杆菌目（Enterobacterales）、果胶杆菌科（Pectobacteriaceae）、狄克氏菌属（Dickeya）、达旦提狄克氏菌（Dickeya dadantii）。革兰氏阴性细菌，菌体短杆状，大小约为2.36μm×0.40μm，周生鞭毛，可在烟草上激发过敏性反应（HR）。注：症状特征见附录A。

4 缩略语
下列缩略语适用于本标准。
bp：碱基对（Base pair）
CFU：菌落形成单位（Colony-Forming Unit）
CTAB：溴代十六烷基三甲胺（Cetyltrimethylammonium bromide）
DNA：脱氧核糖核酸（Deoxyribonucleic acid）
dNTP：脱氧核苷三磷酸（Deoxyribonucleoside triphosphate）
HR：过敏性反应（Hypersensitive Reaction）
MALDI-TOFMS：软电离高分辨飞行时间串联质谱仪（Matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight-mass spectrometry）
NA：营养琼脂（Nutrient Agar）
NGM：营养琼脂甘油培养基（Nutrient Agar Glycerol Media）
PCR：聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction）
RT-PCR：逆转录-聚合酶链式反应（Reverse transcription-polymerase chain reaction）
Taq：水生噬热杆菌（Thermus aquaticus)