【SN商检标准】 牛尿苷酸合酶缺乏症荧光定量PCR检测方法

SN/T 4822-2017.Detection method of deficiency of uridine monophosphate synthase by RT-PCR.
1范围
SN/T 4822规定了牛尿苷酸合酶缺乏症荧光定量PCR检测的操作方法。
SN/T 4822适用于牛尿苷酸合酶缺乏症(参见附录A)的监测、诊断和鉴定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3缩略语
下列缩略语适用于本文件。
Ct值每个反应管内的荧光信号达到设定的阀值时所经历的循环数(cyclethreshold)
DUMPS尿苷酸合酶缺乏症(udeficiency of aridine monophos phate synthase)
RT-PCR实时 荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR)
SNP单核苷酸多态性single nucleotide polymorphism)
4操作方法
4.1样品采集和基因组的提取
4.1.1 血液采集
采用5mL真空肝素钠抗凝管,采集到血液后摇匀，使血液和抗凝剂混合均匀，以防血凝块的形成。
4.1.2 质控设置
阴性对照:以不含DUMPS基因的正常牛血样本DNA模板为阴性对照。
阳性对照:以含有目的基因序列的牛血DNA为PCR反应的模板，或采用含有目的基因的质粒为阳性对照。