【SN商检标准】 可可肿枝病毒检疫鉴定方法

SN/T 1617-2017.Detection and identification of Cacao swollen shoot virus.
1范围
SN/T 1617规定了可可肿枝病毒的检测方法。
SN/T 1617适用于进境植物材料中可可肿枝病毒的检疫检测。
2可可肿枝病毒基本信 息
学名:Cacao swollen shootvirus
缩写:CSSV
中文名:可可肿枝病毒
异名:Theobroma virus 1 ;Marmor theobromae ;T heobromavirus inflans。
分类地位:花椰菜花叶病毒科(Caulimoviridae);杆菌状DNA病毒属( Badnavirus)。
CSSV的其他信息参见附录A。
3方法原理
CSSV的蛋白和基因组特征是该病毒检疫鉴定的依据。根据CSSV与抗体之间的特异性反应,对植物样品进行双抗体夹心酶联免疫吸附测定(DAS-ELISA);依据CSSV的基因组特征建立PCR、实时荧光PCR;通过这些方法的有效组合，判断样品是否带有CSSV。
4仪器、用具及试剂
4.1仪器设备
酶联检测仪、天平(感量0.001g)、PCR仪、电泳仪、实时荧光PCR仪、电泳槽、紫外透射仪、隔离温室、榨汁机、水浴锅等。
4.2用具
可调移液器(200 pL、20 μL、2 μL)、可调移液器头、酶联板、离心管、指型管、研钵等。
4.3试剂
酶联测定试剂(见附录B)、聚合酶链式反应检测试剂(见附录C)。