【SN商检标准】 李属坏死环斑病毒检疫鉴定方法

SN/T 1618-2017.Detection and identification of Prunus necrotic ringspot virus.
1范围
SN/T 1618规定了植物检疫中李属坏死环斑病毒检疫鉴定方法。
SN/T 1618适用于植物材料中李属坏死环斑病毒的检疫鉴定。
2基本信息
学名:Prunus necrotic ringspot virus
缩写:PNRSV
分类地位:雀麦花叶病毒科( Bromovirus),等轴不稳环斑病毒属( Ilarvirus)。
该病毒的其他信息参见附录A。
3方法原理
根据李属坏死环斑病毒与抗体之间的特异性反应,对植物样品进行ELISA检测;根据该病毒核酸序列进行PCR特异性检测,通过电泳条带大小进行结果判定;根据该病毒核酸序列设计特异性引物和荧光探针，通过检测荧光信号进行结果判定。
4仪器设备及试剂
4.1仪器设备
酶标仪、天平(感量,1/10 000 g)、pH计、PCR仪、实时荧光PCR仪、电泳仪、电泳槽、凝胶成像系统、隔离温室、恒温水浴、低温冰箱等。
微量移液器(2 pμL,10 μL、20 μL、.100 μL、200 μL、1 000 pL)、酶联板、研钵、离心管、花盆、消毒土等。
4.2试剂
酶联免疫吸附测定试剂见附录B中B.1,RT-PCR检测试剂见附录C中C.1,实时荧光RT-PCR检测试剂见附录D中D.1