【SN商检标准】 输入性蚊类携带的黄热病毒检测方法

SN/T 1486-2016.Detection of yellow fever virus in imported mosquitoes.
1范围
SN/T 1486规定了国境口岸输人性蚊类携带黄热病毒的检测对象、生物安全措施、仪器和设备、主要试剂、检验程序阳性结果处置和废弃物的处理。
SN/T 1486适用于输人性蚊类体内携带黄热病毒的实验室检验。口崖发现的蚊类携带黄热病毒检测可参考本标准执行。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB 19489实验室生物安全通用要求
WS233微生物和生物医学 实验室生物安全通用准则
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件
3.1输入性蚊类imported mosquitoes
通过入境交通工具、集装箱、货物、行李及邮包等携带人境的蚊类
3.2黄热病毒yellow fever vires
属于黄病毒科(Flaviviridae黄病毒属(Flavivirus)单股正链RNA病毒,与同属的登革热病毒等有交叉免疫反应。病毒颗粒为直径37 nm~50 nm的球形外有脂蛋白包膜,包膜表面有刺突。基因组大小约为11 kb,只含有一个长的开放阅读框架。
3.3逆转录聚合酶链式反应reverse transcription polymerase chain reaction( RT-PCR)
将RNA的逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。本标准采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)。在RT-PCR中，首先以RNA为模板,利用下游特异性引物，在依赖RNA的DNA聚合酶(逆转录酶)的作用下转录合成互补DNA(eDNA),该步称作“逆转录";随后，再以cDNA 为模板，利用上游和下游特异性引物,在DNA聚合酶的作用下进行PCR循环扩增;最终使RNA分子的某个特定区域(目的片段)被扩增达几百万倍。