【SN商检标准】 国境口岸环介导恒温扩增(LAMP)检测方法第9部分:结核分枝杆菌

SN/T 3306.9-2017.Loop-mediated isothermal amplification detection method at frontier port-Part 9 :Mycobacterium tuberculosis.
1范围
SN/T 3306.9规定了国境口崇检测疑似传染病的疾样本中结核分枝杆菌的环介导恒温核酸扩增(LAMP)法。
SN/T 3306.9适用于国境口岸结核分枝杆菌的筛选检测。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682分析实验室用水规程和试验方法
GB 19489实验室生物安全通用要求
WS/T 230-2002 临床诊断中聚合酶链反应(PCR)技术的应用
WS 288肺结核诊断标准
(卫科教发(2006)15号)《人间传染的病原微生物名录》
4生物安全措施及防污染措施
实验操作及处理按照GB 19489和《人间传染的病原微生物名录》的规定,由具备相关资质的工作人员进行。
防止污染措施应符合WS/T 230的规定。
5技术概要
根据结核分枝杆菌的特异性毒力基因序列设计特异性内外引物及环状引物各一对,共6条引物,特异性识别靶序列上的gurB基因,利用Bst酶启动循环链置换反应,在特异性基因序列启动互补链合成,在同一链上互补序列周而复始形成有很多环的花椰菜结构的茎环DNA混合物;从dNTP析出的焦磷酸根离子与反应溶液中的Mg2+结合,产生副产物(焦磷酸镁)形成乳白色沉淀,即可通过反应液中的浑浊程度判定结果。亦可通过加入显色液,通过颜色变化观察判定结果。