【SN商检标准】 韦塞尔斯布朗病抗体血凝抑制试验检测方法

SN/T 4828-2017.Quarantine protocol for antibodies against Wesselsbrol disease virus by HI.
1范围
SN/T 4828规定了进出口动物韦塞尔斯布朗病抗体的血凝抑制试验检测方法。
SN/T 4828适用于进出口动物韦塞不斯布朗病抗体的检测
2缩略语
下列缩略语适用于本文件。
PBS:磷酸盐缓冲盐水
HA:血凝试验
HI:血凝抑制试验
HAU:血凝单位
3设备、材料和试剂
3.1设备
3.1.1台式离心机。
3.1.2振荡器。
3.1.3冰箱。
3.1.4恒温箱。
3.1.5微量可调移液器。
3.2材料和试剂
3.2.1 96孔V型微量反应板。
3.2.2含0.4%卵清蛋白的pH7.5PBS和含0.4%卵清蛋白的pH5.7 PBS,配制方法见附录A.
3.2.3阿氏(Alsevers)液,配制方法见附录B的B.1。
3.2.4 0.5%鹅红细 胞悬液,配制方法见B.2。
3.2.5韦塞尔斯布朗病血凝抗原，阳性血清和阴性血清。
3.3被检血清
无菌采集动物血液,凝固后离心分离血清,56℃灭活处理30min后,置于4℃或-20℃保存备用。
被检血清须采用高岭土鹅红细胞吸附法去除非特异性凝集素。按如下方法进行处理:0.1ml. 被检血清,加入0.4mLpH7.5磷酸盐缓冲液,再加入0.5 mL 25%高岭土,充分振荡混合,室温作用20min,然后1000r/min离心30min取上清,加入25pμL0.5%鹅红细胞悬液,轻轻振荡,冰浴吸附20 min,1000r/min离心10min,吸取上清,即为1:10稀释的被检血清。