【HG化工标准】 循环冷却水中军团菌的检测与计数

HG/T 4323-2012.Detection and enumeration of legionella in circulating cooling water.
1范围
HG/T 4323规定了循环冷却水中军团菌的检测与计数方法。
HG/T 4323适用于循环冷却水中军团菌的检测与计数,也适用于原水、生活用水及其他工业用水的军团菌的检测与计数。循环冷却水系统中沉积物和生物黏泥等相关样本中军团菌的检测也可参照本标准。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682-2008分析实验室用水规格和试验方法(mod ISO 3696 : 1987)
GB/T 27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测
GB/T 27405实验室质量控制规范食品微生物检测术语和定义
3术语与定义
GB/T 27405界定的以及下列术语和定义适用于本文件。
军团菌 legionella
是一类菌种的总称,为革兰阴性杆形菌,两端钝圆,有鞭毛,无芽孢和荚膜,大小为(0.3~0.9) μmX(2~20)μm,有41个种属、61个血清型。其中嗜肺军团菌(Legionella pneumophila,Lp)有15个血清型,是引起军团菌病的主要菌型。
4安全
本标准规定的检测应符合GB/T 27403并应在二级隔离的生物实验室(BSL-2)完成，检出军团菌的样品及培养基应经过无害化处理。
5方法提要
循环冷却水中军团菌数目一般达不到直接涂布检测的数目(105cfu/L),应通过膜过滤或离心方式浓缩水样中的微生物。为了减少杂菌对军团菌生长的抑制作用,对浓缩的微生物进行酸处理或热处理。将浓缩后的试样或滤膜转移到对军团菌具有选择性的GVPC培养基上培养,生长的菌落为疑似军团菌。军团菌的典型特性是在活性炭酵母提取液培养基(BCYE)生长而在L-半胱氨酸缺失的BCYE培养基(BCYE-Cys)不生长。利用这-特性将疑似军团菌在BCYE和BCYE-Cys两种培养基上进行培养,根据生长情况来确定是否为军团菌。另外,本标准中附录A给出了嗜肺军团菌的鉴定方法,在常规监测中可不进行嗜肺军团菌的鉴定,但是在军团菌疾病暴发时或有疑似病例时应进行嗜肺军团菌的鉴定。