【商检行业标准(SN)】 出入境口岸生物毒素检验规程 第3部分：蓖麻毒素

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1763.3—2006
出入境口岸生物毒素检验规程
第3部分：蘭麻毒素
Examination codes for biological toxin at entry-exit port-Part 3:Ricin
2006-04-25发布
华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2006-11-15实施
SN/T176山人境口岸生物雯悬检验规程共分为三个弃：第1部分：肉寿毒素；
第2部分：金黄色葡葡球茵肠毒素B：第3部分：跑麻毒索，
本部分是SN/T1763的第3部分
本部分出国家认认川监督管理委员会提出并归口。SV/T 1763.3—2006
本部分由中华人民共和国广东出人境检验检疫局负责起草,军事医学科学院微生物流行病研究所企准微准物检验砾究中心参加起学本部分主要起草人：潘德观、含达、琳.王避崴、邓红樱、王景林，闻闫剑剪本部分系百发布的山人境检验检疫行业标雅。１范围
出入境口岸生物毒素检验规程
第3部分：麻毒素
SN/T 1763. 3—2006
SN/11763的本部分规定「在出人境口岸对非临床来源栏品检验葩麻毒烹的程序和方法。本部分适三在出人境口岸对可疑食昂、水源利土壤及其他可葵污染物等非临床米源样战进行葩麻毒素现场快遮检验与实验室检验2规范性引用文件
下列文件中的条款通过SN/17的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修政单(不色括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各力研究是否可使用这些文伴的最新版本。凡是不注期的引压文件·其最新版本适用于本部分。
GB19.892C04实验室生物安全通用要求SN/11763.12006出人境口岸生物毒索检验规程肉率穿素WS2332002微牛物利生物医学实验室生物安全通用准则3术语和定义
SN/1°1763.1—2006确立的以及下列个语和定义适用于SV/\11763 木部分：3.1
葩麻毒素ricin
麓麻籽甲含有的种具细胞毒性作用的高毒性蛋凹质，4实验室生物安全要求
4.1实验牢成按照（GB:9/89200%和WS2332002对生物安全2级（BSI-2)实验室的兰物安全要求执行。
4.2使用过的实验用品应按照GB19489—2004对废弃物进行无害化处班，5检验对象
渡体样品：
固本或半流动体样品；
一地表面及物体衰面样品：
一草等物样品。
6设备
Ⅱ级牛物安企柜、高斥蒸汽灭齿器、普通冰箱,菩通台式离心机(莹密封的离心安企杯)、冷冻离心机(带密封的离心安伞杯),普道恒瀛培养箱、恒瀛水浴箔、酶标仪.洗板机SN/T 1763. 3—2006
7样品制备
应接照 SN/T 1763.1—2006 17.1~7,4的定进行,8检验程序
8.1胶体企免疫层析方达为初筛检验方法，ELISA定性示验为确认方汰。8.2初簇试验和确认试验可同时进行。确认试验结果也最终判定给果的依据。9检验方法
9.1胶体金免疫层析试验
本试验可尼三快速检验样品户有无麗麻毒素。9.1.1操作步骤
用微量移羧器或刻度吸管圾120I处理后的样品加人检验卡的样品孔，心mi后观测结果，15min观察终上。
9. 1. 2 结果判定
9.1.2.1当控制线（C)出现紫红色沉淀线，而检验线(T)不出现紫红色沉淀线时为阴性，即无鲍麻毒素检出。
9.1.2.2当控制线()和检验线（1)均吾现紫红色沉凝线时为阳性-太明样品中含有范麻市素。9.1.2.3当控制线(C)和检验线（1)均不出现紫红色沉淀线，或只有检验线（1)出现紫红色沉浣线，表小检验卡失效或实验失败
其体判定模式圈1。
a）1条沉淀线
9.1.3注意事项
洋品孔
h）两条沉凝线
图1检验卡结果判断示意图
心）无沁淀线
可使用等效的试剂盒过行本试验，操作止骤和结果判定应接试剂盒说明书逊行，9. 2EI.ISA 定性试验
9.2.1试验材料
茶乙烯96孔酶标板或酶标条，微量移液器5CuL、100L.2C0L，小烧杯50mL，玻棒直径人于等于 5 rtn,试 =0 mL-~25 fmL,刻度吸管 5 mL_0 mL 和量简 109 rnL9.2.2试剂
碳酸钠（NCO）、碳酸氢钠（NaICO）、磷一氢钾（KIHI,PO,）、磷酸氢一9. 2. 2. 1
(Na:IIPO,12II.0).氯钠(NaCl)、氢化辑(KC1）、吐温20(Twecn 20)、气血清白蛋白（BSA）、浓硫酸(98※)和四氨朕苯胺（TM13)，上述试剂均为分析纯，存放二常温通风下燥处。麓麻毒素单克隆菀体、HRP标记的范剪麻毒素单克隆抗体、阳性对照（重年麻毒素）、阴性对照（P13S溶液C.CImnl/I.：pH7. 2),均一29C保存。
9.2.2.20,85炎牛埋盐水·pH6.5 0,15 1no1/LPBS缓活液，包被缓冲液，洗涤缓冲液，封闭液终止液，A.B底物反应液等溶液配制见SN/T1763.1—2006附录A，2
9.2. 3操作步骤
SN/T 1763.3—2006
9.2.3.1包被：何孔灿人109μT.懿麻毒素H链免i清多抗(最伟稀释倍数为：2090)到49在酶标板中,4℃孵育过夜
9.2.3.2洗涤：弃1.清液，用洗涤缓冲液冲洗3次9.2. 3.3封闭;每孔加入_0G μL或阅液.37℃封阅 3C mn,重复 9.2. 3,2步骤洗涤，9.2.3.4加样：将100！I.待检样品释辫液机入标板中，设同体积的阴性对照,阳性对照孔,并设置牵广对照，37%.孵竹30min，重复9.2.3.2步爆洗涤9.2.3.5加酶标抗体：符孔加人100 μL IIRP酶标嘛毒素 A链单抗（最伟稀释穿数为11000)，37C孵育 15 min,重复 9.2. 3. 2兆骤洗涤。9.2.3.6加底物显色：每孔加人A、13底物缓冲液各5Gμ，37C显色1min：9.2.3.7终反应：tl2ol/l.硫酸终止正液0l.终止反应3mir，测定A5rm值。9.2. 4结果判定与计算
9.2.4，1肉眼直接观察：一白色背景直接肉眼观察：反应孔内黄征颜色越深，阳性程度越强阴性反应为无色或极浅，
9.2.4.2用姆标仪检验样品的A;5.mr值，以空白对照孔调零后测量。荠大丁阴性对照均值的2.1倍，即为性。
9.2.5注意事项
9.2.5.1待检样品应作平孔，两间A.心m值相差不应妞过1c%，如过10、应重新进本试验。
9.2.5.2使用等效的试剂盒逃行试验，操作步骤和结果判定应按试剂盒说明书近行，10检验报告
确认试验结果是最报告结某内依据。检验报告格参见SN/T1763.1一209附求BSN/T 1763. 3-2006
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出入境口岸生物毒素检验规程
第3部分：葩麻毒素
SN/T 1763. 3—2006
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2006个年8月第瓶2008年8月第改印划印数：2000
号：155C66-2-17025定价6.00元90059/
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