【商检行业标准(SN)】 进出口甜叶菊中总糖甙含量的测定方法比色法

进出口甜叶菊中总糖成含量的测定方法比色法Method for the determination of total stevioside contentin stevia dried leave for import and exportColorimetrySH0868—2000
代替ZBE39001—1987
本标准按照GBT1.1一1993《标准化工作导则第1单元：标准的起草与表述规则第1部分：标准编写的基本规定》编写的。本标准是对原专业标准ZBB39001-1987《出口甜叶菊中糖或含量的测定方法》的修订。本标准从实施之日起，同时代替ZBB39001—1987。本标准由中华人民共和国国家出入境检验检疫局提出并归口。本标准由中华人民共和国上海出入境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：王培粱。
1范围
本标准规定了进出口甜叶菊中总糖武含量的分光光度测定方法。本标准适用于进出口甜叶菊中总糖贰含量的测定。2测定方法
2.1方法提要
甜叶菊叶经沸水煮泡，用硫酸铝沉淀和正丁醇提职，以除去样品中色素、还原糖及其他杂质，得到的总糖贰水溶液与葱酮一硫酸溶液共同加热，生成绿色的络合物，比色法测定样品中的总糖贰，标准曲线法定量。2.2试剂
除另有规定，所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水。2. 2.1 硫酸铝：化学纯。
2.2.2水饱和正丁醇：将正丁醇用水饱和后备用。2.2.3葱酮显色剂：精确称取0.20=葱酮，溶于100mL75%硫酸溶液中（需用时现配)。2.2.4甜叶菊武标准储备溶液：精确称职甜叶菊或0.500g，用水溶解并移入100mL容量瓶中定容，此溶液相当于每毫升含5mg甜叶菊贰。2.2.5甜叶菊武标准工作溶液：取标准储备液10mL，定容到100mL，此溶液每毫升相当于0.5m甜叶菊贰。2.3仪器此内容来自标准下载网
2.3.1分光光度计。
2.3.2旋转蒸发器。
2.4测定步骤
2.4.1样品处理
准确称取1.000g样品于150mL烧杯中，加入60mL预先煮沸的蒸馏水，用玻璃棒搅拌浸湿，在沸水浴中加热1h。取出，过滤至250mL容量瓶中，滤纸上的残渣用60mL热水洗入原烧杯中，在水浴中加热1h，过滤于250mL容量瓶中，重复操作4次。滤液合并于同一250mL容量瓶中，并用水定容到刻度。
吸职上述滤液25mL于100mL烧杯中，加入0.2g硫酸钼。待溶解后，用碱调节至pH7，静置1h。将此溶液过滤于125mL分液漏斗中。用水洗涤残渣，最后使体积成50mL。用水饱和正丁醇50，25，25mL分三次提取，提取液收集于125mL鸡心瓶中，在旋转蒸发器上浓缩至千，用蒸馏水溶解浓缩物并移入100mL容量瓶中，定容。
2.4.2测定
吸取10mL葱酮显色剂于25mL比色管中，将比色管移入冰浴中冷却，10min后，准确加入1.00mL样液，并用玻璃捧不断搅拌，使溶液混合均匀。
取6支25mL试管，分别加入10mL葱酮显色剂，放入冰浴中，分别吸取甜叶菊贰标准工作溶液0.00，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50mL于试管内，分别依序加水1.00，0.90，0.80，0.70，0.60，0.50mL，用玻璃棒搅拌均匀，将样品溶液、试剂空白液及甜叶菊武标准溶液的试管放入沸水浴中加热10min，并不断搅拌。职出，于冰浴中冷却至室温。用1em比色血，以葱酮试剂作空白，于610zm处测吸光度，绘制标准曲线，样品得吸光值与曲线比较求出含量。
3结果计算与表述
按式(1)计算试样中的总糖武含量：X= #×250×100
式中，x—试样中总糖武含量，：c—测定样液中总糖或的质量，μg：m一样品质量，g
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